卵巣、子宮および胎盤でのオーファンレセプターLGR5の発現とその機能の検討

卵巢、子宫、胎盘中孤儿受体LGR5的表达及其功能检测

• 批准号: 17659517
• 负责人: 森田 宏紀
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659517/
• 关键词: LGR5; オーファンレセプター; 胎盤; Real-time RT-PCR; 生殖内分泌

FSHレセプター、LHレセプター、TSHレセプターと構造が似たオーファンレセプターであるLGR5は生殖内分泌の分野で重要な役割を担っていることが考えられている。我々は生殖内分泌の分野で、まず胎盤に着目し胎盤におけるLGR5の発現の有無および各trimesterにおけるmRNA発現量を定量することから胎盤におけるLGR5の働きを解明する糸口としたいと考えた。インフォームドコンセントを得た妊婦から分娩時、および帝王切開時に胎盤を採取し、採取した胎盤を1st,2nd,3rdの各trimesterに分類した。胎盤をそれぞれホモジナイザーで細胞粉砕した後、RNAを抽出しreal time RT-PCR法を用いて各trimesterにおけるmRNAの発現を検討した。同時に測定したLGR5のプラスミドでのmRNA発現量と対比しmRNA発現を定量化した。その結果各trimesterの胎盤についてオーファンレセプターLGR5の発現を認め1stおよび2nd trimesterに比し3rd trimesterでのmRNA発現の増加傾向を認めた。さらに各期の胎盤におけるLGR5mRNA発現の局在を明らかにするために、胎盤のパラフィン包埋切片を作製しin situ hybridization法にて現在検討中である。またインフォームドコンセントを得た正常子宮組織および子宮筋腫、子宮腺筋症、子宮癌患者検体よりRNAを抽出し胎盤と同様にRT-PCR法により各組織のcDNAを作製した。その結果子宮の各組織についてオーファンレセプターLGR5の発現を認めた。各組織のLGR5mRNAの発現量の比較については現在検体数を増やして検討を加えている。さらに胎盤と同様にin situ hybridization法によるmRNA発現の局在の検討の準備中である。

The important division of reproductive endocrine system of FSH, LH, TSH, and so on, is similar to that of reproductive endocrinology. In our department, the reproductive endocrine system was divided, and the fetal LGR5 was detected. We found that there was a quantitative analysis of each trimester, mRNA, and quantitative analysis of the fetus. The LGR5 was detected. During the delivery of the pregnancy and the opening of the emperors, the fetus was harvested, and the trimester was collected for the 3rd day of the pregnancy. After the pregnancy of the fetus, the RNA extracted the real time RT-PCR method and used the trimester method to detect the infection of the cell powder. At the same time, it is necessary to determine the quantity of LGR5 and the quantity of mRNA compared to the quantity of mRNA. The results showed that all trimester fetuses showed that the 2nd trimester of the 1st was higher than that of the mRNA of the 3rd trimester. In each stage of the fetus, the in situ hybridization method is used to make sure that the LGR5mRNA is now in progress. The fetal RNA was extracted from the normal tissue of normal tissue, the adenomyosis of the child, and the cancer of the child. The same RT-PCR method was used to detect the cDNA of each tissue. The results show that each organization