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植物RNAポリメラーゼIII依存in vitro転写系の確立

植物RNAポリメラーゼIII依存in vitro転写系の確立
植物RNA聚合酶III依赖性体外转录系统的建立
批准号：
10874122
负责人：
杉浦 昌弘
金额：
$1.28万
依托单位：
Nagoya City University (2000)Nagoya University (1998-1999)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1998
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1998 至 2000
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10874122/
关键词：
RNAポリメラーゼIIItRNAタバコin vitrotRNA遺伝子スプライシングイントロンスプライシング部位植物in vitro転写系TATA配列プロセシングin vitro系高等植物U3 SnRNA遺伝子U6 snRNA遺伝子転写

项目摘要

项目成果

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RNAポリメラーゼIII(Pol-III)は、5S rRNA、tRNAや一群のsnRNAを合成する重要な転写装置である。しかし、植物におけるPol-IIIの転写機構の研究は皆無と言ってよい。そこで、タバコBY-2培養細胞の核より再現性のよい高活性のPol-III依存in vitro転写系を確立した。本年度は、このPol-III依存in vitro転写系に、イントロンを持つ遺伝子からのtRNA前駆体のスプライシング活性も有することを明らかにしたので、反応系の改良を進め、活性の高い系の確立に成功した。転写とスプライシングはマグネシウム濃度を変化させることにより人為的にコントロールすることを見出したので、各々を個別にあるいは連動した系として反応の解析が可能となった。低濃度のマグネシウム(1mM)ではtRNA前駆体のみが蓄積されるので、これにより正確な転写開始と停止部位を決定できることになった。またスプライシング部位もプライマー伸長法を用いることにより正確に同定できることを示した。
期刊论文(10)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Sugiura,M.: "Phytogene sequence : From cyanobacteia to plastids. In "From Symbiosis to Eukaryotism-Endocytobiology VII""Univ Geneva Press. 16 (2000)
Sugiura,M.：“植物基因序列：从蓝藻到质体。在“从共生到真核-内细胞生物学 VII””，日内瓦大学出版社。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Miyagi,T.,S.Kapoor,M.Sugita and M.Sugiura: "Transcript analysis of tobacco plastid rps2/atnI/H/F/A operon reveals the existen-ce of a non-consensus type(NCII)promoter upstream to atpI coding sequence." Mol.Gen.Genet.257. 299-307 (1998)
Miyagi,T.,S.Kapoor,M.Sugita 和 M.Sugiura：“烟草质体 rps2/atnI/H/F/A 操纵子的转录分析揭示了非共有型 (NCII) 启动子上游的存在
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Sugiura, M., T. Hirose and M. Sugita: "Evolution and mechanism of translation in chloroplasts"Annu. Rev. Genetics. 32. 437-459 (1998)
Sugiura, M.、T. Hirose 和 M. Sugita：“叶绿体的进化和翻译机制”Annu。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Akama,K.: "Splicing of Arabidopsis tRNA^<Met> precursors in tobacco cell and wheat germ extracts."Plant Molecular Biology. 44. 155-165 (2000)
Akama,K.：“拟南芥 tRNA^<Met> 前体在烟草细胞和小麦胚芽提取物中的剪接。”植物分子生物学。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 10 条
    葉緑体から核への遺伝子移行を説明する翻訳不適合説の実験的検証
    • 批准号：
      19657072
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $1.86万
    • 财政年份：
      2007
    • 负责人：
      杉浦 昌弘
    • 依托单位：
      Nagoya City University
    植物in vitro RNAスプライシング系の開発
    • 批准号：
      16657017
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $1.79万
    • 财政年份：
      2004
    • 负责人：
      杉浦 昌弘
    • 依托单位：
      Nagoya City University
    RNAエディティングによるゲノム情報の変換システム - 葉緑体ゲノムでの網羅的解析
    • 批准号：
      16011251
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $4.16万
    • 财政年份：
      2004
    • 负责人：
      杉浦 昌弘
    • 依托单位：
      Nagoya City University
    RNAエディティングによるゲノム情報の変換システム-葉緑体ゲノムでの解析-
    • 批准号：
      15011101
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $3.84万
    • 财政年份：
      2003
    • 负责人：
      杉浦 昌弘
    • 依托单位：
      Nagoya City University
    国内基金
    海外基金
    热带病原菌钩端螺旋体的tRNA修饰定位与生理生化功能分析
    • 批准号：
    • 项目类别：
      省市级项目
    • 资助金额：
      --
    • 批准年份：
      2026
    • 负责人：
      林桓
    • 依托单位：
      海南大学
    POLR3G通过重塑tRNA图谱上调增殖因子LMNB1的蛋白表达促进前列腺癌进展的机制研究
    • 批准号：
      2026JJ50071
    • 项目类别：
      省市级项目
    • 资助金额：
      --
    • 批准年份：
      2026
    • 负责人：
      邹成
    • 依托单位：
      湖南大学
    天冬氨酸/天冬氨酰tRNA合成酶-1轴通过调控钙稳态促进结直肠癌进展的作用与机制研究
    • 批准号：
      2026JJ30151
    • 项目类别：
      省市级项目
    • 资助金额：
      --
    • 批准年份：
      2026
    • 负责人：
      刘先领
    • 依托单位：
      中南大学湘雅二医院
    利用阻抑tRNA系统靶向RPGR基因治疗视网膜色素变性的作用及机制研究