Mechanism of unanchored polyubiquitin chain production

非锚定多聚泛素链的产生机制

• 批准号: 24659099
• 负责人: HATTORI Akira
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24659099/
• 关键词: ユビキチン; 脱ユビキチン化酵素; activity-based probe; プローブ; システインプロテアーゼ

Recently, it has been reported that unanchored Lys63-linked polyubiquitin chains can act as a scaffold protein linking TAK1 and TAB2 in the NF-kappaB signaling pathway. In this study, we synthesized a novel fluorogenic substrate, x3Ub(G76V)-Ub-AMC and an activity-based probe, x3Ub(G76V)-Ub-VS, which enable detection of the unanchored polyubiquitin chain-liberating activity by a native chemical ligation strategy. We showed that the activity profile for the x3Ub(G76V)-Ub-AMC hydrolysis in MonoQ fractions of HeLa cell extract was different from those for Ub-AMC and Ub-GrB hydrolysis, suggesting a possibility of the substrate for endo-cleavage type deubiquitinating enzymes. We also revealed that the x3Ub(G76V)-Ub-AMC hydrolyzing activity in HT1080 cells was attenuated by tumor necrosis factor stimulation, suggesting an involvement of endo-cleavage type deubiquitinating enzymes in inflammatory responses.

最近，据报道，未锚定的Lys 63连接的多聚泛素链可以作为连接NF-κ B信号通路中的TAK 1和TAB 2的支架蛋白。在这项研究中，我们合成了一种新的荧光底物，x3 Ub（G76 V）-Ub-AMC和基于活性的探针，x3 Ub（G76 V）-Ub-VS，这使得能够通过天然化学连接策略检测未锚定的聚泛素链释放活性。我们发现，HeLa细胞提取物的MonoQ组分中x3 Ub（G76 V）-Ub-AMC水解的活性曲线与Ub-AMC和Ub-GrB水解的活性曲线不同，表明可能是内切切割型去泛素化酶的底物。我们还发现，在HT 1080细胞中的x3 Ub（G76 V）-Ub-AMC水解活性被肿瘤坏死因子刺激减弱，这表明内裂解型去泛素化酶参与炎症反应。

项目成果

Chemical tagging of a drug target using 5-sulfonyl tetrazole

使用 5-磺酰四唑对药物靶标进行化学标记

• DOI: 10.1016/j.bmcl.2013.01.092
• 发表时间: 2013
• 期刊: Bioorg Med Chem Lett
• 影响因子: 2.7
• 作者: Otsuki S;Nishimura S;Takabatake H;Nakajima K;Takasu Y;Yagura T;Sakai Y;Hattori A;& Kakeya H
• 通讯作者: & Kakeya H

脱Urm1化活性の検出および分子同定

de-Urm1活性检测及分子鉴定

• 发表时间: 2014
• 作者: Kishimoto S;Tsunematsu Y;Nishimura S;Hayashi Y;Hattori A;& Kakeya H;青木豊,朴錦花,小林万祐子,服部明,掛谷秀昭;小林万祐子,服部明,青木豊,掛谷秀昭
• 通讯作者: 小林万祐子,服部明,青木豊,掛谷秀昭

Role of glutamine-169 in the substrate recognition of human aminopeptidase B

谷氨酰胺-169 在人氨肽酶 B 底物识别中的作用

• DOI: 10.1016/j.bbagen.2014.01.002
• 发表时间: 2014
• 期刊: Biochim Biophys Acta
• 作者: Ogawa Y;Ohnishi A;Goto Y;Sakuma Y;Watanabe J;Hattori A;Tsujimoto M
• 通讯作者: Tsujimoto M

Exon 10 Coding Sequence Is Important for Endoplasmic Reticulum Retention of Endoplasmic Reticulum Aminopeptidase 1

外显子 10 编码序列对于内质网氨肽酶 1 的内质网保留很重要

• DOI: 10.1248/bpb.35.601
• 发表时间: 2012
• 期刊: Biological and Pharmaceutical Bulletin
• 影响因子: 2
• 作者: Hattori A;Goto Y & Tsujimoto M
• 通讯作者: Goto Y & Tsujimoto M

脱ユビキチン化酵素(USP)47の活性発現における分子内ユビキチン様ドメインの役割

分子内泛素样结构域在去泛素酶 (USP) 47 活性表达中的作用

• 发表时间: 2012
• 作者: 小林万祐子;服部明;青木豊;掛谷秀昭;朴錦花,服部明,青木豊,小林万祐子,森吉英子,掛谷秀昭;朴 錦花;服部明,西川未来子,朴錦花,小林万祐子,森吉英子,掛谷秀昭;朴錦花,服部明,青木豊,小林万祐子,森吉英子,掛谷秀昭
• 通讯作者: 朴錦花,服部明,青木豊,小林万祐子,森吉英子,掛谷秀昭