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B型肝炎ウイルスが発現するアンチセンスRNAおよびそのプロモーターの機能解析

乙型肝炎病毒及其启动子表达的反义RNA的功能分析

基本信息

批准号：
15659112
负责人：
森山耕成
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Fukuoka Dental College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659112/
关键词：
B型肝炎ウイルスアンチセンスRNA RNAポリメラーゼ-III Dicer ORF6

项目摘要

B型肝炎患者の非癌部肝組織においてpreC-Cプロモーターから転写されるアンチセンスRNA (C-asRNA)を見い出した.5'RACEによる解析では,大部分はポジション1655から転写が開始され,約700bp下流のTTTT配列で終結していた.転写開始点の22bp上流に点突然変異をもりウイルスでは,その開始点が上流に移動していた.よって,C-asRNAはRNAポリメラーゼIIIにより転写されていることが示唆された.スプライシングを受けた分子は存在せず,量はセンスRNAの0.05-0.4%であった.C-asRNAにあるORF6は開始コドンを欠くものがあったので,ORF6蛋白はウイルス増殖に必須ではないと考えられる(J.Gen.Virol.84:1907-1913,2003).幾種類かのNorthen blotを試みたが,dicer消化によって生じうるHBV-RNAの21nt断片は検出できなかった.潜伏感染状態で多くのC-asRNAが発現するのかどうか検討したが,HBs抗体陽性の既感染者には検出できなかった.一方,持続感染(慢性肝炎)ではC mRNAの少ない者ほどC-asRNAが多い傾向が認められた(投稿中).ポジション2505付近でpolyA付加される第2のアンチセンスRNAを見いだした.その開始点は,ポジション2700前後であった.すなわち,preSプロモーターからの0.7-kbにおよぶ長いアンチセンスRNAではなかった.preSプロモーターから転写される第3のアンチセンスRNAを見い出し,PreS領域のlucアッセイで弱いアンチセンス転写活性を確認した.しかし,転写は下流の至るところで中断していたので,core mRNAなどのセンス方向の転写により阻害されていること,および,RNAポリメラーゼIIによって転写されていることが示唆された(投稿中).

Non-cancerous liver tissue of patients with hepatitis B (C-asRNA) を见い出した.5'RACE によるanalytic では,most はポジション1655から転写が开され, about 700bp obscene TTTT arrangement でEnd していた. The starting point of 転WRITING is the 22bp upstream point. The sudden change of the 22bp starting point is the upstream point. The starting point is upstream.动していた.よって,C-asRNAはRNAポリメラーゼIIIにより転WRITEされていることがshows された. スプライシングをReceives けたmolecule は exists せず, measures はセンスRNAの0.05-0.4%であった.C-asRNAにあるORF6はStartコドンをowedくものがあったので,ORF6 protein はウイルス嗗综合に必ではないと考えられる(J.Gen.Virol.84:1907-1913,2003).Several kinds of かのNorthen blot test, dicer digestion, raw HBV-RNA 21nt fragment, HBV-RNA, 21nt fragment, latent infection status, latent infection status, C -AsRNA is present, the patient who is infected with HBs antibody positive is infected with HBs antibody, and he is infected with chronic hepatitis (chronic hepatitis). mRNAの小ない者ほどC-asRNAが多い tendenciesがcognizeめられた(submission under submission).ポジション2505 Pay close to polyA pay plus される 2ndのアンチセンスRNAを见いだした.そのstarting pointは,ポジション27 00后であった.すなわち,preSプロモーターからの0.7- kbにおよぶ长いアンチセンスRNAではなかった.preSプロP reS field's active writing activity is confirmed . RN AポリメラーゼIIによって転WRITE されていることが世憆された(submission in progress).