低酸素性肺高血圧をもたす細胞外基質合成亢進に関与する転写調節機構の解明

阐明导致缺氧性肺动脉高压的细胞外基质合成增加所涉及的转录调控机制

• 批准号: 10770278
• 负责人: 高橋 滋
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Tokyo University of Pharmacy and Life Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770278/
• 关键词: プロリルヒドロキシラーゼ; 低酸素; 肺高血圧; 転写調節; コラーゲン; 遺伝子

まず、前年度にクローニングしたラット,prolyl 4-hydroxylase(P4H)α(I)染色体DNAの制限酵素地図を作製した。そして、exon1を含む約3.1kbのDNA断片の塩基配列を解読した。その結果、転写開始点よりも上流-86〜-79の領域に低酸素応答性配列と相同性の高い塩基配列が存在した。ラット胎児肺繊維芽細胞を用いてルシフェラーゼアッセイを行ったところ、この配列は低酸素濃度に応答しプロモーターからの転写量を6倍に上昇させ得ることか分かった。さらに、ゲルシフトアッセイによりこの配列にはhypoxia inducible factor-1(HIF-1)が相互作用しうることもわかった。以上の結果から、P4H α(I)遺伝子の低酸素による転写量の上昇は上流-86〜-79の領域に転写調節因子のHIF-1が作用することによって、引き起こされていることが強く示唆された。

Prolyl 4-hydroxylase(P4H)α(I) is a restriction enzyme for chromosomal DNA. Exon1 contains about 3.1 kb DNA fragment and nucleotide sequence. As a result, the low acid content and the high content of the same base exist in the upper-86 ~-79 region of the writing start point. The amount of vitamin D in fetal lung cells increased by 6 times due to low acid concentration. The interaction between hypoxia inducible factor-1(HIF-1) and HIF-1 is described in detail below. The results showed that the increase of the content of P4H α(I) gene in the low acid level increased from-86 to-79 in the high acid level, and the effect of HIF-1 on the high acid level increased from-86 to-79.

项目成果

Y.Takahashi,S.Takahashi et al.: "Hypoxic Induction of Prolyl 4-Hydroxylaseα (I) in Cultured cells"J.Biol.Chem.. (in press). (2000)

Y. Takahashi、S. Takahashi 等人：“培养细胞中脯氨酰 4-羟化酶α (I) 的缺氧诱导”J. Biol.（印刷中）。

S.Takahashi et al.: "Positive and Negative regulation of the human heme oxygenasel gene expression in cultured cells"Biochimica et Biophysica Acts. 1447. 231-235 (1999)

S.Takahashi 等人：“培养细胞中人血红素加氧酶基因表达的正向和负向调节”Biochimica et Biophysicala Acts。

S.Takahashi et al.: "Oxygen Tension Regulates Heme Oxygenase-1 Gene Expression in Mammalian Cell Lines" Cell Biochem.Funct.16. 183-193 (1998)

S.Takahashi 等人：“氧张力调节哺乳动物细胞系中血红素加氧酶 1 基因表达”Cell Biochem.Funct.16。

Y.Takahashi, S.Takahashi et al.: "Hypoxia-induced expression of phosphoglycerate mutase B in fibithlast" Eur.J.Biochem.254. 497-504 (1998)

Y.Takahashi、S.Takahashi 等人：“fibithlast 中磷酸甘油酸变位酶 B 的缺氧诱导表达”Eur.J.Biochem.254。