课题基金 / 基金详情

葉緑体in vitro RNAエディティング・翻訳共役系の確立

葉緑体in vitro RNAエディティング・翻訳共役系の確立
叶绿体体外RNA编辑/翻译耦合系统的建立
批准号：
13874111
负责人：
杉浦 昌弘
金额：
$1.54万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2001
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2001 至 2003
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13874111/
关键词：
葉緑体in vitro系RNAエディティング翻訳タバコエンドウmRNAin vitro 系RNA エディティング

项目摘要

项目成果

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高等植物の葉緑体の転写産物では、CからUへのRNAエディティングにより一部の配列が変化する。その中で、ACGがAUGに変化して翻訳開始コドンを生じる。このエディティングから翻訳開始までの分子機構を解析する手法としてRNAエディティングと翻訳を連動して行うin vitro系の開発のため以下の研究を行った。1.In vitro系の改良昨年度は葉緑体in vitroRNAエディティング系の大幅な改良を行ったが、この系はP32標識mRNA基質を用いる。この基質調製が煩雑なため、より簡単な非アイソトープ法の開発を行った。蛍光標識ダイデオキシヌクレオチドとプライマー伸長法を組み合わせ効率よくアッセイできる手法が出来上がった。一方の、in vitro翻訳系の方も非アイソトープ化を進め、蛍光タンパク質mRNAを目的の葉緑体mRNAの後方に結合させ、翻訳産物を蛍光強度でアッセイする手法も完成した。上記の両in vitro系を一緒にして、RNAエディティングと翻訳の共役系の確立をめざしたが、両系の調製液の組成と反応組成が異なるため、充分活性のある共役系がまだ得られていない。2.In vitro系に適した植物種の探索一貫して最も解析の進んでいるタバコを使用してきたが、エンドウ葉緑体よりin vitroRNAエディティング系の開発をしたが、RNアーゼ活性が高いため、in vitro翻訳系の開発には適していないことが明らかになった。そこでキュウリ葉緑体についてin vitro系開発の適合性の調査を行ったが、充分な結果を出すまでには得られなかった。
期刊论文(40)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Yukawa, Y.: "A tobacco nuclear extract supporting transcription,processing,splicing and modification from plant intron-containing tRNA precursors"Plant Journal. 28. 583-594 (2001)
Yukawa, Y.：“一种支持植物内含子 tRNA 前体转录、加工、剪接和修饰的烟草核提取物”《植物杂志》。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Hasegawa, K.: "A tRNA^<Lew>-like sequence located immediately upstream of an Arabidopsis clock-regulated gene is transcriptionally active"Gene. 307. 133-139 (2003)
Hasekawa, K.：“位于拟南芥时钟调节基因上游的 tRNA^<Lew> 样序列具有转录活性”基因。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Mathieu, O.: "5S rRNA genes expression is not inhibited by DNA methylation in Arabidopsis"Plant Journal. 29. 313-323 (2002)
Mathieu, O.：“拟南芥中 5S rRNA 基因的表达不受 DNA 甲基化的抑制”《植物杂志》。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Sugiura, M.: "History of chloroplast genomics"Photosynthesis Research. 76. 371-377 (2003)
Sugiura, M.：“叶绿体基因组学的历史”光合作用研究。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 20 条
    葉緑体から核への遺伝子移行を説明する翻訳不適合説の実験的検証
    • 批准号：
      19657072
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $1.86万
    • 财政年份：
      2007
    • 负责人：
      杉浦 昌弘
    • 依托单位：
      Nagoya City University
    RNAエディティングによるゲノム情報の変換システム - 葉緑体ゲノムでの網羅的解析
    • 批准号：
      16011251
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $4.16万
    • 财政年份：
      2004
    • 负责人：
      杉浦 昌弘
    • 依托单位：
      Nagoya City University
    植物in vitro RNAスプライシング系の開発
    • 批准号：
      16657017
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $1.79万
    • 财政年份：
      2004
    • 负责人：
      杉浦 昌弘
    • 依托单位：
      Nagoya City University
    RNAエディティングによるゲノム情報の変換システム-葉緑体ゲノムでの解析-
    • 批准号：
      15011101
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $3.84万
    • 财政年份：
      2003
    • 负责人：
      杉浦 昌弘
    • 依托单位：
      Nagoya City University
    海外基金