TGF-βシグナル伝達に関わる分子の消化器癌における異常の解析及び癌治療への応用

胃肠癌TGF-β信号相关分子异常分析及其在癌症治疗中的应用

• 批准号: 09770403
• 负责人: 西田 直生志
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770403/
• 关键词: 肝細胞癌; 癌抑制遺伝子; Smad1; Smad2; Smad4; TGF-β; p15^<INK4B>; 消化器癌; 分子生物学

1) ヒト肝細胞癌(肝癌)における第4染色体欠失の意義を検討するため、76症例の肝癌組織及びその非癌部を用い、第4染色体上のSmad1遺伝子の突然変異の有無をRT-PCR-SSCP法にて解析した。Smad1遺伝子(CDNA)のMH2ドメインに3組のPCRPrimerを設定しSSCP法を施行したが、肝癌症例でSmad1遺伝子に異常が認められた例はなかった。次にRNAの得られた36症例の肝癌において、Smad1遺伝子の発現を半定量的PCRを用いて検討した。半定量的PCRはβ-アクチンの発現をコントロールとして用い、26サイクルのPCRを行い判定した。その結果、非癌部に比し癌部で発現量の低下が認められた症例はなかった。一方これらの症例における第4染色体欠失の頻度はFGA座位で27%(PCR-RFLP法)、FABP座位で16%(PCR-RFLP法)、D4S125座位で12%(サザンブロット法)、D4S1537座位で20%であった。上記より肝癌の約2割に第4染色体欠失が認められるが、Smad1遺伝子の異常は認められなかった。2) 同様にSmad2、Smad4、TGF-βタイフIIレセプターの突然変異をRT-PCR-SSCP法にて解析したが、異常の認められた例はなかった。3) 上記の肝癌症例において、TGF-βシグナル伝達に関わる分子であるp15^<INK4B>遺伝子の異常の有無を解析した。PCRを用いて解析した結果p15^<INK4B>遺伝子の欠失が認められた例はなかった。しかしp15^<INK4B>遺伝子でプロモー夕のメチル化を、メチル化特異的PCR法にて解析した結果、44例中5例にプロモーターのメチル化が認められた。現在これらの症例において発現の低下の有無をウエスタンブロット法にて確認している。

1) ヒ ト hepatocellular carcinoma (HCC) に お け る chromosome 4 owe の meaning loss を beg す 検 る た め, 76 cases of の liver cancer tissue and び そ の を い, non cancer department on chromosome 4 の Smad1 heritage 伝 の son suddenly - have different の without を RT - PCR - SSCP method に て parsing し た. Smad1 heritage 伝 child (CDNA) の MH2 ド メ イ ン に 3 groups の PCRPrimer を set し SSCP method to execute し を た が, liver cancer cases で Smad1 heritage 伝 child abnormal に が recognize め ら れ た example は な か っ た. Time の に RNA to ら れ た 36 cases の liver に お い て, Smad1 but 伝 の 発 presently を semi-quantitative PCR を with い て beg し 検 た. The semi-quantitative PCR は beta ア ク チ ン の 発 now を コ ン ト ロ ー ル と し て い, 26 サ イ ク ル の PCR line を い determine し た. The そ <s:1> result shows that the non-cancerous part に has a lower occurrence <s:1> than the cancerous part で. Youdaoplaceholder3 cases of められた are found to be な な った った. Cases side こ れ ら の に お け る chromosome 4 owe の loss frequency は FGA seat で 27% (PCR - RFLP method), FABP seat で (PCR - RFLP method), 16% D4S125 seat で 12% (サ ザ ン ブ ロ ッ ト method), 20% D4S1537 seat で で あ っ た. The above record indicates that よ <s:1> in liver cancer, about 2 cuts of に, a deficiency of chromosome 4 が recognizes められるが, and an abnormality of the 伝 offspring of Smad1 recognizes められな められな った. 2) with others に Smad2 and Smad4, TGF - beta タ イ フ II レ セ プ タ ー の suddenly - different を RT - PCR - SSCP method に て parsing し た が, abnormal の め ら れ た example は な か っ た. 3) written の liver cancer cases に お い て, TGF - beta シ グ ナ ル 伝 da に masato わ る molecular で あ る p15 ^ < INK4B > heritage 伝 child abnormal の の presence of analytical し を た. PCRを uses を て to analyze the <s:1> た results. p15^<INK4B> remains 伝 offspring with deficient loss が. Recognize められた example った な った った. し か し p15 ^ < INK4B > posthumous son 伝 で プ ロ モ ー skarn の メ チ ル を, メ チ ル of specific PCR method に て parsing し た results, 44 cases, 5 cases に プ ロ モ ー タ ー の メ チ ル change が recognize め ら れ た. Now, there is a case of <s:1> れら <s:1>, にお て て, て, which is low. Is there a をウエスタ, <s:1>, ブロット method にて to confirm て, て, る, る, る?

项目成果

西田直生志: "肝細胞癌の遺伝子に関する検討" 難波照男記念健康づくり研究所第11回研究助成研究論文集. 11. 73-78 (1998)

西田直树：“肝细胞癌基因的研究”难波辉雄纪念健康促进研究所第11期研究资助研究论文。11. 73-78（1998）。

喜多竜一: "肝癌の分子生物学的側面" 最新医学. 52. 515-522 (1997)

Ryuichi Kita：“肝癌的分子生物学方面”现代医学 52. 515-522 (1997)。

西田直生志: "肝癌-診断と治療" 増田和也, 374 (1997)

Naoki Nishida：“肝癌 - 诊断和治疗”Kazuya Masuda，374（1997）

Naoshi Nishida: "Alteration of cell cycle-related genes in hepatocarcinogenesis" Histology and Histopathology. 12. 1019-1025 (1997)

Naoshi Nishida：“肝癌发生中细胞周期相关基因的改变”组织学和组织病理学。

西田直生志: "肝癌の遺伝子診断" 最新医学. 53. 1857-1862 (1998)

Naoki Nishida：“肝癌的基因诊断”最新医学53。1857-1862（1998）。