αカテニンの細胞骨格との相互作用の解析

α-连环蛋白与细胞骨架相互作用的分析

• 批准号: 08780706
• 负责人: 永渕 昭良
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08780706/
• 关键词: αカテニン; ZO-1; ヴィンキュリン; 細胞接着; カドヘリン; Two hybrid法; βカテニン

本研究はαカテニンの機能領域の解析、これまで知られていないαカテニン結合因子の検索を目的としている。今年度得られた結果は以下のとおりである。1)αカテニンの機能部位カドヘリン分子の接着性にもまた細胞骨格との相互作用にも必要であるαカテニンの機能領域を解析した。方法としてはαカテニン内の様々な領域を欠損したカドヘリン・αカテニン融合タンパク質を用いた。その結果、1)分子のアミノ末端部分がβカテニンとの結合領域であること、2)前半半分がヴィンキュリンとの共局在に必要な領域であること、3)分子の中央部後ろよりがカドヘリン分子の接着性の活性化に必要であること、4)分子のカルボキシル末端領域がZO-1との共局在に必要であること、が明かとなった。2)αカテニン結合因子の検索酵母Two Hybrid法を用いαカテニン結合因子の検索を行った。αカテニン機能領域のそれぞれを用いてマウス10.5日胚由来のライブラリーをスクリーニングした。多くの陽性クローンが単離出来たが、様々な解析の後、motor proteinとして報告されている因子だけが少なくともTwo Hybrid法においてはαカテニンに結合することが確認された。このタンパクにエピトープタグをつけ細胞に発現させたところ、予想外にも細胞間接着部位ではなく、ゴルジ体と思われる領域に局在した。現在、細胞内でαカテニンとmotor proteinが結合しているかどうか検討を進めている。

The purpose of this study is to analyze the functional domain of α-temperature, and to understand the relationship between α-temperature and α-temperature. This year's results are as follows: 1) Analysis of the functional domain of α-C_2 molecules The method is to reduce the loss of the domain within the domain of the alpha domain and to reduce the quality of the domain. The results are as follows: 1) The binding domain of the terminal part of the molecule is β-C; 2) The binding domain of the first half of the molecule is necessary; 3) The binding domain of the central part of the molecule is necessary; 4) The binding domain of the terminal part of the molecule is ZO-1; 4) The binding domain of the first half of the molecule is necessary. 2) The detection of α-TC-binding factor by yeast Two Hybrid method.α-AlphaAlpha Multiple positive reactions are separated from each other, analyzed, reported, and confirmed by the Two Hybrid method. The cells appear on the surface of the cell, and the cells are connected to each other. Now, intracellular α

项目成果

K.Fujimoto,A.Nagafuchi et al.: "Dynamics of connexins,E-colherin and α-catenin on the cell membranes during the gap junction formation" J.Cell Science. 110. 311-322 (1997)

K.Fujimoto、A.Nagafuchi 等人：“间隙连接形成过程中细胞膜上的连接蛋白、E-colherin 和 α-catenin 的动态”J.Cell Science 110. 311-322 (1997)。