Biochemical and physiological studies on deubiquitinating enzymes based on an analysis of the enzymatic activity dynamics

基于酶活性动力学分析的去泛素化酶的生化和生理学研究

• 批准号: 23310160
• 负责人: HATTORI Akira
• 金额: $ 12.81万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23310160/
• 关键词: ユビキチン; 脱ユビキチン化酵素; activity-based probe; 活性制御; 酸化ストレス; プローブ; ユビキチン様ドメイン; プロテアーゼ; アクティビティーベースドプローブ; プロテオミクス解析; activety-based probe

Post-translational modification of cellular proteins by ubiquitin (Ub) is involved in various aspects of cell physiology, such as protein degradation via proteasome, DNA repair, and membrane trafficking. Deubiqutinating enzymes liberate a Ub moiety from polyUb chains attached on substrate proteins. In the current study, we investigated novel research tools for the enzymatic characterization of deubiquitinating enzymes. Ub-granzyme B (Ub-GrB), an N-terminal Ub fusion mature granzyme B was expressed in a baculovirus system. By employing Ub-GrB, we showed that human ubiquitin specific protease 47 is active. In addition, we explored oxidative stress-sensitive deubiquitinating enzymes, and found that ubiquitin C-terminal hydrolase-L3 is susceptible to reactive oxygen species by utilizing a Ub activity-based probe, Ub-vinyl sulfone.

泛素（ubiquitin，Ub）对细胞蛋白质的翻译后修饰涉及细胞生理学的各个方面，如蛋白酶体降解、DNA修复和膜运输等。去泛素化酶从附着在底物蛋白上的polyUb链释放Ub部分。在目前的研究中，我们研究了新的研究工具，酶的特性去泛素化酶。Ub-颗粒酶B（Ub-GrB）是一种N-末端融合的成熟颗粒酶B。通过使用Ub-GrB，我们表明人泛素特异性蛋白酶47是有活性的。此外，我们探讨了氧化应激敏感的去泛素化酶，并发现泛素C-末端水解酶-L3是敏感的活性氧物种，利用Ub活性为基础的探针，Ub-乙烯砜。

项目成果

グランザイムB をレポーターに用いた脱ユビキチン化酵素活性測定法の構築

以颗粒酶B为报告基因测定去泛素化酶活性的方法构建

• 发表时间: 2011
• 作者: 服部明;朴 錦花;田代亜衣香;森吉英子;掛谷秀昭
• 通讯作者: 掛谷秀昭

脱ユビキチン化酵素(USP)47の活性発現における分子内ユビキチン様ドメインの役割

分子内泛素样结构域在去泛素酶 (USP) 47 活性表达中的作用

• 发表时间: 2012
• 作者: 小林万祐子;服部明;青木豊;掛谷秀昭;朴錦花,服部明,青木豊,小林万祐子,森吉英子,掛谷秀昭;朴 錦花;服部明,西川未来子,朴錦花,小林万祐子,森吉英子,掛谷秀昭;朴錦花,服部明,青木豊,小林万祐子,森吉英子,掛谷秀昭
• 通讯作者: 朴錦花,服部明,青木豊,小林万祐子,森吉英子,掛谷秀昭

Association of epigenetic alterations in the human C7orf24 gene with the aberrant gene expression in malignant cells

• DOI: 10.1093/jb/mvt063
• 发表时间: 2013-10-01
• 期刊: JOURNAL OF BIOCHEMISTRY
• 影响因子: 2.7
• 作者: Ohno, Yuji;Hattori, Akira;Kakeya, Hideaki
• 通讯作者: Kakeya, Hideaki

C7orf24/gamma-glutamyl cyclotransferase as a molecular target for cancer chemotherapy

C7orf24/γ-谷氨酰环转移酶作为癌症化疗的分子靶点

• 发表时间: 2012
• 期刊: Nihon Rinsho
• 作者: Ohno Y;Hattori A;& Kakeya H
• 通讯作者: & Kakeya H

脱ユビキチン化酵素(USP)47の活性発現機構の解析

去泛素化酶（USP）活性表达机制分析47

• 发表时间: 2013
• 作者: 小林万祐子;服部明;青木豊;掛谷秀昭;朴錦花,服部明,青木豊,小林万祐子,森吉英子,掛谷秀昭
• 通讯作者: 朴錦花,服部明,青木豊,小林万祐子,森吉英子,掛谷秀昭