生体膜コレステロール組成を感知する蛍光プローブの開発

开发感应生物膜中胆固醇成分的荧光探针

• 批准号: 18651102
• 负责人: 竹内 利行
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18651102/
• 关键词: コレステロール; ピレン; ダンシル; 発光プローブ; エキシマー効果; ペリレン; 蛍光プローブ; アクリジンオレンジ; DAMP; ピレン基; ダンシル基; 内分泌顆粒

本研究では,細胞内のコレステロール動態を追跡する蛍光プローブを開発し,コレステロールの機能を可視化して評価する目的で以下の課題を設定した。課題1)生体膜トラップ型プローブの開発課題2)酸性環境でエキシマー効果を出す生体膜通過型プローブの開発課題3)生体膜でリン脂質とコレステロールの会合と解離を測定するプローブの開発コレステロール本来の性質を保持したプローブとして,dansyl基の付加位置が異なる3種類のdansyl-cholesterolと,ケイ素導入,非導入2種類のpyrene-cholesterolを作成した(特願2007-075414)。Dansyl-cholesterolは親水-疎水環境に応じて蛍光スペクトルが変化し,膜コレステロール含量が少ないと長波長(緑)に,多いと短波長(青)にシフトするので蛍光発色から膜コレステロール含量を推測できることを確認した(特願2007-110515)。更にdansyl-cholesterol(20)は活性化マクロファージで生ずる脂肪滴に輸送されるが,小胞体ERに局在するエステル化酵素ACATのインヒビターSandoz58-035存在下ではその脂肪滴輸送が阻害され,ERに留まる像として観察できた。また,ケイ素を結合させたSi-pyrene-cholesterolは非Si型pyrene-cholesterolに比べて蛍光強度が3倍近く増強した(特願2007-075377)。Pyrene付加コレステロールとpyrene付加リン脂質は会合するとエキシマー効果を呈し,発光波長が長波長側にシフトした。更に,pyreneと同族のperyleneを付加したコレステロールプローブを作成し,このプローブでマクロファージを標識すると,細胞はSi-pyrene-cholesterolよりもさらに強く発光した(特許出願中)。

The purpose of this study is to track the dynamics of the intracellular light source. ,コレステロールのfunctionalityをvisualizationしてvaluation価するpurposeでthe followingのprojectをsettingした. Issue 1) Biomembrane type biofilm opening Issue 2) Biomembrane pass-through type biofilm opening in acidic environment Topic 3) Measurement of biomembrane lipid synthesis and dissociation and its original properties and protection It contains 3 types of dansyl-cholesterol, 3 types of dansyl-cholesterol, and 2 types of non-introduced pyrene-cholesterol (Special Application No. 2007-075414). Dansyl-cholesterol is a hydrophilic-water-environment-resistant water-environment-based light-emitting material, and the membrane content is low and long-wavelength (green)に,多いとshort wavelength(green)にシフトするので蛍光発色から片コレステローThe content has been estimated and confirmed (Special Application No. 2007-110515). More active dansyl-cholesterol (20) is used to transport fat droplets, and the small cell body ER is in the system. In the presence of enzyme ACAT Sandoz 58-035, the fat droplet transport is blocked and the ER stays in the same state. The light intensity of Si-pyrene-cholesterol, a non-Si type pyrene-cholesterol combined with Si-pyrene-cholesterol, is nearly 3 times higher than that of Si-pyrene-cholesterol (Special Application No. 2007-075377). Pyrene plus コレステロールとpyrene plus リン lipid は convergence するとエキシマー effect を成し, 発光 wavelength が long wavelength side にシフトした. More, pyrene is of the same clan, perylene is added, and pyrene is made of pyrene, and pyrene is made of pyrene. The ァージを logo is すると, the cell is Si-pyrene-cholesterol よりもさらに强く発光した (licensed).

项目成果

Molecular probes for sensing the cholesterol composition of subcellular organelle membranes.

• DOI: 10.1016/j.bbalip.2006.06.016
• 发表时间: 2006-10
• 期刊: Biochimica et biophysica acta
• 作者: Rong Wang;M. Hosaka;Lu Han;Hiromi Yokota-Hashimoto;M. Suda;D. Mitsushima;S. Torii;T. Takeuchi

癌を探す:新規発光プローブによる癌イメージング

寻找癌症：使用新型发光探针进行癌症成像

• 发表时间: 2007
• 作者: Wang R;Hosaka M;Han L;Yokota-Hashimoto H;Suda M;Mitsushima D;Torii S;Takeuchi T;穂坂 正博
• 通讯作者: 穂坂 正博

生体膜コレステロール組成感知プローブの解析

生物膜胆固醇成分传感探针分析

• 发表时间: 2007
• 作者: 梅山大地;岡田悟;太田一寿;伊藤隆司;王 蓉
• 通讯作者: 王 蓉

Sorting mechanism of peptide hormones to secretory granules by the lead of cholesterol-bindingprotenin.secretogranin III in endocrine cells

内分泌细胞中胆固醇结合蛋白分泌粒素Ⅲ引导的肽类激素对分泌颗粒的分选机制

• 发表时间: 2008
• 期刊: Current Diabetes Rev 4
• 作者: Takeuchi T. and Hosaka. M.

新規蛍光化合物およびそれを用いた細胞内コレステロールの検出方法

新型荧光化合物及用其检测细胞内胆固醇的方法

• 发表时间: 2010