生体膜コレステロール組成を感知する蛍光プローブの開発

开发感应生物膜中胆固醇成分的荧光探针

• 批准号: 18651102
• 负责人: 竹内 利行
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18651102/
• 关键词: コレステロール; ピレン; ダンシル; 発光プローブ; エキシマー効果; ペリレン; 蛍光プローブ; アクリジンオレンジ; DAMP; ピレン基; ダンシル基; 内分泌顆粒

本研究では,細胞内のコレステロール動態を追跡する蛍光プローブを開発し,コレステロールの機能を可視化して評価する目的で以下の課題を設定した。課題1)生体膜トラップ型プローブの開発課題2)酸性環境でエキシマー効果を出す生体膜通過型プローブの開発課題3)生体膜でリン脂質とコレステロールの会合と解離を測定するプローブの開発コレステロール本来の性質を保持したプローブとして,dansyl基の付加位置が異なる3種類のdansyl-cholesterolと,ケイ素導入,非導入2種類のpyrene-cholesterolを作成した(特願2007-075414)。Dansyl-cholesterolは親水-疎水環境に応じて蛍光スペクトルが変化し,膜コレステロール含量が少ないと長波長(緑)に,多いと短波長(青)にシフトするので蛍光発色から膜コレステロール含量を推測できることを確認した(特願2007-110515)。更にdansyl-cholesterol(20)は活性化マクロファージで生ずる脂肪滴に輸送されるが,小胞体ERに局在するエステル化酵素ACATのインヒビターSandoz58-035存在下ではその脂肪滴輸送が阻害され,ERに留まる像として観察できた。また,ケイ素を結合させたSi-pyrene-cholesterolは非Si型pyrene-cholesterolに比べて蛍光強度が3倍近く増強した(特願2007-075377)。Pyrene付加コレステロールとpyrene付加リン脂質は会合するとエキシマー効果を呈し,発光波長が長波長側にシフトした。更に,pyreneと同族のperyleneを付加したコレステロールプローブを作成し,このプローブでマクロファージを標識すると,細胞はSi-pyrene-cholesterolよりもさらに強く発光した(特許出願中)。

This study aims to develop and visualize the cellular dynamics of the cell. Topic 1) Development of bio-membrane transition types Topic 2) Development of bio-membrane transition types in acidic environments Topic 3) Determination of the association and dissociation of bio-membrane lipids and cytosol, and maintenance of the original properties of bio-membrane transition types. 2 kinds of pyre-cholesterol are not introduced (Japanese Patent Application 2007-075414). Dansyl-cholesterol has been confirmed to have a low content of light emitting substances in the film due to a hydrophilic/hydrophilic environment (green) and a high content of light emitting substances in the film due to a short wavelength (cyan)(Japanese Patent Application No. 2007-110515). In addition, dansyl-cholesterol(20) was activated to produce lipid droplet transport, and the ER of microsomes was inhibited in the presence of the enzyme ACAT Sandoz58-035. Moreover, the light intensity of Si-pyrene-cholesterol is nearly 3 times stronger than that of non-Si-type pyrene-cholesterol (Patent Application 2007-075377). Pyrene is the most important component of a polymer. In addition,pyrene and perylene of the same family are added to the cell wall to create a cell wall, and the cell wall is Si-pyrene-cholesterol (licensed).

项目成果

Molecular probes for sensing the cholesterol composition of subcellular organelle membranes.

• DOI: 10.1016/j.bbalip.2006.06.016
• 发表时间: 2006-10
• 期刊: Biochimica et biophysica acta
• 作者: Rong Wang;M. Hosaka;Lu Han;Hiromi Yokota-Hashimoto;M. Suda;D. Mitsushima;S. Torii;T. Takeuchi

癌を探す:新規発光プローブによる癌イメージング

寻找癌症：使用新型发光探针进行癌症成像

• 发表时间: 2007
• 作者: Wang R;Hosaka M;Han L;Yokota-Hashimoto H;Suda M;Mitsushima D;Torii S;Takeuchi T;穂坂 正博
• 通讯作者: 穂坂 正博

生体膜コレステロール組成感知プローブの解析

生物膜胆固醇成分传感探针分析

• 发表时间: 2007
• 作者: 梅山大地;岡田悟;太田一寿;伊藤隆司;王 蓉
• 通讯作者: 王 蓉

Sorting mechanism of peptide hormones to secretory granules by the lead of cholesterol-bindingprotenin.secretogranin III in endocrine cells

内分泌细胞中胆固醇结合蛋白分泌粒素Ⅲ引导的肽类激素对分泌颗粒的分选机制

• 发表时间: 2008
• 期刊: Current Diabetes Rev 4
• 作者: Takeuchi T. and Hosaka. M.

新規蛍光化合物およびそれを用いた細胞内コレステロールの検出方法

新型荧光化合物及用其检测细胞内胆固醇的方法

• 发表时间: 2010