心筋における神経型Na,K-ATPase α3サブユニット遺伝子の発現制御

心肌神经元Na,K-ATP酶α3亚基基因表达的调控

• 批准号: 08258223
• 负责人: 川上 潔
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08258223/
• 关键词: Na,K-ATPase α3サブユニット遺伝子; NF-Y; Sp1; Sp3; ゲルシフト法; メチル化干渉法; 心臓; 転写因子; 遺伝子発現制御

Na,K-ATPase αサブユニットには3つのアイソフォーム遺伝子が存在し各々発生段階やホルモンによる発現調節を受けている。Na,K-ATPase α3サブユニット遺伝子(Atp1a3)はラット脳及び新生心臓にのみ発現している。培養新生ラット心筋でのAtp1a3の転写を制御するシスエレメントと作用因子を解析することが本研究の目的である。Atp1a3-ルシフェラーゼ融合遺伝子を用いた一過性形質転換法による解析を行った結果、-74から-59及び-59から-39の間に正の制御エレメントの存在が明らかとなった。心筋細胞の核抽出液を用いたゲルシフト法によって、-59付近に結合する因子を同定した。メチル化干渉法とDNaselフットプリント法にて因子の結合領域は-74から-53(PRE1)であると同定した。本結合因子は特異的抗体を用いたゲルシフト法によりNF-Yであると判明した。ゲルシフト法と、メチル化干渉法によって、他に-54から-43(PRE2)および-25から-13(PRE3)の2つのエレメントに因子が結合することが明らかとなった。特異的抗体を用いた解析によりこれらのエレメントへの結合因子はSp1/Sp3であると同定された。上記3つのエレメントの機能を変異エレメントを組み合わせて一過性形質転換法にて解析したところ、いずれも正の転写制御エレメントとして機能し、synergicな転写活性化が見られた。

There is a link between Na,K-ATPase α and other parts of the body. There is an error in each segment. Na,K-ATPase alpha 3 and newborn heart were detected in Atp1a3 and newborn heart. The purpose of this study is to analyze the action factors of freshmen in Atp1a3. The Atp1a3- data fusion system is used to analyze the results of the data analysis by using the cross-sectional analysis method. The results show that there are significant differences between-74 and-59 and between-59 and 39. The extractive fluid of the nucleus of the heart muscle was determined by the method of cell nuclear extraction, which was determined by the combination of the factor of-59 and the concentration of-59. To determine the accuracy of the DNasel method, the factor of the method is the same as that of the field-74%-53 (PRE1). The specific antibody of this binding factor was identified by NF-Y assay. In this paper, we use the chemical method, the chemical method, the temperature, the temperature, the temperature, The specific antibody was analyzed by Elisa. The combination factor of Sp1/Sp3 antibody was the same as that of the other two. In the last three years, the information system system information system information system, synergic system is used to improve the performance of the system.

项目成果

Murakami,Y.: ""Promoter of the Na,K-ATPase α3 subunit gene is composed of cis elements to which NF-Y and Sp1/Sp3 bind in cardiac myocyte."" Biochim.Biophys.Acta.(in press). (1997)

Murakami, Y.：“Na,K-ATPase α3 亚基基因的启动子由心肌细胞中 NF-Y 和 Sp1/Sp3 结合的顺式元件组成。”Biochim.Biophys.Acta.（出版中）。 (1997)

Muto,S.: ""Differential regulation of Na^+-K^+-ATPase gene expression by corticosteroids in vascular smooth muscle cells."" Am.J.Physiol.270. C731-C739 (1996)

Muto,S.：“血管平滑肌细胞中皮质类固醇对 Na^-K^-ATP 酶基因表达的差异调节。”Am.J.Physiol.270。

Kawakami,K.: ""Characterization of the core promoter of the Na^+/K^+-ATPase α1 subunit gene : Elements required for transcription by RNA polymerase II and III in vitro."" Eur.J.Biochem.237. 440-446 (1996)

Kawakami, K.：“Na^+/K^+-ATPase α1 亚基基因核心启动子的表征：RNA 聚合酶 II 和 III 体外转录所需的元件。”Eur.J.Biochem.237。 440-446 (1996)

Kawakami, K.: "Structure, function and expression of a murine homeobox protein AREC3, a homologue of Drosophila sine oculis gene product, and implication in development." Nucl.Acids Res.24. 303-310 (1996)

Kawakami, K.：“鼠同源框蛋白 AREC3（果蝇正眼基因产物的同源物）的结构、功能和表达，以及对发育的影响。”

Kobayashi,M.: ""Phosphorylation of ATF-1 enhances its DNA binding and transcription of the Na,K-ATPase α1 subunit gene promoter."" Nucl.Acids Res.25. 877-882 (1997)

Kobayashi, M.：“ATF-1 的磷酸化增强了 Na,K-ATPase α1 亚基基因启动子的 DNA 结合和转录。”《核酸研究》25. 877-882 (1997)