長期記憶に関わる転写因子CREBのリン酸化による活性制御の分子機構の解明
阐明长期记忆相关转录因子CREB磷酸化活性调节的分子机制
基本信息
- 批准号:09780556
- 负责人:
- 金额:$ 1.15万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1997
- 资助国家:日本
- 起止时间:1997 至 1998
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
NMR法により、長期記憶に関わる重要な転写因子CREBとコアクティベータCBPとの相互作用の分子機構を詳細に解析し、リン酸化による転写因子の活性調節機構を分子構造に基づいて明らかにすることを目的とした。昨年度、CBPのCREB結合ドメイン(KIX)の^<13>C、^<15>N二重標識体の各種三重共鳴三次元NMRの測定および解析を行い、立体構造を決定したが、本年度は、CREBとCBPの分子間相互作用について解析を進めた。CREB由来のリン酸化Ser含有ペプチド(KID)を^<13>C、^<15>N二重標識KIXに添加した際の化学シフト変化からKIXのKID結合残基(Lys38,His83,Leu84,Lys88,Tyr90,Lys94)を特定した。分子間NOEの解析から、これらの残基がKIDに関与していることが裏付けられた。すなわち、KIDのリン酸化Serは、KIXのLysとの静電相互作用によりKIX-KID複合体形成を安定化していることが明らかになった。Scrがリン酸化されていないと、この静電相互作用が失われるため、複合体形成は起こらない。分子内・分子間NOEの解析から、KIDはリン酸化SerのC末端側でαヘリックスを形成してKIXに結合していることが示された。このように、KIX-KID複合体は、KIXの3本鎖αヘリックスにKIDの1本鎖αヘリックス断片が結合し、4本鎖αヘリックスからなる複合体を形成することが明らかになった。
NMR method is important for long-term memory. CREB is a molecular mechanism for the interaction of CREB and CREB. Last year, CBP and CREB binding agents (KIX) and ^<13>C,^<15>N double markers of various triple resonance three-dimensional NMR determination and analysis, three-dimensional structure determination, this year, CREB and CBP molecular interaction analysis progress. CREB is derived from an acidified Ser containing a KID (KID), a <13>C, <15>N double identifier KIX, and a KID-binding residue (Lys38,His83,Leu84,Lys88,Tyr90,Lys94). Intermolecular NOE analysis, the residue of KID, and the residue of KID. The electrostatic interaction of KIX and Lys in the formation of KIX-KID complexes is a key factor in the stabilization of KIX-KID complexes. Scr acidification, electrostatic interaction, complex formation INTRAMOLECULAR AND INTERMOLECULAR NOE RESOLUTION, KID REACTIVATION AND ACIDATION OF THE C-TERMINAL SIDE OF THE SERS KIX-KID complex is formed by combining KIX with KID and KIX with KIX.
项目成果
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