発生工学的手法を用いたアロマターゼの機能と発現調節に関する研究

利用发育工程方法研究芳香酶的功能和表达调控

• 批准号: 12770623
• 负责人: 本田 伸一郎
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770623/
• 关键词: エストロゲン; トランスジェニックマウス; ステロイドホルモン

周生期に精巣から分泌されるアンドロゲンは未発達な神経回路に形成的な作用を及ぼし、脳を雄型へと構築する。アンドロゲンは脳内でエストロゲンに変換されて機能すると考えられており、それを触媒するアロマターゼの発現は、脳の性分化と深く関わっていると考えられる。申請者は、中枢神経で発現するアロマターゼ遺伝子の転写制御機構について個体レベルで検討し、脳の部位特異的な発現に必要な遺伝子領域を同定する目的で実験を行った。アロマターゼ遺伝子の脳特異的プロモーター領域に1acZ構造遺伝子を連結したトランスジーンを用いてトランスジェニック(Tg)マウスを作製し、βガラクトシダーゼ活性を指標として、脳における発現を観察した。今回の一連の研究において、エクソン1fの上流6.5kbのプロモーター領域を持ったTgマウス(f6lacZTg)の成獣では、視床下部腹内側核や扁桃体、視索前野などに発現が認められる事を示した。また、f6lacZTgマウスでは胎生期においても同様に、視床下部腹内側核や扁桃体、視索前野などに発現が認められ、その発現は出生前後に高くなることを示した。以上のようにf6lacZTgマウスにおけるlacZの発現は、脳における内在性アロマターゼの発現部位と発現パターンが良く一致しており、エクソン1fの上流6.5kbのプロモーター領域には、脳アロマターゼの部位特異的、および時期特異的発現を行うために必要なエレメントが含まれていることが示唆された。さらに、f61acZTgマウスとアロマターゼ遺伝子破壊(ArKO)マウスを交配させることにより、ArKO : f6lacZTgマウスを作出し、βガラクトシダーゼ活性を調べた。ArKO : f6l1acZTgマウスでは、Wild : f6lacZTgマウスと比べて、脳内のβガラクトシダーゼ陽性細胞の増加が認められ、エストロゲンは脳内アロマターゼの発現それ自身には、抑制的に作用するものと考えられた。

During the reproductive cycle, sperm secretion occurs in the brain, which is responsible for the formation of the nervous system, and for the formation of male and female structures. The first step is to change the color of the film. The applicant shall carry out the purpose of identifying the necessary sub-fields for the development of central nervous system and writing control mechanism, including individual examination and site-specific development. The activity of the protein is determined by the activity index of the protein, the activity index of the protein, and the activity index of the protein. In this paper, the development of the 6.5kb upper part of the optic field, the ventral medial nucleus of the inferior optic bed, the tonsils and the anterior field of the optic cord were studied. F6lacZTg is the same as the fetal period, the ventral medial nucleus of the inferior optic bed, the tonsil, and the anterior field of the optic cord. The occurrence of lacZ in the above mentioned f6lacZTg is consistent with the occurrence of intrinsic loss in the upper 6.5kb of the lacZ domain, and the occurrence of site-specific and time-specific loss in the lacZ domain is necessary. F61acZTg ArKO : f6l1acZTg, Wild : f6lacZTg,

项目成果

Honda S. et al.: "Disruption of Sexual Behavior in Male Aromatase-Deficient Mice"Molecular Steroidogenesis, ed.Okamoto M.et al.Universal Academy Press. No.29. 151-152 (2000)

Honda S.等人：“雄性芳香酶缺陷小鼠性行为的中断”Molecular Steroidogenesis，Okamoto M.等人编辑，Universal Academy Press。

Harada N. et al.: "Analysis of Transcriptional Regulation of Human Breast Aromatase by in vitro and in vivo Studies"J.Steroid Biochem.Mol.Biol.. 79. 151-156 (2001)

Harada N.等人：“通过体外和体内研究分析人乳腺芳香酶的转录调节”J.Steroid Biochem.Mol.Biol..79.151-156(2001)

Honda S. et al.: "Characterization and Purification of a Binding Protein to the cis-acting Element for the Brain-specific Exon 1 of the Mouse Aromatase Gene"J.Steroid Biochem.Mol.Biol.. 79. 255-260 (2001)

Honda S. 等人：“小鼠芳香酶基因脑特异性外显子 1 的顺式作用元件结合蛋白的表征和纯化”J.Steroid Biochem.Mol.Biol.. 79. 255-260 (

Azcoitia I. et al.: "Brain Aromatase Is Neuroprotective"J.Neurobiology. 47. 318-329 (2001)

Azcoitia I. 等人：“脑芳香酶具有神经保护作用”J.Neurobiology。

本田 et al.: "雌型性行動中枢制御の性分化におけるアロマターゼの役割"ホルモンと臨床. 49. 156-160 (2001)

Honda 等人：“芳香酶在女性性行为中枢控制的性别分化中的作用”《激素与临床》49. 156-160 (2001)。