脳神経機能の微細な異常の検出を可能とする高感度ニコチンレセプターアッセイ法の開発

开发高灵敏度尼古丁受体测定方法，能够检测脑神经功能的微小异常

• 批准号: 11770502
• 负责人: 飯田 靖彦
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770502/
• 关键词: ニコチン性アセチルコリンレセプター; ラジオレセプターアッセイ; A-85380; 放射性ヨウ素標識; アルツハイマー病

これまで、ニコチン性アセチルコリンレセプター(nAChR)のα4β2サブタイプに高い親和性、選択性を有する5-iodo-3-(2-(S)-azetidinyl-methoxy)pyridine(5IA)を合成し、その[^<125>I]ヨウ素標識体を高収率、高純度で得ることに成功した。そこで、[^<125>I]5IAのin vivoでの脳内動態についてマウスを用いて検討したところ、投与一時間後で約5%dose/gと脳に高く取り込まれ、そのなかでも視床に最も高く集積し、この集積は持続した。これに対し小脳ではその取り込みは低く、洗い出しも速やかであった。さらに、ラットを用いてex vivoオートラジオグラフィにより検討を行ったところ、マウスを用いた脳内分布実験と同様の結果が得られた。[^<125>I]5IA投与5分前に、nAChRのリガンドであるcytisineを静脈投与した場合、放射能の集積が減少したことから、in vivoにおいても5IAがnAChRに結合していることが示された。また、[^<125>I]5IA投与1時間後におけるラット脳内の放射能の集積量を、[^3H]cytisineの飽和結合実験より得たラット脳局所のニコチンレセプター密度に対してプロットしたところ、脳局所への集積量とニコチンレセプター密度は高く相関しており、[^<125>I]5IAのin vivoでの放射能の集積は、ニコチンレセプター密度を反映したものであることが示された。これらの結果を基礎に、病態モデル動物として前脳基底核(NBM)傷害ラットを作製し、ex vivoオートラジオグラフィにより[^<125>I]5IAの集積を調べた結果、前脳皮質の傷害側で傷害を与えていない側と比較して有意に減少しており、nAChRのBmax値の変化と一致した。以上より、5IAが脳内nAChRの核医学イメージング剤として有効であることが示された。

これまで、ニコチン性アセチルコリンレセプター(nAChR)のα4β2サブタイプにHigh affinity and selectivity する5-iodo-3-(2-(S)-az The synthesis of etidinyl-methoxy)pyridine(5IA) and the high yield and high purity of etidinyl-methoxy[^<125>I]ethidine marker have been successful.そこで、[^<125>I]5IAのin Vivo's internal dynamics are the same as the ones in vivo, and it is about 5% after investing for a while. se/gと脳に高くGETり込まれ, そのなかでもview bed にmost も高くassemble し, このassemble はhold続した.これに対し小脳ではそのGETり込みはlowく、washい出しもspeedやかであった.さらに、ラットを用いてex Vivo Body , マウスを Use the いた脳 inner distribution 実験と Same 様の results がget られた. [^<125>I] 5IA administration 5 minutes ago, nAChR のリガンドであるcytisine を intravenous administration した occasion, radioactive energy のintegration が したことから, in vivoにおいても5IAがnAChRにcombinationしていることがshowsされた.また、[^<125>I]5IA におけるラット脳内のintegrated amount of radioactive energy を、[^3H]cytisine のsaturated combination 実験よりget たラット脳 Bureau The density of the density is the sameニコチンレセプターdensityは高くrelatedしており、[^<125>I]5IAのin vivoでのradiation energy のintegrated は, ニコチンレセプターdensity を reflects したものであることが Show された.これらのRESULTS をBasicに、Sick モデルAnimal としてPreneuron Basal Nucleus (NBM) Damage ラットを Productionし、ex vivoオートラジオグラフィにより[^<125>I]5IA's accumulation of results, damage to the anterior skin cortex Comparing the side damage with the side damage, the damage is intentionally reduced, and the nAChR Bmax value is consistent. The above results show that the nAChR in 5IA is effective in nuclear medicine.

项目成果

M.Kubota, et al.: "Mechanisms of [2,3-Butanedione Bis (N^4-Dimethylthiosemicarbazone)] zinc (Zn-ATSM_2)-Induced Protection of Cultured Hippocampal Neurons Against N-Methyl-D-Aspartate Receptor-Mediated Glutamate Cytotoxicity."Jpn.J.Pharmacol.. 84. 334-338

M.Kubota 等人：“[2,3-丁二酮双 (N^4-二甲硫缩氨基脲)] 锌 (Zn-ATSM_2) 诱导的保护培养海马神经元对抗 ​​N-甲基-D-天冬氨酸受体介导的机制

Y.Magata,et al.: "Effect of Chronic (-)-Nicotine Treatment on Rat Cerebral Benzodiazepine Receptors"Nuclear Medicine&Biology. 27. 57-60 (2000)

Y.Magata 等：“慢性 (-)-尼古丁治疗对大鼠脑苯二氮卓受体的影响”核医学