甲状腺ホルモン受容体の遺伝子工学的制御による心不全治療の試み

尝试通过基因工程控制甲状腺激素受体来治疗心力衰竭

• 批准号: 15659184
• 负责人: 児玉 逸雄
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659184/
• 关键词: 心不全; 甲状腺ホルモン受容体; 遺伝子治療; アデノウイルス

アミオダロンは抗不整脈作用に加え、心不全患者の血行動態を改善する作用もあることが示されている。本研究課題においては、アミオダロンの薬理作用を明らかにするとともに、そのメカニズムを応用した新しい治療法の可能性について探究した。ラットにアミオダロンを長期投与(1ヵ月)し、ノザンブロット解析(ミオシン重鎖-αおよびβ)およびDNAマイクロアレイ解析法を用いて、心筋における甲状腺ホルモン応答遺伝子の発現パターンを調べたところ、甲状腺機能低下症ラットと同様のパターンを示した。また、甲状腺ホルモン受容体(TR)変異体(TRVP16:constitutively active TR)を、アデノウイルスを用いてラット培養心室筋細胞に過剰発現させ、アミオダロンおよびその活性代謝産物(DEA)のT3拮抗作用が、TRを介するT3の転写調節(すなわちT_3のgenomic action)によるものかどうかを調べた。TRVP16過剰発現細胞群では、T3-free状態で培養しても、活動電位幅の著明な短縮が見られたが、このTRVP16の活動電位短縮作用はDEAにより抑制されなかった。以上の結果より、アミオダロン長期投与による活動電位持続時間延長作用は、心筋に対するT_3の遺伝子転写調節を介する作用(genomic action)を抑制することによりもたらされると考えられた。(2004年3月、日本循環器学会学術集会で発表)。このことは、心筋選択的に甲状腺機能低下状態をもたらすことができれば、アミオダロンと類似の効果を得る可能性を示している。これらの知見をもとに、ドミナントネガティブ甲状腺ホルモン受容体(TRG345R)を、アデノウイルスを用いて心筋選択的に過剰発現させ、心筋の甲状腺ホルモン作用を抑制したラットのin vivo実験モデルを作成し、その心臓機能を調べる実験が現在進行中である。

アミオダロンは has an anti-pulse-regulating effect and has a positive effect on improving blood circulation dynamics in patients with cardiac insufficiency. The subject of this research is においては, アミオダロンの薬性を明らかにするとともに、そのメカニズムを応与 した新しいThe possibility of treatment method についてExplore した.ラットにアミオダロンをLong-term investment (1 month)し、ノザンブロット solution Analytical method of DNA analysisを用いて、心丝におけるthyroid ホルモン応respond 伝子の発现パターンをTune the べたところ, hypothyroidism ラットと同様のパターンをshow した. Thyroid receptor (TR) variant (TRVP16: constitutively active TR) を、アデノウイルスをUsing いてラット to culture ventricular muscle cells, the activity of させ、アミオダロンおよびそのMetabolite (DEA) のT3 antagonism が, TR を mediated す る T3 の転 regulation (す な わ ち T_3 のgenomic action)によるものかどうかを动べた. TRVP16 has been shown to be present in cell populations, cultured in a T3-free state, and activity potential amplitude has been demonstrated. The activity potential shortening effect of TRVP16 and the activity potential shortening function of TRVP16 are suppressed by DEA. The above results show that long-term administration of AMINANO has the effect of prolonging the maintenance time of active potential, and the effect of the heart muscle's T_3's regulation and regulation (genomic action)をすることによりもたらされると卡えられた. (March 2004, Japanese Circulator Society Academic Meeting Table).このことは, Shinsujo's にhypothyroid state をもたらすことができれば、アミオダロンと Similar effects are possible and the possibility is shown.これらの知见をもとに、ドミナントネガティブthyroid ホルモン receptor (TRG345R)を、アデノウイルスを Use いて心suji to select the に 剰発appears させ, the thyroid thyroid function of the heart muscle したラットのin vivo実験モデルを成し、その心臓functionalityを Adjustmentべる実験が is currently in progress.

项目成果

Honjo H, Boyett MR, Niwa R, Inada S, Yamamoto M, Mitsui K, Horiuchi T, Shibata N, Kamiya K, Kodama I.: "Pacing-induced spontaneous activity in myocardial sleeves of pulmonary veins after treatment with ryanodine."Circulation. 107(14). 1934-1943 (2003)

Honjo H、Boyett MR、Niwa R、Inada S、Yamamoto M、Mitsui K、Horiuchi T、Shibata N、Kamiya K、Kodama I.：“用兰尼定治疗后，起搏引起的肺静脉心肌袖自发活动。”循环

Takeshita K, Fujimori T, Kurotani Y, Honjo H, Tsujikawa H, Yasui K, Lee JK, Kamiya K, Kitaichi K, Yamamoto K, Ito M, Kondo T, Iino S, Inden Y, Hirai M, Murohara T, Kodama I, Nabeshima Y.: "Sinoatrial node dysfunction and early unexpected death of mice wit

竹下 K、藤森 T、黑谷 Y、本庄 H、辻川 H、安井 K、李 JK、神谷 K、北一 K、山本 K、伊藤 M、近藤 T、伊野 S、Inden Y、平井 M、室原 T、儿玉 I

Shi R, Lee I, Nagaya T, Miwa K, Murata Y, Seo H, Kodama I.: "Long-term cardiac effects of desethylamiodarone (DEA) are mediated by an inhibition of T3 action on the nuclear thyroid hormone receptor"Circulation Journal. 68(Suppl.I)(Abstract). 172 (2004)

Shi R、Lee I、Nagaya T、Miwa K、Murata Y、Seo H、Kodama I.：“去乙基胺碘酮 (DEA) 的长期心脏作用是通过抑制 T3 对核甲状腺激素受体的作用介导的”循环杂志

Shi R, Lee J, Takeuchi Y, Zhang L, Miwa K, Kambe F, Murata Y, Kodama I.: "Long-term effects of amiodarone and its non-iodinated analogue, dronedarone, on the transcription of cardiac sarcoplasmic reticulum Ca^<2+> -ATPase gene."Environmental Medicine. 47.

Shi R、Lee J、Takeuchi Y、Zhang L、Miwa K、Kambe F、Murata Y、Kodama I.：“胺碘酮及其非碘类似物决奈达隆对心脏肌浆网 Ca^ 转录的长期影响

Zhang L, Lee J, John SA, Uozumi N, Kodama I.: "Mechanosensitivity of GIRK Channels Is Mediated By PKC-dependent Channel-PIP_2 Interaction."Journal of Biological Chemistry. 279(8). 7037-7047 (2004)

张 L、Lee J、John SA、Uozumi N、Kodama I.：“GIRK 通道的机械敏感性由 PKC 依赖性通道-PIP_2 相互作用介导。”生物化学杂志。