タンパク質発現のための無細胞タンパク質合成系
用于蛋白质表达的无细胞蛋白质合成系统
基本信息
- 批准号:08780570
- 负责人:
- 金额:$ 0.64万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1996
- 资助国家:日本
- 起止时间:1996 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
無細胞タンパク質合成系では,生細胞を用いた発現系で問題となる生体維持機構の制約を受けにくく,しかも,系自体を人為的に改変することにより,目的タンパク質の発現に最適化したり,生細胞を用いた発現系では調製不可能なタンパク質を調製することが可能である.このような無細胞系の特色を利用した発現技術として,コドンとtRNAの対応関係を巧妙に利用することにより,タンパク質上の特定の位置に特定の(20種のアミノ酸とは限らない)アミノ酸を,特異的に導入する方法がある.ところがこの方法では,極めて少量(μgオーダー)のタンパク質しか得られず,タンパク質の機能構造研究への利用は極めて困難であった.この技術を利用して,タンパク質の特定の残基のみを安定同位体標識することができれば,これまでは解析が困難であった,分子量が数万以上のタンパク質,及びタンパク質間相互作用を,NMRを用いて迅速に解析することが可能になり,構造生物学が更に進展すると期待されるが,極めて少ない合成量が大きな問題であった.そこで,研究代表者がこれまでに開発してきた無細胞大量発現技術と,tRNAの大量調製技術を組み合わせ,更に,これまでの無細胞系に関する知見を基に各種反応条件を検討することにより,この部位特異的タンパク質安定同位標識技術を実用化することに成功した.この技術を用いて,Rasタンパク質の標的分子との相互作用を担うエフェクター領域にある32位のチロシン残基のみに,^<15>N標識が導入されたRasタンパク質を,mgオーダーで調製してNMRスペクトルを測定することに成功した.
The cell-free quality synthesis system is a problem in which the biological cell development system is subject to the restriction of the biological maintenance mechanism, and the objective is to optimize the quality of the biological cell development system. The characteristics of this cell line are utilized to develop techniques for the ingenious utilization of tRNA interactions in specific locations on the surface of the cell line (20 different acids). The method of this paper is very difficult to use. This technique is used to identify stable isotopes at specific residues of different species. It is difficult to analyze these species with molecular weights of tens of thousands or more. It is also possible to analyze them rapidly with NMR. It is expected that structural biology will make further progress. In this paper, research representatives have successfully developed cell-free mass discovery technology,tRNA mass modulation technology, and cell line-free knowledge base, discussed various reaction conditions, and implemented site-specific protein stability labeling technology. This technique was successfully applied to the determination of <15>Ras protein by NMR.
项目成果
期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Kim, D.-M.: "A Highly Efficient Cell-free Protein Synthesis System from Escherichia coli" Eur.J.Biochem.239. 881-886 (1996)
Kim, D.-M.:“一种高效的大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统”Eur.J.Biochem.239。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ patent.updateTime }}
木川 隆則其他文献
符号化標識法を用いたNMRシグナル帰属戦略
使用编码标记方法的NMR信号归因策略
- DOI:
- 发表时间:
2015 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
葛西 卓磨;永田 賢二;岡田 真人;木川 隆則;葛西 卓磨 - 通讯作者:
葛西 卓磨
アコヤガイ貝殻内タンパク質の low complexity region の構造、機能解析
珍珠贝壳低复杂度区域蛋白的结构和功能分析
- DOI:
- 发表时间:
2022 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
八木 宏昌;葛西 卓磨;Elisa Rioual;池谷 鉄兵;木川 隆則;井上詞貴;奥村久士;井上詞貴;二川 慶,森岡 太一,伊藤隆,池谷 鉄兵,降旗 一夫,渡辺 裕之,永田 宏次,鈴木 道生 - 通讯作者:
二川 慶,森岡 太一,伊藤隆,池谷 鉄兵,降旗 一夫,渡辺 裕之,永田 宏次,鈴木 道生
An in-cell NMR study of the Keap1-Nrf2 system
Keap1-Nrf2 系统的细胞内 NMR 研究
- DOI:
- 发表时间:
2022 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
八木 宏昌;葛西 卓磨;Elisa Rioual;池谷 鉄兵;木川 隆則;井上詞貴;奥村久士;井上詞貴;二川 慶,森岡 太一,伊藤隆,池谷 鉄兵,降旗 一夫,渡辺 裕之,永田 宏次,鈴木 道生;奥村久士;豊田 芽生,猪股 晃介,末広 志織,島 海翔,池谷 鉄兵,鈴木 隆史,山本 雅之,伊藤 隆 - 通讯作者:
豊田 芽生,猪股 晃介,末広 志織,島 海翔,池谷 鉄兵,鈴木 隆史,山本 雅之,伊藤 隆
無細胞タンパク質合成系を利用したHER2イメージング剤の合成と評価
使用无细胞蛋白质合成系统合成和评价 HER2 显像剂
- DOI:
- 发表时间:
2016 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
阿部 優樹;古本 祥三;岩田 錬;石川 洋一;木川 隆則;樋口 佳恵;横山 順 - 通讯作者:
横山 順
NMR解析を用いた解糖系酵素PGKによる解糖流量調節機構の解明
使用 NMR 分析阐明糖酵解酶 PGK 的糖酵解流速调节机制
- DOI:
- 发表时间:
2022 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
八木 宏昌;葛西 卓磨;Elisa Rioual;池谷 鉄兵;木川 隆則 - 通讯作者:
木川 隆則
木川 隆則的其他文献
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
{{ truncateString('木川 隆則', 18)}}的其他基金
無細胞タンパク質合成系を用いた多品種同時調製システムの開発
利用无细胞蛋白质合成系统开发多产品同时制备系统
- 批准号:
12780502 - 财政年份:2000
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
タンパク質の機能構造研究のための無細胞合成系
用于蛋白质功能结构研究的无细胞合成系统
- 批准号:
10780374 - 财政年份:1998
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
無細胞タンパク質合成系を用いた新規のタンパク質安定同位体標識法の開発と応用
利用无细胞蛋白质合成系统开发和应用新型蛋白质稳定同位素标记方法
- 批准号:
08260222 - 财政年份:1996
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
無細胞タンパク質合成系を用いた新規のタンパク質安定同位体標識法の開発と応用
利用无细胞蛋白质合成系统开发和应用新型蛋白质稳定同位素标记方法
- 批准号:
08260222 - 财政年份:1996
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
相似海外基金
小麦胚芽無細胞タンパク質合成系を活用した高等学校生物における分子生物学実験の開発
利用小麦胚芽无细胞蛋白质合成系统开展高中生物分子生物学实验
- 批准号:
23909018 - 财政年份:2011
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
無細胞タンパク質合成系を用いた新規HIV-1薬剤耐性検査法の基盤技術開発
利用无细胞蛋白质合成系统开发新型HIV-1耐药性检测方法的基础技术
- 批准号:
21659116 - 财政年份:2009
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
一細胞RT-PCRと無細胞タンパク質合成系による抗体分子スクリーニングシステムの構築
利用单细胞RT-PCR和无细胞蛋白合成系统构建抗体分子筛选系统
- 批准号:
02F02507 - 财政年份:2004
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
P型イオンポンプの無細胞タンパク質合成系を用いた発現法の開発と多量体形成機構
利用P型离子泵的无细胞蛋白质合成系统和多聚体形成机制开发表达方法
- 批准号:
16657033 - 财政年份:2004
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Exploratory Research
糖鎖付加を伴う無細胞タンパク質合成系の機能化
糖基化无细胞蛋白质合成系统的功能化
- 批准号:
14656137 - 财政年份:2002
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Exploratory Research
一細胞RT-PCRと無細胞タンパク質合成系による抗体分子スクリーニングシステムの構築
利用单细胞RT-PCR和无细胞蛋白合成系统构建抗体分子筛选系统
- 批准号:
02F00507 - 财政年份:2002
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
無細胞タンパク質合成系を用いた多品種同時調製システムの開発
利用无细胞蛋白质合成系统开发多产品同时制备系统
- 批准号:
12780502 - 财政年份:2000
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
無細胞タンパク質合成系を用いた新規のタンパク質安定同位体標識法の開発と応用
利用无细胞蛋白质合成系统开发和应用新型蛋白质稳定同位素标记方法
- 批准号:
08260222 - 财政年份:1996
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
無細胞タンパク質合成系を用いた新規のタンパク質安定同位体標識法の開発と応用
利用无细胞蛋白质合成系统开发和应用新型蛋白质稳定同位素标记方法
- 批准号:
08260222 - 财政年份:1996
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
酵母無細胞タンパク質合成系の改変によるSsaタンパク質のシャペロン機能解析
改造酵母无细胞蛋白合成系统分析Ssa蛋白的伴侣功能
- 批准号:
07780621 - 财政年份:1995
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)