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唾液腺細胞内情報伝達系におけるプロテインホスファターゼ2Bの役割

蛋白磷酸酶2B在唾液腺细胞内信号系统中的作用

基本信息

批准号：
11771139
负责人：
江口貴文
金额：
$ 1.34万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

プロテインキナーゼとプロテインホスファターゼ(PP)による蛋白質のりん酸化の調節が細胞内情報伝達機構において極めて重要な役割を果たしていることはよく知られている。近年、サイクロスポリンやFK506がPP2Bを特異的に阻害して薬理作用を発揮することが報告され、PP2Bの生理的役割がとくにCa^<2+>/カルモジュリンとの関連で注目を集めている。唾液腺をはじめ外分泌腺における刺激分泌連関において細胞内Ca^<2+>は重要な調節因子である。しかしながら、外分泌腺におけるPP2Bの生理的役割については不明である。そこで、本研究はラット耳下腺を用いてヒスタミン(H)による分泌刺激の情報伝達機構におけるPP2Bの役割をPP2Bの阻害剤であるトルフルオロペラジン(TFP)を用いて追求し、下記の成果を得た。耳下腺切片を10μMから1.5mMまでの濃度のTFPで前処理すると1mM Hによるアミラーゼ分泌(AM)がTFPの濃度に依存して著しく増強され、1.5mMTFPで最大の増強が認められた。1mMTFPで処理すると耳下腺組織のHに対するEC_<50>値は10分の1に低下し、H_2受容体の増量とH_2作動薬に対する親和性の増強が認められた。さらにH_2受容体に共役しているGTP結合蛋白質とくに促進性GTP結合蛋白質(Gs)のHによって誘導されるコレラ毒素によるADP-リボシル化能の増加は著しく増強され、c-AMP量も著しく増量された。しかし、Gsαの増量は認められず、TFP(0.01〜1.5mM)はGsαの機能を増強することが明らかにされた。一方、抑制性GTP結合蛋白質(Gi)の百日咳毒素によるADP-リボシル化能は1mMTFPによる前処理の如何に拘わらずHによって全く影響を受けなかった。さらに2.0mM以上の濃度のTFPで耳下腺組織を前処理のPPに及ぼす影響を調べたところ、PP1及びPP2Aは5mM以下の濃度のTFPの前処理により全く影響を受けなかった。しかし、PP2Bは2mM以上の濃度のTFP前処理によるAM分泌の抑制と一致して活性が著しく低下した。以上の結果からPP2BはHなどの分泌刺激薬の分泌情報の伝達に何らかの関連があることが示唆された。

The regulation of protein acidification in the intracellular information transmission mechanism is very important. In recent years, it has been reported that PP2B has a specific protective effect on FK506 and PP2B, and the physiological effect of PP2B is related to Ca^<2+>/FK506. Salivary glands stimulate secretion and intracellular Ca^<2+> is an important regulatory factor PP2B is a physiological organ of the exocrine gland. In this study, we investigated the effects of PP2B on the secretion of stimulatory information in the auricular gland (H) and its protective mechanism (TFP). The concentration of TFP in auricular gland sections from 10μM to 1.5 mM increased with the concentration of TFP before treatment from 1mM H to 1.5 mM TFP. 1mMTFP treatment resulted in a 10-point decrease in EC_<50>value for H_2 receptor and an increase in affinity for H_2 receptor. In addition, GTP binding proteins and stimulatory GTP binding proteins (Gs) in H_2 receptor co-active medium were induced by H_2 receptor co-active medium, and the amount of ADP-AMP and c-AMP increased. TFP(0.01 ~ 1.5mM) increases Gsα function. The inhibitory GTP-binding protein (Gi) and pertussis toxin (PTX) can be expressed as ADP-binding protein. TFP concentrations above 2.0 mM were found to affect PP, PP1 and PP2A in pre-treatment of ear gland tissues. However, PP2B's inhibition of AM secretion and consistent activity were significantly lower when pretreated with TFP at concentrations above 2 mM. The above results show that PP2B has a high level of secretion stimulation and secretion information.