ブロイラーにおけるカンピロバクターのキノロン系抗菌剤耐性化メカニズムの検討

肉鸡弯曲杆菌对喹诺酮类抗菌药物耐药机制的研究

• 批准号: 10760180
• 负责人: 中馬 猛久
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10760180/
• 关键词: カンピロバクター; ブロイラー; キノロン耐性; gyrA遺伝子

昨年度の研究では、キノロン耐性C.jejuniの多くにDNAgyrase subunitAをコードする遺伝子gyrAに点変異が確認され、実験的に作成されたキノロン耐性株の解析から、キノロンの曝露による遺伝子変異と耐性獲得との関連性が示唆された。本研究ではキノロン耐性C.jejuniを用い、キノロン曝露によるC.jejuniのporinの構造的、機能的変化と薬剤感受性との関係について検討を行なった。6株の野外キノロン耐性株から抽出した外膜蛋白をSDS-PAGEを用いて標準菌株であるCampylobacter jejuniATCC33560株と比較した結果、6株すべて標準菌株と異なる分子量の主要外膜蛋白がみられた。これらの主要外膜蛋白を標準菌株のporinを用いて作成した抗血清を使い、ウェスタンブロッティングを行なった結果、標準菌株のporinと他のすべての菌株の分子量の異なる外膜蛋白に反応がみられ、免疫学的に相同性をもつことがわかった。このことから、これら分子量の異なる外膜蛋白は、porinが構造的に変異したと考えられるとともに、キノロンの曝露とporinの変異との関連が疑われた。キノロン曝露によるporinの変異を実験的に調べるため、14株のin vitro変異株から抽出した主要外膜蛋白を用いて同様の検討を行なった。この結果、1株でporinの変異が認められ、実験的にもキノロンの曝露がporinの変異を誘導されることが示された。porinの変異が菌の感受性に与える影響を調べるために、in vitro変異株を用いて、テトラサイクリンとエリスロマイシン(EM)のMICを測定した結果、porinの変異が認められた株でEMに対する著しい感受性の上昇がみられ、キノロンの曝露が他の菌の他の抗生物質に対する感受性に影響を与えることが示唆された。

In the past year, the study of C.jejuni's multiple DNA gyrase subunitA was carried out to confirm the relationship between C.jejuni's multiple DNA gyrase subunitA and C. jejuni. In this study, the structure and function of C. jejuni porin were studied. The outer membrane proteins of 6 strains isolated from field resistant strains were analyzed by SDS-PAGE and compared with those of Campylobacter jejuniATCC33560 strains. The molecular weights of 6 strains isolated from standard strains were different from those of other strains. The main outer membrane protein of the standard strain is porin. The antiserum is prepared by using the porin. The results show that the porin of the standard strain is different from the molecular weight of the other strain. The outer membrane protein is antiserum. The identity of the standard strain is different. The difference in molecular weight between the two proteins is doubtful. The main outer membrane proteins were extracted from 14 strains of virotoxin. The results showed that 1 strain of porin was different from that of other strains, and the exposure of porin was different from that of other strains. The sensitivity of porin to other antibiotics is increased by exposure to other antibiotics.