免疫グロブリンの体細胞突然変異誘導に関与する分子機構の解明

阐明免疫球蛋白体细胞突变诱导的分子机制

• 批准号: 11780450
• 负责人: 関亦 正幸
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11780450/
• 关键词: 免疫グロブリン; 体細胞突然変異; 転写調節因子; DNAメチル化; 転写抑制; B細胞; 抗体

免疫グロブリン遺伝子への体細胞突然変異は、転写に共役した機構で誘導されている。一方、免疫グロブリン遺伝子の転写反応は、プロモーター領域のDNAメチル化により厳密な制御を受けていることが知られている。本研究では、DNAメチル化による転写制御システムが、体細胞突然変異誘導にいかに関与しているか明らかにする。メチルDNAによる転写制御は、数種のメチルDNA結合タンパク質(MBD)により遂行されている。まず、そのうちの一種MBD2に結合する分子を酵母ツーハイブリット法により検索し、新規分子(MIZF)のクローニングに成功した。以下に、本解析により得られた結果について記述する。1、全長のcDNAクローニングから、MIZFは7つのZnフィンガーモチーフを有する新規分子であった。2、MIZFの発現ベクターを用いた解析から、MIZFは核に局在していた。3、MBD2とMIZFの結合にはMIZFのC末端の4つのZnフィンガーが重要であった。4、ルシフェラーゼ活性測定の結果、MIZFには転写抑制活性があった。5、この転写抑制活性はC末端の4つのZnフィンガーを含むMBD2結合領域に存在し、トリコスタチンA感受性であることから、MBD2が関与するヒストン脱アセチル化酵素依存性の抑制反応であることが示唆された。6、MIZFmRNAの発現をノーザンブロット法で解析したところ、脾臓で発現が認められ末梢血リンパ球では低下していた。以上の結果より、MIZFはDNAメチル化による転写制御において、MBD2依存性の転写抑制反応に関与していることが判明した。一方、MIZFは体細胞突然変異が盛んに行われている脾臓組織において発現が高いことが明らかとなった。今後は、B細胞分化誘導や体細胞突然変異誘導へのMIZFの関与を、我々が構築したJ558L細胞を用いた体細胞突然変異検出系にて詳細に解析していく方針である。

Immunity is caused by the sudden mutation of somatic cells in the body, and the induction of the body's mechanism by sharing the same function. One side, immunity グロブリン缝子の転WRITING RESISTANCE は, プロモーター domain のD NA メチル化により即米なcontrol出ukeけていることが知られている. This study is based on the research on DNA modification and control, somatic cell sudden mutation induction, and somatic cell mutation induction.メチルDNA による転绢添は、Several kinds of のメチルDNA combined with タンパク性(MBD) により行されている.まず、そのうちのA kind of MBD2 binding molecule をYeast ツーハイブリット法により検SOし, NEW Molecular (MIZF) のクローニングにSUCCESS した. The following is a description of the results of this analysis. 1. Full-length cDNA クローニングから, MIZF は7つのZnフィンガーモチーフを有するNew regulation molecule であった. 2. MIZF's の発开ベクターを用いたanalyzesから, MIZF's core bureau is in していた. 3. MBD2とMIZFのcombinationにはMIZFのCterminalの4つのZnフィンガーがimportantであった. 4. The results of the activity measurement of ルシフェラーゼ and the inhibitory activity of MIZF には転があった. 5. The C-terminal 4 of the inhibitory activity of この転 is present in the MBD2 binding domain, and the トリコスタチンA sense Resistance to the enzyme, MBD2 is related to the dependence of the enzyme on the enzyme to inhibit the reaction of the enzyme. 6. MIZFmRNA analysis methodころ, the spleen is not clear, the peripheral blood is low, and the peripheral blood is low. The above results indicate that the MIZF DNA oxidation control system and the MBD2 dependency control system have been proven to be effective. On the one hand, MIZF is caused by the sudden change of somatic cells and the appearance of spleen and stomach tissue. In the future, the relationship between B cell differentiation induction and somatic sudden change induction will be related to MIZF. We will construct the J558L cell line and use it to analyze the somatic sudden change induction system in detail and analyze the policy in detail.

项目成果

Masayuki Sekimata: "Morphological changes and detachment of adherent cells induced by p122, a GTPase-activating protein for Rho."Journal of Biological Chemistry. 274・25. 17757-17762 (1999)

Masayuki Sekimata：“p122（一种 Rho 的 GTP 酶激活蛋白）诱导的贴壁细胞的形态变化和分离。”生物化学杂志 274・25（1999）。

Satoh Koichiro: "Involvement of Erb B-2 in rheumatoid synovial cell growth"Arthritis and Rheumatism. 44・2. 260-265 (2001)

佐藤晃一郎：“Erb B-2参与类风湿性滑膜细胞生长”关节炎和风湿病44·2（2001）。

Hashimoto Ari: "Essential role of phospholipase C-γ2 in B cell development and function"Journal of Immunology. 165・4. 1738-1742 (2000)

桥本阿里：“磷脂酶 C-γ2 在 B 细胞发育和功能中的重要作用”免疫学杂志 165・4（2000）。

Masayuki Sekimata: "Morphological chages and detachment of sdherent cells induced by p122,a GTPase-activating protein for Rho."Journal og Biological Chemistry. 274・25. 17757-17762 (1999)

Masayuki Sekimata：“p122（一种 Rho 的 GTP 酶激活蛋白）诱导的粘附细胞的形态变化和分离”Journal og Biological Chemistry 274・25（1999）。