遺伝子治療のための染色体複製起点由来のエピゾームベクターの開発に関する研究

用于基因治疗的染色体复制起点附加型载体的开发研究

基本信息

项目摘要

遺伝子治療において、遺伝子導入に用いるベクターとしては、主に、ウィルスに由来したベクターが用いられているが、一長一短があり、種々の改良がなされている。一方、ウィルスに由来しない毒性の低い、自律複製能を有するエピソームベクターは、動物細胞ではまだ開発されていない。我々は、真核細胞の複製開始機構に基づいて、複製開始複合体を特定の配列にtargetすることにより、より効率良く複製複合体の構築をおこない、強い自律複製能を有するエピゾームベクターの開発を計画した。この目的のために、本年度は、分裂酵母ORCのDNA結合ドメインであるORC4のDNA結合ドメインをヒトORC4のN端に融合した分裂酵母-ヒトキメラORC4(Sp-huORC4)を作製し、動物細胞内で発現した。さらにこのplasmid上に、分裂酵母ORC4の標的配列であるAT-rich複製起点配列を導入した。このplasmidを現在動物細胞に導入し、一過性に自律的に複製できるかどうかを検討した。現在、さらに効率よく複製し、安定に維持されるベクターの開発をすすめている。
The gene therapy, gene introduction, use, main, origin, use, length, length, improvement, etc. A prescription, its origin, low toxicity, self-replication ability, animal cells, and development. The replication initiation mechanism of eukaryotes is based on the replication initiation complex. The replication initiation complex is targeted for specific alignment. The replication initiation complex is constructed with high efficiency. The replication initiation complex is capable of self-regulation. This year, the DNA binding of ORC 4 in yeast was detected in animal cells by DNA binding of ORC 4 to the N-terminal fusion of ORC 4. In addition, the target alignment of ORC4 in plasmid and split yeast was introduced into AT-rich replication origin alignment. This plasmid is now introduced into animal cells and transiently self-regulated. Now, the rate of replication, stability and maintenance of the development process

项目成果

期刊论文数量(9)
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专利数量(0)
Sato, N., Sato, M., Nakayama, M., Saitoh, R., Arai, K., Masai, H.: "Cell cycle regulation of chromatin binding and nuclear localization of Cdc7-ASK kinase complex"Genes to Cells. 8. 451-463 (2003)
Sato, N.、Sato, M.、Nakayama, M.、Saitoh, R.、Arai, K.、Masai, H.:“染色质结合的细胞周期调节和 Cdc7-ASK 激酶复合物的核定位”基因到细胞
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Functional interaction between tumor suppressor menin and activator of S-phase kinase
  • DOI:
    10.1158/0008-5472.can-04-0724
  • 发表时间:
    2004-09-15
  • 期刊:
  • 影响因子:
    11.2
  • 作者:
    Schnepp, RW;Hou, ZY;Hua, XX
  • 通讯作者:
    Hua, XX
正井久雄: "DNAとそれを認識する蛋白質の多様性と普遍性 蛋白質 核酸 酵素 特集 DNA二重らせん構造の半世紀(1)"共立出版. 589-591 (2003)
Hisao Masai:“DNA 和识别它的蛋白质的多样性和普遍性:蛋白质、核酸、酶专题:DNA 双螺旋结构的半个世纪 (1)”Kyoritsu Shuppan 589-591 (2003)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Cell cycle and developmental regulations of replication factors in mouse embryonic stem cells
  • DOI:
    10.1074/jbc.m412224200
  • 发表时间:
    2005-04-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    4.8
  • 作者:
    Fujii-Yamamoto, H;Kim, JM;Masai, H
  • 通讯作者:
    Masai, H
A second human Dbf4/ASK-related protein, Drf1/ASKL1 is required for efficient completion of S and M phases.
第二种人类 Dbf4/ASK 相关蛋白 Drf1/ASKL1 是有效完成 S 期和 M 期所必需的。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2005
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Yoshizawa;N.;Ishii;A.;Taniyama;C.;Matsui;E.;Arai;K.;Masai;H.
  • 通讯作者:
    H.
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正井 久雄其他文献

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  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 期刊:
  • 影响因子:
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  • 作者:
    田中 卓;正井 久雄
  • 通讯作者:
    正井 久雄
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
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  • 作者:
    You Zhiying;正井 久雄
  • 通讯作者:
    正井 久雄
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芽殖酵母中前 CMG 复合物的体外重建
  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
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  • 作者:
    正井 久雄;松本 清治;平井和之;S. Ohtsuki;正井 久雄;Yan Li
  • 通讯作者:
    Yan Li
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CDK依赖性复制蛋白组装启动染色体DNA复制
  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
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  • 作者:
    田中 卓;正井 久雄;Hiroyuki Araki
  • 通讯作者:
    Hiroyuki Araki
ヒトRiflC末領域はその核膜局在と複製タイミング制御に必要とされる
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2020
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    伊藤 さゆり;井口 智弘;覺正 直子;大字 亜沙美;平谷 伊智朗;正井 久雄
  • 通讯作者:
    正井 久雄

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一本鎖DNAヘアピン構造を認識する複製タンパク質の構造と機能
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知道了