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細胞内分子架橋法を利用した新たな機能的遺伝子クローニング法の開発

細胞内分子架橋法を利用した新たな機能的遺伝子クローニング法の開発
利用细胞内分子交联方法开发新的功能基因克隆方法
批准号：
15659066
负责人：
荒瀬 尚
金额：
$2.11万
依托单位：
Osaka University (2004)Chiba University (2003)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2003 至 2004
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659066/
关键词：
遺伝子スクリーニングレトロウィルスライブラリーcDNAライブラリーシグナル遺伝子B細胞CD8分子機能的遺伝子検索レトロウィルスリンパ球細胞内分子架橋リン酸化シグナル伝達エストロジェンレセプタータモキシフェン

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本研究では、細胞内分子架橋を用いることによる新たなシグナル伝達分子検索法の開発を試みた。本研究では、細胞外CD8分子や変異型エストロジェンレセプターやFK結合タンパクとのキメラ分子が産生されるような新たなレトロウイルスcDNAライブラリー用ベクターを開発し、ライブラリーから産生されたキメラ分子が、架橋刺激によって正常に活性化されるかを検討し、本法が可能かどうかを明らかにする。本方法では、キメラ分子のライブラリーの作製が必要なため、cDNAライブラリーのサイズや質が非常に重要な要因となる。そこで、まず、CD8分子とのキメラライブラリーに対してcDNAのサイズを最適化したライブラリーの作製を行なった。その結果、新たなB細胞活性化分子として、NFAM1をクローニングした。NFAM1のトランスフェクタントやトランスジェニックマウスを用いることにより、NFAM1はB細胞の活性化や分化に重要な機能を担っている分子であることが明らかになったと同時に、本法が、シグナル伝達分子の解明に非常に有用な方法であることが判明した(Ohtsuka et al.Proc.Natl.Acad.Sci USA 2004)。さらに、最適化したcDNAライブラリーを用いて、シグナル伝達分子の検索を行なったところ、4回膜貫通型の新規分子をクローニングし、B細胞の生存に関与していると思われた(Suenaga et al.投稿中)。以上のように、CD8キメラライブラリーを用いた細胞内架橋によるシグナル伝達分子は、ポストゲノムの時代において、重要な機能的遺伝子検索方法であることが明らかになった。
期刊论文(22)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Involvement of FeRγ in signal transduction of osteoclast-associated receptor (OSCAR).
FeRγ 参与破骨细胞相关受体 (OSCAR) 的信号转导。
DOI： --
发表时间： 2004
期刊： Int Immunol. 16巻7号
影响因子： --
作者： [Ishikawa S, Arase N, Suenaga T, Saita Y, Noda M, Kuniyama T, Arase H, Saito T]
通讯作者： Saito T
Arase, N.: "IgE-mediated activation of NK cells through Fc γ RIII."J.Immunol.. 170・6. 3054-3058 (2003)
Arase, N.：“IgE 通过 Fc γ RIII 介导的 NK 细胞激活。”J.Immunol.. 170・6 (2003)。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Missing self-recognition of Ocil/Clr-b by inhibitory NKR-P1 natural killer cell receptors
抑制性 NKR-P1 自然杀伤细胞受体对 Ocil/Clr-b 的自我识别缺失
DOI： --
发表时间： 2004
期刊： Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 101
影响因子： --
作者： [Carlyle, J.R.]
通讯作者： J.R.
FcεRIγ-ITAM is differentially required for mast cell function in vivo.
FcεRIγ-ITAM 对体内肥大细胞功能的需求存在差异。
DOI： --
发表时间： 2004
期刊： J Immunol 172巻4号
影响因子： --
作者： [Sakurai D, Yamasaki S, Arase K, Park SY, Arase H, Konno A, Saito T.]
通讯作者： Saito T.
共 10 条
    Understanding the pathogenesis of infectious and immune diseases through integrated understanding of host-pathogen interactions
    • 批准号：
      22H04989
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (S)
    • 资助金额：
      $123.39万
    • 财政年份：
      2022
    • 负责人：
      荒瀬 尚
    • 依托单位：
      Osaka University
    ペア型免疫受容体を介した宿主病原体相互作用の解明
    • 批准号：
      18H04029
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
    • 资助金额：
      $28.37万
    • 财政年份：
      2018
    • 负责人：
      荒瀬 尚
    • 依托单位：
      Osaka University
    Studies on the regulation of infection and immunity via paired receptors
    • 批准号：
      18H05279
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (S)
    • 资助金额：
      $123.8万
    • 财政年份：
      2018
    • 负责人：
      荒瀬 尚
    • 依托单位：
      Osaka University
    ミスフォールド蛋白質／ＭＨＣクラスＩＩ分子複合体に対する自己抗体の産生機構の解明
    • 批准号：
      15F15115
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for JSPS Fellows
    • 资助金额：
      $1.54万
    • 财政年份：
      2015
    • 负责人：
      荒瀬 尚
    • 依托单位：
      Osaka University