食品添加物が引き起こす遺伝子発現変化の簡易測定法の栄養生化学実験への組み込み

将测量食品添加剂引起的基因表达变化的简单方法纳入营养生化实验

• 批准号: 20934012
• 负责人: 横山 嘉子
• 金额: $ 0.33万
• 依托单位: 学校法人大手前学園大手前栄養学院専門学校
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20934012/
• 关键词: 食品添加物; 遺伝子発現; アポトーシス

研究目的:近年、食の安全性における食品添加物の問題が大きな話題となり、栄養士、管理栄養士の食品添加物への深い理解の必要性が増大している。しかしながら、栄養学教育では、食品添加物は、食品中の添加物の定性、定量などの実習は行われているものの、個々の添加物に関して、細胞、生体維持に必要なプロセスへの影響、作用機構などについての生化学的な観点からの授業、実習は行われていない。本研究では、OPP(オルトフェニルフェノール)やBHA(ブチルヒドロキシアニソール)などの食品添加物により変動するアポトーシス関連の遺伝子について、その挙動を検討し、管理栄養士養成施設での栄養教育における応用を検討することを目的とした。研究方法:ヒト白血病細胞(U937細胞)を用い、OPP及びBHAを投与し、経時的に培養細胞からmRNAの抽出を行いそれを鋳型にオリゴdTプライマーを用いて、cDNAを作成する。得られたcDNAについてアポトーシス関連遺伝子Bc1-2ファミリー(Bc1-2、Bc1-XL、Bax)、カスパーゼ(カスパーゼ-2、3、6、7、8)などの発現量をPCR法により詳細に検討する。更にヒト乳癌細胞(MRK-nu-1細胞)などを用いた実験でも、細胞死の促進、抑制の両側面の作用が報告されているFLIP遺伝子群についてもその発現量の検討を行った。研究成果:まずOPPやBHAの添加によりアポトーシス関連遺伝子Bc1-2ファミリー(Bc1-2、Bc1-XL、Baxなど)のうちBc1-2およびカスパーゼ-3、8の発現の変動についての実験を行った。Bcl-2はわずかであるが発現量の低下が見られた。カスパーゼヨについては変動は認められなかった。カスパーゼ-8はOPPでのみ大幅な減少が認められた。これらの結果から、食品添加物の予想外の活性の一部が明らかになった。食品添加物が危険か否かという極論はおくとしても、栄養教育の場で自分たちが摂取している物質についての実験を通して考えてゆく基礎になると考える。これこそが本研究の目的とするものである。

研究目的：近年来，食品安全方面的食品添加剂问题已成为一个主要话题，并且需要营养学家和注册营养师以更深入地了解食品添加剂。然而，在营养教育中，尽管对食物中的食物添加剂进行了实践培训，例如食物中的定性和定量添加剂，但从生化的角度来看，没有关于对细胞的影响和维持生物学机构和作用机制所必需的对细胞影响和过程的实际添加剂的类别或实践培训。这项研究旨在检查与凋亡相关的基因的行为，这些基因的行为随诸如OPP（OPP（正苯基苯酚））和BHA（丁基羟基烷酶）等食物添加剂不同，并检查其在注册营养师培训设施中的营养教育中的应用。研究方法：使用人白血病细胞（U937细胞）对OPP和BHA进行施用，并随着时间的推移从培养的细胞中提取mRNA，并使用该模板使用寡素底漆来创建cDNA。与凋亡相关的基因BC1-2（BC1-2，BC1-XL，BAX），caspase（caspase-2，3，6，6，7，8）等的表达水平将通过PCR方法详细研究。此外，在使用人类乳腺癌细胞（MRK-NU-1细胞）的实验中，还检查了据报道促进和抑制细胞死亡的FLIP基因的表达水平。研究结果：首先，我们通过添加OPP和BHA进行了一项实验，对与凋亡相关基因的BC1-2和caspase-3和8的表达变化（BC1-2，BC1-XL，BAX等）进行了实验。尽管观察到表达水平的Bcl-2略有降低。没有观察到Caspaseyo的变化。发现Caspase-8仅在OPP中显着降低。这些结果揭示了食物添加剂的一些意外活动。尽管我们抛弃了食品添加剂是否危险的极端论点，但我们认为这将是思考我们在营养教育中摄入的物质的基础。这是这项研究的目的。