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上皮細胞分化における細胞接着関連蛋白質の役割。ダブルノックアウトES細胞を用いた解析

上皮細胞分化における細胞接着関連蛋白質の役割。ダブルノックアウトES細胞を用いた解析
细胞粘附相关蛋白在上皮细胞分化中的作用。
批准号：
06268211
负责人：
永渕 昭良
金额：
$1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1994 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06268211/
关键词：
細胞接着αカテニンβカテニンモエシンZO-1標的組換え上皮細胞

项目摘要

项目成果

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本研究は細胞間接着に関与する分子が細胞の増殖、分化にどのように関与しているのかを明らかにすることを目的といている、今年度の研究成果は以下の点である。1)細胞接着装置局在蛋白質の標的組換え細胞接着装置に局在するαカテニン、βカテニン、モエシン、ZO-1について、これらの分子を発現しない細胞を標的組換えの技術を用いて作成することを試みた。それぞれの染色体遺伝子を単離し常法によりターゲッティングベクターを作成した。その際蛋白質の発現が全く見れらないようにするためできるだけ開始メチオニンコドンに近い部分に変異を導入した。相沢/八木らが確立したES細胞株TT2を用いて相同組換えを行ったことろ、これまで全ての遺伝子について少なくとも一つの細胞株についてシングルノックアウトに成功した。2)ダブルノックアウト細胞単離の試みシングルノックアウトに成功した細胞株を用いて細胞レベルでのダブルノックアウトを試みた。薬剤濃度をあげる方法をそれぞれの細胞株について試みたが今のところ成功していない。現在、ダブルノックアウト細胞の単離技術に検討を加えているところである。3)今後の改善点これまでのモエシン、βカテニンのターゲッティングベクターは効率が非常に悪く、相同組換え細胞が非常に低い確率でしか単離できなかった。現在変異を導入する位置などを変更した新しいターゲッティングベクターの作成に取り掛かっている。今後シングルノックアウト細胞を複数単離すること、個体レベルや細胞レベルでダブルノックアウトの細胞を得ることを試みる。
期刊论文(6)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
A.Nagafuchi,S.Ishihara,and Sh.Tsukita: "The roles of catenins in the cadherin-mediated cell adhesion:functional analysis of E-cadherin-α catenin fusion molecules." J.Cell.Biol.127. 235-245 (1994)
A.Nagafuchi、S.Ishihara 和 Sh.Tsukita：“连环蛋白在钙粘蛋白介导的细胞粘附中的作用：E-钙粘蛋白-α 连环蛋白融合分子的功能分析。”J.Cell.Biol.127。 (1994)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
T.Oyama,Y.Kanai,A.Ochiai,S.Akimoto,T.Oda,et al.: "A truncated β-catenin disrupts the interaction between E-cadherin and α-catenin:A cause of loss of intercellular adhesiveness in human cancer cell lines." Cancer Research. 54. 6282-6287 (1994)
T. Oyama、Y. Kanai、A. Ochiai、S. Akimoto、T. Oda 等人：“截短的 β-连环蛋白会破坏 E-钙粘蛋白和 α-连环蛋白之间的相互作用：细胞间粘附性丧失的原因人类癌细胞系。”癌症研究。54. 6282-6287 (1994)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
S.Yonemura,M.Itoh,A.Nagafuchi,and S.Tsukita: "Cell-to-cell adherens junction formation and action filament organization:Similarities and differences between non-polarized fibroblasts and polarized epithelial cells." J.Cell.Sci.(in press). (1994)
S.Yonemura、M.Itoh、A.Nagafuchi 和 S.Tsukita：“细胞间粘附连接的形成和作用丝组织：非极化成纤维细胞和极化上皮细胞之间的相似性和差异。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
M.Furuse,M.Itoh,T.Hirase,A.Nagafuchi,et al.: "Direct associateion of occludin with ZO-1 and its possible involvement in the localization of occludin at tight junctions." J.Cell.Biol.127. 1617-1626 (1994)
M.Furuse、M.Itoh、T.Hirase、A.Nagafuchi 等人：“occludin 与 ZO-1 的直接关联及其可能参与 occludin 在紧密连接处的定位。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
βカテニンとPAR-3複合体の接着非依存的相互作用の解析
  • 批准号：
    20013037
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $9.22万
  • 财政年份：
    2008
  • 负责人：
    永渕 昭良
  • 依托单位：
    Kumamoto University
カドヘリン複合体とPAR-3複合体の接着非依存的相互作用の解析
  • 批准号：
    18013042
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $7.74万
  • 财政年份：
    2006
  • 负责人：
    永渕 昭良
  • 依托单位：
    Kumamoto University
細胞の接着・移動においてカドヘリン結合タンパク質p120が果たす役割の解析
  • 批准号：
    03F00147
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $0.77万
  • 财政年份：
    2003
  • 负责人：
    永渕 昭良
  • 依托单位：
    Kumamoto University
細胞の接着・移動においてカドヘリン結合タンパク質p120が果たす役割の解析
  • 批准号：
    03F03147
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $0.77万
  • 财政年份：
    2003
  • 负责人：
    永渕 昭良
  • 依托单位：
    Kumamoto University
海外基金