Na,KーATPase遺伝子の組織特異的発現制御機構

Na,K-ATPase基因的组织特异性表达控制机制

• 批准号: 02258219
• 负责人: 川上 潔
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02258219/
• 关键词: Na,KーATPア-ゼ; 組織特異的発現; トランフィフェクション; 転写制御

Na,KーATPaseの各アイソフォ-ムのうち、神経組織特異的に発現するβ2遺伝子および、どの組織でも発現するα1遺伝子について解析を行った。両遺伝子について、5'非転写領域を含む遺伝子断片を、CATまたはルシフェラ-ゼリポ-タ-遺伝子につないだ融合遺伝子を作成し、培養細胞へのトランスフェクションで、プロモ-タ-活性の測定を行った。その結果、次のことが明らかになった。1.β2遺伝子の5'上流域には2ケ所正の転写制御領域が存在し、B103細胞(ラット神経芽細胞腫)及びC6(ラットアストロサイト-マ)細胞で、ともに転写制御に関与している。そのうち上流側のエレメントはSp1結合部位のコンセンサス配例を有する。下流側のエレメントは、GGAGGCGGGGという配列をコアエレメントとしてもっているが、既知の転写因子の結合部位のコンセンサス配列には見られない塩基配列である。現在、この下流側のエレメントを複数コピ-もつDNAをβ2遺伝子のTATA配列の上流や、tk遺伝子の上流につなぎ、B103細胞や、C6細胞での特異的転写を促進するかどうかを検討中である。2.α1の遺伝子の5'上流域には、どの細胞タイプ、MDCK(犬賢臓)、B103(神経芽細胞腫)、L6(ラット骨格筋)、3YI(ラット胚)でも正の制御エレメントとして機能する3ケ所のエレメントと、MDCKのみで機能する1ケ所のエレメントを同定した。どの細胞タイプでも作用するエレメント中には、Sp1やATFのコンセン配列が含まれている。3.両遺伝子中のイントロン部分には、少なくとも種々の細胞タイプで3倍以上プロモ-タ-活性を正または負に変動させるエンハンサ-やサイレンサ-は見出せなかった。

Na,K-ATPase is a complex enzyme, and it is responsible for the analysis of β2 protein and α1 protein in brain tissue-specific tissues. The 5'non-coding domain contains a coding fragment, CAT is used to create a coding fragment, culture cells are used for coding, and the activity of the coding fragment is measured. The result is that the second time, the second time, the third time. 1. In the 5'upper basin of the β2 gene, there are two main areas of writing control, B103 cells (radict neuroblastoma) and C6(radict aromasitro it-) cells, which are related to writing control. The upstream side of the Sp1 binding site has a configuration example. The downstream side of the binding site of the known writing factor is arranged in the same way as the GGAGGCGG. Now, the downstream side of the gene expression system has a number of different genes, such as DNA, TATA, Tk, B103 and C6. 2.α1 gene 5'upper watershed, high level cell line, MDCK, B103, L6, 3YI are the same as 3, MDCK, MDCK. The cell phone function is included in the cell phone configuration. 3. The cell type of the seed is more than 3 times higher than the cell type of the seed. The activity of the seed is positive and negative.

项目成果

Kiyoshi Kawakami: "I dentifica tion of a cisーelement for neunonal cell type specific txpression of the β2 subunt gene of the Na^+,K^+ーATPase."

Kiyoshi Kawakami：“我鉴定了 Na^+,K^+ATP 酶 β2 亚基基因的神经细胞类型特异性表达的顺式元件。”

Kawakami,Kiyosi: "‘I denfitication of cisーelements regalating the β2 subunt gere of the Na^+,K^+ーATPase'In Proceeding of 6th Internatonal Couper of sodium pump" Rocketeller University Press, (1991)

Kawakami，Kiyosi：“‘I 顺式元素的定义调节 Na^+,K^+ーATPase 的 β2 亚基基’In Proceeding of 6th International Couper ofodium Pump”Rocketeller University Press，（1991）