核内におけるM-RasによるRNA編集の制御機構の解明

阐明细胞核内M-Ras对RNA编辑的控制机制

基本信息

  • 批准号:
    17657041
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.86万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2005
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2005 至 2006
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

RNA特異的アデノシンデアミナーゼ(ADAR)は特定の蛋白質のpre-mRNAにおいてA-I変換を引き起こすことにより,RNA編集を行う酵素である.しかしこれまでADAR活性の制御機構はまったく不明であった.私たちはADAR1が低分子量G蛋白質M-Rasの特異的標的蛋白質であることを見出した.そこで本研究では,M-RasがADARのRNA編集活性をどのように制御しているか,そしてM-RasがADARの機能をどのようなシグナル伝達経路で制御しているかを明らかにすることを目的とした.M-Rasは活性状態の時にのみADAR1に結合することが,酵母two-hybridアッセイとpull-downアッセイで示された.また活性状態にかかわらずADAR2に結合した.一方,他のRasはADARには結合しなかったことから,ADARの制御はM-Rasに特異的な機能であると考えられる.ADAR1(p150)は細胞質に局在していたのに対し,ADAR1(p110)とADAR2は核小体に局在していた.NIH3T3細胞にトランスフェクトしたADAR2はグルタミン酸受容体GluR2のQ/R部位のRNA編集を行った.この細胞にさらに野生型,恒常的活性変異体,ドミナントネガティブ変異体M-Rasを発現させたが,いずれの場合にもRNA編集は影響を受けなかった.またNIH3T3細胞にトランスフェクトしたADAR1(p110)はセロトニン受容体5-HT2cRのA, B, C, DサイトのRNA編集を行った.この細胞にさらに野生型,恒常的活性変異体,ドミナントネガティブ変異体M-Rasを発現させたが,いずれの場合にもRNA編集は影響を受けなかった.またこれらのM-Rasの発現はADARI(p110)の核小体への局在化に影響しなかった.以上の結果から,M-RasはADAR2によるGluR2のQ/R部位のRNA編集やADAR1(p110)による5-HT2cRのA, B, C, DサイトのRNA編集にはかかわっていないようである.しかしインターフェロン誘導性のADAR1(p150)によるウイルスRNA編集を制御している可能性が考えられる.
RNA specific ア デ ノ シ ン デ ア ミ ナ ー ゼ (ADAR) は specific の protein の pre - mRNA に お い て A - I - in を lead き こ す こ と に よ り, compiling を line う RNA enzymes で あ る. し か し こ れ ま で ADAR active の system royal institution は ま っ た く unknown で あ っ た. Private た ち は ADAR1 が low molecular weight M - G protein Ras の specific target protein で あ る こ と を shows し た. そ こ で this study で は, M - Ras が ADAR の compiling active RNA を ど の よ う に suppression し て い る か, そ し て M - Ras が ADAR の function を ど の よ う な シ グ ナ ル 伝 da 経 road で suppression し て い る か を Ming ら か に す る こ と を purpose と し た. M - Ras は active when の に の み ADAR1 に combining す る こ と が, yeast two hybrid - ア ッ セ イ と pull - down ア ッ セ イ で shown さ れ た. ま た active に か か わ ら ず ADAR2 に combining し た. One side, he の Ras は ADAR に は combining し な か っ た こ と か ら, ADAR の suppression は M - Ras に specific な function で あ る と exam え ら れ る. ADAR1 (p150) は cytoplasm に bureau in し て い た の に し, seaborne ADAR1 (p110) と ADAR2 は nucleosome に bureau in し て い た. NIH3T3 Cell に ト ラ ン ス フ ェ ク ト し た ADAR2 は グ ル タ ミ ン acid by let body GluR2 の Q/R parts line compiling を の RNA っ た. こ の cells に さ ら に wild-type, constant activity - variants, ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ ィ ブ variations with the M - Ras を 発 now さ せ た が, い ず れ の occasions に も compiling は RNA を by け な か っ た. ま た NIH3T3 cells に ト ラ ン ス フ ェ ク ト し た ADAR1 (p110) は セ ロ ト ニ ン by 5 - let body HT2cR の. A, B, C, D サ イ ト の line compiling を RNA っ た. こ の cells に さ ら に wild-type, constant activity - variants, ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ ィ ブ 1 - M - Ras を 発 now さ せ た が, い ず れ の occasions に も compiling は RNA を by け な か っ た. ま た こ れ ら の M - Ras の 発 now は ADARI (p110) の nucleosome へ の bureau in The に affects the な な った った. Results above の か ら, M - Ras は ADAR2 に よ る GluR2 の Q/R parts compiling や の RNA ADAR1 (p110) に よ る 5 - HT2cR の. A, B, C, D サ イ ト の compiling に RNA は か か わ っ て い な い よ う で あ る. し か し イ ン タ ー フ ェ ロ ン induced の ADAR1 (p150) に よ る ウ イ ル ス compiling を RNA suppression し て い る possibility が exam え ら れ る.

项目成果

期刊论文数量(7)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
M-Rasによる骨形成方法
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
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  • 作者:
  • 通讯作者:
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Sustained activation of M-Ras induced by nerve growth factor is essential for neuronal differentiation of PC12 cells
  • DOI:
    10.1111/j.1365-2443.2006.01002.x
  • 发表时间:
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  • 期刊:
  • 影响因子:
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  • 作者:
    Sun, Peng;Watanabe, Haruko;Endo, Takeshi
  • 通讯作者:
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形と運動を司る細胞のダイナミクス(実験医学増刊)
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2006
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
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  • 通讯作者:
    竹縄 忠臣
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  • DOI:
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  • 发表时间:
    2007-05
  • 期刊:
  • 影响因子:
    2.7
  • 作者:
    T. Endo
  • 通讯作者:
    T. Endo
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知道了