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siRNA含有ナノスフェアーによる網膜血管内皮細胞の遺伝子発現制御

含siRNA纳米球对视网膜血管内皮细胞基因表达的调控

基本信息

批准号：
17659551
负责人：
小椋祐一郎
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659551/
关键词：
網膜血管内皮 ICAM-1 siRNA lipofectamine

项目摘要

本研究では、正常ヒト臍帯静脈血管内皮細胞を高濃度のグルコースにより刺激してICAM-1の発現を増強させ、その細胞内にICAM-1を標的とするsiRNAを導入し、ICAM-1の発現が抑制されるかどうかを検討した。【方法】正常ヒト臍帯静脈血管内皮を24well plateにまき、24時間後、IL-1β及び、グルコース(15,30 45mM)を作用させた。また、lipofectamineとICAM-1標的siRNAの複合体を作製し、作用させた。6時間後培養i液を交換し、48時間後、細胞を洗浄し、ELISAでICAM-1のたんぱく質量を定量した。【結果】ICAM-1の発現量はIL-1βで刺激したものを100%とすると、15mMグルコースで刺激したものは33%、30mMグルコースで刺激したものは47%、45mMグルコースで刺激したものは65%でグルコースの濃度依存性に発現の増強が認められた。また、siRNAを導入した正常ヒト臍帯静脈血管内皮細胞では、ICAM-1の発現量は、IL-1βで刺激したものは約70%、45mMグルコースで刺激したものは約47%と有意に抑制された。【結論】以上の実験結果により、siRNAは正常ヒト臍帯静脈血管内皮細胞において、高濃度のグルコースにより発現が増強したICAM-1の発現制御が可能であり、糖尿病網膜症に対する新しい治療法として今後期待できると考えられた。

This study では, normal ヒト umbilical 帯 venous endothelial cells を high-concentration のグルコースにより stimulus して ICAM - 1 の発を now raised strong させ, その intracellular にを ICAM - 1 mark とする siRNA を import し, ICAM - 1 の発 now が inhibit されるかどうかを beg し検た. 【 method 】 normal ヒト umbilical 帯 vein endothelial を 24 well plate にまき, 24, IL - 1 beta and び, after time グルコース (15, 30 to 45 mm) を role させた. Youdaoplaceholder0, lipofectamineと, and the siRNA <s:1> complex of ICAM-1 target を act as また and させた. After 6 hours, the culture i solution was を exchanged. After 48 hours, the cells were を washed clean and then ELISAでICAM-1 <s:1> たんぱく mass を quantification たた. 【 results 】 ICAM - 1 の発 now quantity は IL - 1 beta で stimulus したものを 100% とすると, 15 mm グルコースで stimulus したものは 33%, 30 mm グルコースで stimulus したものは 47%, 45 mm グルコースで stimulus したものは 65% でグルコースの concentration dependence に発 is の raised strong がめ Youdaoplaceholder0. また, siRNA を import した normal ヒト umbilical 帯 venous endothelial cells では, ICAM - 1 のは発 now quantity, IL - 1 beta で stimulus したものは about 70%, 45 mm グルコースで stimulus したものは about 47% と intentionally に inhibit された. 【 conclusion 】 the above の be 験 results により, siRNA は normal ヒト umbilical 帯 venous endothelial cells において, high concentration のグルコースにより発が now raised strong した ICAM - 1 の発 now suppression が may でありに diabetic retinopathy, す seaborne る new しい therapy として in future expect できると exam えられた.