胚中心B細胞におけるBCL-3およびBCL-3結合蛋白の機能解析

生发中心B细胞中BCL-3和BCL-3结合蛋白的功能分析

• 批准号: 12770174
• 负责人: 渡辺 伸昌
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770174/
• 关键词: BCL-3; NF-κB; 転写因子; 胚中心; 遺伝子発現; 慢性リンパ球性白血病; Bリンパ球

BCL-3結合蛋白は1770アミノ酸からなる新規なものであり、N末側にWalker型NTP結合配列を有し、そのNTP結合配列を含む領域は2´-3´cyclic nucleotide phoshodiestraseと、またC末端領域はミスマッチ修復に関与するMutS2ファミリーにみられるSmrドメインと相同性があることが示された。そこで、それぞれの領域を含むリコンビナント分子を作製し、種々の酵素学的活性に関して検討を行った。その結果、NTP結合配列を含む領域はATP加水分解活性を示すと共に、5´-polynucleotide kinase活性をもつことを明かにした。またATP結合活性を欠失した変異体は、BCL-3および転写コアクティベーターp300/CBPとの相互作用か弱くなることが示された。また、Smrドメインは酵母からヒトまで保存されたドメインであり、現在ミスマッチ修復に関与する酵素活性に関して詳細に検討を行っている。以上のことよりこのBCL-3結合蛋白はDNAの修復や組換え反応に関与することが示唆された。また前年度報告したように、BCL-3結合蛋白はp300/CBPとも相互作用すること、また最近p300/CBPが塩基除去修復に必要とされる酵素と機能的相互作用することか報告されたこと等を考えあわせると、BCL-3結合蛋白は転写活性化とDNA修復や組換えとの共役反応における接点となる分子である可能性が考えられた。また、胚中心B細胞の性質をもつヒト培養細胞株であるRamos細胞およびCL-01細胞を用い、BCL-3およびBCL-3結合蛋白が抗体のクラススイッチ組み換えや体細胞超変異等、転写と共役した遺伝子組み換え反応に関与するかどうか検討を行っている。ノックアウトマウス作製に関して、BCL-3結合蛋白遺伝子の破壊ES細胞が得られており、解析の準備を進めている。

The BCL - 3 binding protein は 1770 ア ミ ノ acid か ら な る new rules な も の で あ り, at the end of the N side に Walker type (NTP) combined with column を し, そ の NTP combined with column を containing は む field 2 3 ´ ´ - cyclic nucleotide Phoshodiestrase と, ま た C terminal areas は ミ ス マ ッ チ repair に masato and す る MutS2 フ ァ ミ リ ー に み ら れ る Smr ド メ イ ン と identity が あ る こ と が shown さ れ た. そ こ で, そ れ ぞ れ の field contains を む リ コ ン ビ ナ ン ト molecular を し, categories of 々 の the activity of enzymes learn に masato し て 検 line for を っ た. そ の results, combining with column (NTP) を containing は ATP hydrolysis activity を む field in す と に, total 5 ´ - polynucleotide kinase activity を も つ こ と を Ming か に し た. Lost ま た ATP binding activity を owe し た - variant は, BCL - 3 お よ び planning write コ ア ク テ ィ ベ ー タ ー p300 / CBP と の weak interaction か く な る こ と が shown さ れ た. ま た, Smr ド メ イ ン は yeast か ら ヒ ト ま で save さ れ た ド メ イ ン で あ り, now ミ ス マ ッ チ repair に masato and す る enzyme activity に masato し て detailed に 検 line for を っ て い る. The above <s:1> とよ とよ, <s:1> BCL-3 binding protein された, DNA <e:1> repair や assembly え anti-応 に relationship and する とが とが とが suggest された. Annual report before ま た し た よ う に, BCL - 3 binding protein は p300 / CBP と も interaction す る こ と, ま た recently p300 / CBP が salt base to remove repair に necessary と さ れ る interaction function of enzyme と す る こ と か report さ れ た こ と を tests such as え あ わ せ る と, BCL - 3 binding protein は planning write activeness と DNA repair The possibility of や group substitution of えと <s:1> co-active anti応 における contact となる molecules である が examination えられた. ま た, germinal center B cell の nature を も つ ヒ ト culture cell lines で あ る Ramos cells お よ び CL - 01 cells を い, BCL - 3 お よ び BCL - 3 binding protein antibody の が ク ラ ス ス イ ッ み チ group in え や somatic super - vision, planning, such as write と total service し た heritage 伝 subgroups み in え anti 応 に masato and す る か ど う か 検 line for を っ て い る . ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス cropping に masato し て, BCL - 3 binding protein but 伝 の broken 壊 が ES cells have ら れ て お り, parse の prepare を into め て い る.