難溶性薬物のキャリアーを目指した大環状ヘリ-クス蛋白質の創製

创建大环螺旋蛋白作为难溶性药物的载体

基本信息

批准号：
08772021
负责人：
二木史朗
金额：
$ 0.7万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

難溶性の薬物を可溶化し、生体内のターゲットサイトに効果的に輸送する事は、新薬開発上の大きな課題である。この目的のために、シクロデキストリン、リポソーム、合成高分子などさまざまな素材のドラッグキャリアーとして応用を試みられてきているが、キャリアー自体の包接能、ターゲットサイトでの薬物の放出、キャリアーの安定性や毒性など、種々の解決されねばならない問題が残っている。本研究では、立体的にデザインした合成ペプチドを新しいタイプのドラッグキャリアーとして応用するための基礎として、まず、キャリアー分子の構築法の開発を行った。20残基程度の長さからなる4本の両親媒性ヘリックスをFmoc型固相合成法で調製し、これを脱保護精製した後、これらを4本のジスルフィド結合によって選択的に架橋することにより、90残基程度の残基からなる大環状ヘリックス蛋白質を容易に構築しうることを見出した。また、この人工蛋白質が水中で安定なヘリックス構造を取りうることも確認した。さらに、選択的チオエーテル形成により熱や変性剤に大して非常に安定な大環状ヘリックス蛋白質を構築する方法も別途に考案した。これらの分子は中心部に疎水面を持ち、分子中のすべてのヘリックスの両端がリンカーで連結されているために、安定に疎水性の薬物を抱合できると期待できる。これらの蛋白質の薬物取り込み能および、膜との相互作用による薬物放出に関しては蛍光などを用いる分光学的方法などを用いて、現在、検討中である。

溶解可溶的药物并有效地将其运送到体内的靶位部位是开发新药的主要挑战。为此，已经尝试将各种材料（例如环糊精，脂质体和合成聚合物）应用于药物携带者，但是必须解决的各种问题，例如载体本身的包含能力，在目标部位，携带者稳定性和毒性中释放药物的释放。在这项研究中，我们首先开发了一种构造载体分子作为将其设计合成肽应用于新型药物载体的基础的方法。通过FMOC型固相合成方法制备了四个由约20个残基组成的两亲性螺旋，脱落和纯化，然后通过四个二硫键选择性地通过四个二硫键进行选择性交联，发现可以轻松构建由约90个残基组成的大环螺旋蛋白。还确认该人造蛋白可以在水中具有稳定的螺旋结构。此外，已经分别设计了一种构建大环螺旋蛋白在高温和修饰剂中高度稳定的方法。这些分子在中心具有疏水表面，并且由于分子中所有螺旋的两端均由接头连接，因此可以预期它能够稳定地结合疏水性药物。这些蛋白质的药物摄取能力和由于与膜相互作用而引起的药物释放，目前正在使用荧光等光谱方法进行研究。