カイコ前胸腺刺激ホルモンの立体構造解析と機能相関

家蚕前胸激素的结构分析及功能关系

• 批准号: 10161203
• 负责人: 永田 宏次
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10161203/
• 关键词: 前胸腺刺激ホルモン(PTTH); 脱皮; 変態; 核磁気共鳴(NMR); 立体構造

昆虫の脱皮・変態において中心的な役割を担う前胸腺刺激ホルモン(PTTH)の立体構造決定を目的として、立体構造解析の標的としての各種PTTH分子の妥当性の評価、および、^<13>C,^<15>N標識Manduca PTTHの調製と多核多次元NMRの測定と解析を行った。1. 立体構造解析の標的としての各種PTTH分子の妥当性の評価非還元条件でのSDS-PAGE分析において、Bombyx PTTHは泳動度が小さくスメアだが、Manduca PTTHは泳動度が大きくシャープなバンドを形成する(松林秀貴、私信)。このことから、Manduca PTTHはBombyx PTTHに比べて、均一性が高くコンパクトな高次構造を有することが示唆された。ゆえに標的分子としてManduca PTTHを選択した。2. ^<13>C,^<15>N標識Manduca PTTHの調製と多核多次元NMRの測定と解析^<13>C,^<15>N標識Manduca PTTHを21のM9最少培地から1.4mg得た。スピン-スピン結合した^1Hと^<15>Nの相関を検出するHSQCスペクトルを測定・解析した結果、Manduca PTTHが、β構造に富む二次構造を持つこと、および、分子内で運動性の低い領域(rigidな高次構造をとる)と高い領域(flexibleで特定の高次構造を持たない)とに分けられることが示された。この結果から、NMR法によるManduca PTTH分子の立体構造決定が成功するめどがついた。現在、^1H-^<13>C-^<15>N三重共鳴三次元NMRの測定と解析を進めている。

The three-dimensional structure of the insect's peeling and changing state is determined by the three-dimensional structure of the prothoracic gland stimulation of the central part of the body. Structural analysis of the standard としてのEvaluation of the validity of various PTTH molecules, および, ^<13>C, ^<15>N logo Manduca PTTH modulation and multi-core multi-dimensional NMR measurement and analysis. 1. Evaluation of the validity of various PTTH molecules based on three-dimensional structure analysis, SDS-PAGE analysis of non-reduction conditions, Bombyx PTTH, swimming mobility, small PTTH molecules, Manduca PTTHは Swimming degree が大きくシャープなバンドを Formation する (Matsubayashi Hideki, private message).このことから, Manduca PTTHはBombyx PTTHに比べて, Uniformity が高くコンパクトなHigh-order structure を有することが Show唆された. The target molecule of ゆえにとしてManduca PTTHを选択した. 2. ^<13>C, ^<15>N indicates the modulation and multi-core multi-dimensional NMR measurement and analysis of Manduca PTTH. ^<13>C, ^<15>N indicates that the minimum preparation of Manduca PTTH is 21 and M9 is 1.4mg.スピン-スピンcombinationした^1Hと^<15>Nのrelatedを検出するHSQCスペクトルをmeasurement・analysisした results, Manduca PTTH, β structure, rich secondary structure, strong structure, low intramolecular mobility (rigid, high order structure) The high-level field (flexible specific high-order structure) is divided into high-level areas. As a result, the NMR method was used to determine the three-dimensional structure of the PTTH molecule. Now, ^1H-^<13>C-^<15>N triple resonance three-dimensional NMR measurement and analysis is going on.