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単一遺伝子病に対する新しい遺伝子診断法の開発と応用

单基因疾病遗传诊断新方法的开发与应用

基本信息

批准号：
15659241
负责人：
松原洋一
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659241/
关键词：
遺伝子診断遺伝子変異遺伝子多型免疫クロマトグラフィー ELISA

项目摘要

本研究の目的は、臨床の場で簡便・迅速に遺伝子変異が検出できる遺伝子診断法を開発し、その臨床応用を検討することである。本研究では、研究者が考案した新しい手法(CASSOH法)に改良を加えその臨床応用をおこなった。疾患や薬理遺伝学的遺伝子多型によっては、複数の遺伝子変異や多型が関与していることも少なくなく、このような場合、遺伝子診断法のマルチプレックス化が望ましい。そこで私たちは、CASSOH法の最終検出ステップに、試験紙ではなくイムノアフィニティーとELISA法を組み合わせた新しい手法を開発した。ここでは、PCR反応液をチップ上のメンブレンに吸着させ、試薬を順次加えることによって青の発色で多型の有無を検出する。チップには特別の工夫が加えられており、添加された液はすべてメンブレン下部のパッドに吸収されるため、通常のELISAのように廃液を処理する必要がない。また、多数のチップをケースに収納することによってマルチウェルプレートのフォーマットで用いることも可能である。この方法(CASSOH-ELISA法)は、比較的高いスループットを持ちながら、特別の機器を用いることなく肉眼で遺伝子型を判定できるというこれまでにない特徴を有しており、今後多くの遺伝子診断に応用可能と考えられる。

The purpose of this study is to develop a simple and rapid method for detecting genetic diversity in clinical settings and to investigate its clinical application. In this study, the researchers examined the new method (CASSOH method) and improved it for clinical use. The genetic polymorphism of disease and pathology is related to the genetic polymorphism of multiple genes. The final detection of CASSOH was carried out by ELISA method. The PCR reaction solution was added sequentially to the reaction mixture, and the presence or absence of the polytype was detected. Special time is required to add the solution to the lower part of the ELISA and to process the usual ELISA solution. The number of people who are interested in this topic is probably the most important. This method (CASSOH-ELISA method) is used to determine the characteristics of different types of DNA by naked eye, and to examine the possible use of different DNA diagnosis methods in future.