ヒト化学物質受容体を発現するレポーター酵母ライブラリーの樹立と環境スクリーニング

表达人类化学受体的报告酵母文库的建立及环境筛选

• 批准号: 18651028
• 负责人: 八木 孝司
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Osaka Prefecture University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18651028/
• 关键词: 核内受容体; 酵母; 環境化学物質; 人体影響; オーファンレセプター

ヒトには核内受容体が現在約50種類の核内受容体が知られており、我々は、遺伝子組換え技術によってヒト細胞の核内受容体応答系を酵母に構築することを経て、リガンド物質が作用すれば溶液が発色する簡便迅速なバイオアッセイ系を樹立する。そのため、種々の核内受容体、核運搬タンパク遺伝子、各々の受容体応答配列を持つレポータープラスミドを酵母に導入し、各種受容体に対する被験物質の結合能を培養液の発色によって測定するバイオアッセイ系を樹立してきた。平成20年度は樹立したアッセイ酵母に、さらに核内受容体のコアクチベーターであるSRC-1を導入し、検出感度を上げた。これまでにAhR、RXR(retinoid X receptor)α・β、ER(Estrogen Receptor)α・β、TR(thyroid hormone receptor)α・β、AR(androgen receptor)、GR(glucocorticoid hormone receptor)、VDR(vitamine D receptor)、PXR(Pregnane X receptor)、FXR(Farnesoid X receptor)などがほぼ樹立できた。既知リガンド物質を用いて、これらの酵母とヒト細胞の応答性を比較検証した結果、応答性が両者で一致するリガンドとそうでないリガンドがあることがわかった。奈良盆地から大阪湾へ注ぐ大和川の各地の河川水の主な核内受容体リガンド活性を比較した結果、天然のERリガンドと思われる物質が竜田川から大和川へ流入していることがわかった。またある地点より下流で未知のTRリガンド物質が検出され、現在その物質を同定中である。

Now there are about 50 kinds of nuclear capacitors in the nucleus. In many cases, the receptor in the nucleus is known to be sensitive, sensitive All kinds of capacitors, nuclear capacitors, nuclear transfer devices, and all kinds of capacitors should be equipped with the equipment to inject the yeast into the plant, and all kinds of capacitors should be combined with the liquid chromatography to determine the stability of the system. In Pingcheng, in the year 20, the contents of yeast and intranuclear receptacles were increased, and the sensitivity of SRC-1 was increased. AhR, RXR (retinoid X receptor) α β, ER (Estrogen Receptor) α β, TR (thyroid hormone receptor) α β, AR (androgen receptor), GR (glucocorticoid hormone receptor), VDR (vitamine D receptor), PXR (Pregnane X receptor), FXR (Farnesoid X receptor). It is known that the results of the test results and the results of the response tests of yeast cells are consistent with each other. In Nara basin, the activity of the receptor in the main core of the river water in Daiwa, Nara basin, is much higher than that in the main core of the river water. The results show that the activity of the receptor in the main core of the river water in Nara basin is higher than that in the main core of the river water, and the activity of the receptor in the main core of the river water in the Nara basin is much higher than that in the main core of the river water in the Nara basin. the activity of the acceptor in the main core of the river water in Nara basin is much higher than that in the main core of the river water, and the activity of the receptor in the main core of the river water in Nara basin is higher than that in the main core of the river water. The location is unknown, the TR is unknown, the property is out of the box, and now the property is in the same category.

项目成果

形質転換酵母、それを用いた分析方法および分析キット

转化酵母、使用其的分析方法以及分析试剂盒

• 发表时间: 2013

Establishment of Reporter Assay Yeasts Expressing Human Estrogen Receptors α and β with a Coactivator SRC-1 applicable for detection of estrogenic activity of environmental samples.

建立表达人类雌激素受体 α 和 β 的报告检测酵母，并带有辅激活剂 SRC-1，适用于检测环境样品的雌激素活性。

• 发表时间: 2009
• 期刊: Environmental Toxicology (印刷中)
• 作者: Wai-Ling Chu;Kazuhiro Shiizaki;Masanobu Kawanishi;Takashi Yagi.
• 通讯作者: Takashi Yagi.

形質転換酵母、それを用いた動物核内受容体リガンドの分析方法および分析キット

转化酵母、使用其分析动物核受体配体的方法和试剂盒

• 发表时间: 2008

Establishment of Reporter Yeasts for Guinea Pig and Syrian Hamster Aryl Hydrocarbon Receptor Ligand Activity

• DOI: 10.3123/jemsge.28.167
• 发表时间: 2006-11
• 期刊: Genes and Environment
• 影响因子: 1.7
• 作者: M. Kawanishi;Michiyo Sakamoto;Chiaki Shimohara;T. Yagi

Construction of a Reporter Yeast Strain to Detect Estrogen Receptor Signaling through Aryl Hydrocarbon Receptor Activation

构建报告酵母菌株，通过芳基烃受体激活检测雌激素受体信号传导

• 发表时间: 2008
• 期刊: Environmental Science and Technology 42
• 作者: Kawanishi;M.;Kondo;M.;Shiizaki;K.;Chu;W. L.;Terasoma;Y.;Yagi;T.
• 通讯作者: T.