Msxlによる骨格筋の脱分化と幹細胞化の分子機構の解明

Msxl阐明骨骼肌去分化和干细胞化的分子机制

• 批准号: 17045007
• 负责人: 遠藤 剛
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17045007/
• 关键词: 骨格筋細胞; 脱分化; 多能性; 間葉系幹細胞; Msxl; SV40 largeT抗原; M-Ras; 骨芽細胞分化; 幹細胞化; 骨格筋; 分化転換; Msx1; 衛生細胞; Sca-1; NF-κB

私たちは,成体マウスの骨格筋にホメオボックス遺伝子Msxlを形質導入すると,筋線維に脱分化がもたらされ多数の単核細胞が生ずることを明らかにしている.単離した脱分化細胞は幹細胞マーカーのSca-1やCD34を発現しており,脂肪細胞や骨芽細胞に分化転換した.そこで本研究では,Msxlがどのような機構で脱分化と多能性の間葉系幹細胞状態を誘導するかを明らかにすることを目的とした.マウス骨格筋細胞C2C12の最終分化筋管細胞にMsxlを発現させると,核にBrdUの取り込みがみられ,S期に進行していることが示された.したがってMsxlを発現させた筋管細胞は細胞周期を回ることにより脱分化をすると考えられる.またTet-Offの系でMsxlを発現できるC2C12筋芽細胞株を樹立した.Msxlを発現させた後にその発現を遮断した細胞では,分化の多能性を獲得しており,脂肪細胞や骨芽細胞に容易に分化した.さらにRel(NF-kBの一つ)を発現させた細胞では,Relが核内に存在する場合にのみMsxlの発現が誘導された.したがってMsxlはRelの下流で発現が誘導されることが示された.SV40 large T抗原の発現誘導により脱分化が誘導できる骨格筋細胞株C2SVTts11(C2SVT)において,large Tを発現させた筋芽細胞や筋管細胞では,複数の幹細胞マーカーおよびES細胞マーカーの発現量が増大していた.これらのうち少なくともCD34とNanogについては,発現量の増大は転写活性化を介してもたらされた.またlarge Tを発現させた後にその発現を遮断した細胞では,脂肪細胞や骨芽細胞への分化がみられた.以上のことから,large Tによる脱分化細胞も,Msxlによる脱分化細胞と同様に多能性の間葉系幹細胞状態になっており,分化の多能性を獲得していると考えられる.C2C12筋芽細胞や10T1/2細胞にM-Rasを過剰発現させると,骨芽細胞分化が誘導・促進され,Sca-1とCD34の発現が顕著に誘導された.またM-RasのRNAiにより,骨芽細胞分化が阻害された.したがってMsxlはM-Rasを介してSca-1やCD34を発現し,間葉系幹細胞状態を誘導する可能性が考えられる.さらにこれらの間葉系幹細胞はM-Rasの恒常的活性化により骨芽細胞に分化すると考えられる.

In this case, the Msxl of the adult, the bone, the bone, the bone and the bone. Isolated and dedifferentiated cells, isolated cells, SCA-1 cells, CD34 cells, fat cells, bone buds, bone buds, fat cells, bone buds According to the results of this study, the Msxl equipment organization is responsible for the dedifferentiation of the pluripotent system, the cellular configuration of the system, and the objective. The C2C12 cells of the bone lattices were most easily differentiated, and the cells of the Msxl cells were divided into two groups. The nuclear BrdU was used to obtain the bone marrow cells, and the S phase was performed to show that the cells were broken. This is the result of Msxl. The cell cycle, cell cycle, dedifferentiation, cell cycle, cell cycle, cell cycle, The cell lines of Tet-Off, Msxl, and C2C12 sprouts were isolated. MSXL showed that the cells were blocked, the pluripotent cells were differentiated, and the adipose cells were easily differentiated. The Rel (NF-kB signal) shows that there is a gap in the nucleus of the Rel, and that there is a complex in the nucleus of the Msxl. The SV40 large T antigen showed the dedifferentiation of the bone lattice cell line C2SVTts11 (C2SVT), the cell line C2SVTts11 (C2SVT), the large T cell, the sprout cell, the tube cell, the complex cell, the cell. Please tell me that you have a problem with CD34, that is, you have to use a lot of money, you have a lot of information, you have a lot of activity, and you have a problem. The large T shows that the cells are blocked, and the fat cells are differentiated into bone buds. The above genes, large T cells, dedifferentiation cells, Msxl cells, pluripotent cells, C2C12 cells, 10T1/2 cells, M-Ras cells, bone bud differentiation, bone bud differentiation. The differentiation of bone buds hinders the development of bone buds by M-Ras RNAi cells. We need to Msxl the M-Ras to make sure that the Sca-1 CD34 is available, and that the cellular status of the system will determine the possibility of change. There is a constant activation of M-Ras cells in the differentiation of bone buds.

项目成果

DA-Raf1, a competent intrinsic dominant-negative antagonist of Ras-ERK pathway, is required for myogenic differentiation

DA-Raf1 是 Ras-ERK 通路的一种有效的内在显性失活拮抗剂，是肌原性分化所必需的

• 发表时间: 2007
• 期刊: J. Cell Biol. 177(印刷中)
• 作者: Yokoyama;T.
• 通讯作者: T.

M-Rasによる骨形成方法

使用M-Ras的骨形成方法

• 发表时间: 2007

Sustained activation of M-Ras induced by nerve growth factor is essential for neuronal differentiation of PC12 cells

• DOI: 10.1111/j.1365-2443.2006.01002.x
• 发表时间: 2006-09-01
• 期刊: GENES TO CELLS
• 影响因子: 2.1
• 作者: Sun, Peng;Watanabe, Haruko;Endo, Takeshi
• 通讯作者: Endo, Takeshi

形と運動を司る細胞のダイナミクス(実験医学増刊)

细胞控制形状和运动的动力学（实验医学特别版）

• 发表时间: 2006
• 作者: Ishizaki K;Yamada A;Yoh K;Nakano T;Shimohata H;Maeda A;Fujioka Y;Morito N;Kawachi Y;Shibuya K;Otsuka F;Shibuya A;Takahashi S;竹縄 忠臣
• 通讯作者: 竹縄 忠臣

Stem cells and plasticity of skeletal muscle cell differentiation: potential application to cell therapy for degenerative muscular diseases.

• DOI: 10.2217/17460751.2.3.243
• 发表时间: 2007-05
• 期刊: Regenerative medicine
• 影响因子: 2.7
• 作者: T. Endo