プラスチドの光合成関連遺伝子mRNAの新たな翻訳制御機構(RNAプロセシングの影響と翻訳産物によるフィードバック制御機構)

质体中光合作用相关基因mRNA的新翻译控制机制（RNA加工的影响和翻译产物的反馈控制机制）

• 批准号: 12025101
• 负责人: 杉浦 昌弘
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12025101/
• 关键词: タバコ; 葉緑体; mRNA; 翻訳; RNA結合性タンパク質; RNAエディティング; シス配列; in vitro系

1.タバコ葉緑体の12種のmRNAにつき、BY-2と緑葉からのin vitro翻訳系で翻訳効率を測定した。双方でよく翻訳するaptB mRNAを基準(100%)として比較する方法をとった。結果は、5種のmRNAは両者とも同程度、5種は葉緑体で、2種はBY-2で活性が高かった。後者の2種のmRNAの5'UTRにつき高次構造を予測して活性化領域を推定した。2.タバコ葉緑体に多量に存在するRNA結合性タンパク質は5種を同定し、このうちcp31がpsbL mRNAのエディティングに必須であることを示した。cp31は244アミノ酸よりなり、N末端より64アミノ酸は酸性ドメイン、83アミノ酸のRNA結合ドメインI、11アミノ酸のスペーサー、83アミノ酸のRNA結合ドメインII、3アミノ酸のC末端よりなる。他の4種のRNA結合性タンパク質との大きな違いは、酸性ドメインが最も長いことである。そこで、この領域を除いたタンパク質を作製して、RNAエディティングはこの酸性ドメインを介して発現することを示した。3.タバコ葉緑体のpsbL mRNAにつき、in vitro解析を行ったところ、RNAエディティングと翻訳開始のシス配列が完全に一致することを実験的に示した。

1. By-2, 12 kinds of mRNA in chloroplasts were detected. The aptB mRNA of both sides was compared to the baseline (100%). The results showed that 5 kinds of mRNA had the same activity, 5 kinds of chloroplasts had high activity, 2 kinds of BY-2 had high activity. The 5'UTR of the latter two mRNAs was predicted and the active domain was estimated. 2. There are five kinds of RNA binding genes in the chloroplast. cp31:244-acid, N-terminal, 64-acid, 83-acid RNA binding, I: 11-acid, II: 83-acid RNA binding, C: 3-acid. There are four kinds of RNA binding genes, one of which is the most acidic. In addition to the above, the content of RNA can also be detected. 3. The expression of psbL mRNA in chloroplasts was completely consistent with that in vitro analysis.

项目成果

Sugiura,M.: "Nucleic Acids. In "Biochemistry & Molecular Biology of Plants""American Society of Plant Physiologists. 50 (2000)

Sugiura,M.：“核酸。在“生物化学”中

Sugiura,M.: "Phytogene sequence : From cyanobacteia to plastids. In "From Symbiosis to Eukaryotism-Endocytobiology VII""Univ Geneva Press. 16 (2000)

Sugiura,M.：“植物基因序列：从蓝藻到质体。在“从共生到真核-内细胞生物学 VII””，日内瓦大学出版社。

Sugita,C.: "A novel nucleic acid-binding protein in the cyanobacterium Synechococcus sp. PCC6301."Mol.Gen.Genet.. 263. 655-663 (2000)

Sugita,C.：“蓝细菌聚球藻 PCC6301 中的一种新型核酸结合蛋白。”Mol.Gen.Genet.. 263. 655-663 (2000)

Nakamura T.: "Chloroplast ribonucleoproteins function as a stabilizing factor of ribosomefree mRNAs in the stroma."J.Biol.Chem.. 276. 147-152 (2001)

Nakamura T.：“叶绿体核糖核蛋白作为基质中无核糖体 mRNA 的稳定因子发挥作用。”J.Biol.Chem.. 276. 147-152 (2001)

Yukawa,Y.: "The TATA motif, the CAA motif and the Poly(T) transcription termination motif are all important for transcription re-initiation on plant tRNA genes."Plant Journal. 22. 439-447 (2000)

Yukawa,Y.：“TATA 基序、CAA 基序和 Poly(T) 转录终止基序对于植物 tRNA 基因的转录重新启动都很重要。”《植物杂志》。