T細胞レセプターの解析に基づく日本脳炎病態形成機序の解明

基于T细胞受体分析阐明日本脑炎发病机制

• 批准号: 19659119
• 负责人: 倉根 一郎
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659119/
• 关键词: 日本脳炎; 日本脳炎ウイルス; 脳内浸潤細胞; TCRレパトス; 感染免疫; T細胞レセプター; TCRレパトア; spectratyping; CDR3

本研究では、日本脳炎ウイルス(JEV)接種マウス脳炎モデルを用いて脳内に浸潤するT細胞に着眼して、JEVによる脳炎発症にメカニズムを免疫学的に詳細に解析し、、脳神経障害の本態を解明することを目的とした。JEV感染後に経時的採取したマウス脳に浸潤したTリンパ球についてT細胞受容体(T cell receptor; TCR)レパトア解析を行うことにより抗原特異的免疫応答の有無を解析した。さらに、脳炎病変部における免疫学特徴については脳内のサイトカインプロファイルの解析を行った。日本脳炎に関与する抗原特異的免疫応答に対する研究手法としては、獲得免疫系の主体であるT細胞の全TCR遺伝子を同一条件下で増幅し、生体内の発現頻度を反映させることができるAdaptor-Ligation-PCR法によるTCRレパトア解析法を用いて検証を行った。その結果、感染脳内には複数匹の個体に共通した特徴的なTCRレパトアの偏りが確認され、CDR size spectratypingによるclonality解析とシーケンスから同一のクローンが存在している結果を得た。また、リアルタイムPCRによる脳内浸潤T細胞の機能的検討を行った結果、感染の進行に従い、CD3、CD8の増加とIFNγ、TNFα等の発現亢進が確認され、Th1/Tc1タイプの免疫応答が惹起されていることが確認された。同じフラビウイルス科フラビウイルス属に属し日本脳炎血清型群の一つであるウエストナイルウイルス(WNV)を用いた比較検討結果から、同様なTh1/Tc1タイプの免疫応答が惹起されていたが、JEVとWNVのTCRレパトアは夫々で異なり、夫々に特異的なTCRを保有するT細胞クローンが脳内に浸潤していた。今回の研究結果からJEV感染後に発症する脳炎においては、脳内に極めて限定したJEV特異的T細胞の浸潤が脳炎発症に重要に関与することが示唆された。

The aim of this study is to elucidate the nature of JEV disease by immunologically analyzing the effects of JEV vaccination on T cell infiltration. JEV infection after the adoption of the time to take the invasion of T cell receptor (TCR) to resolve the presence of antigen-specific immune response The immunological characteristics of the inflammatory disease are analyzed in detail. The study method of antigen-specific immune response in Japanese Yenitis was used to obtain the whole TCR gene of T cells from the host of immune system under the same conditions. The frequency of TCR gene expression in vivo was reflected. The Adaptor-Ligation-PCR method was used to analyze TCR gene expression. The results show that the TCR of the common characteristics of multiple individuals in the infected area is confirmed, the CDR size spectrum is analyzed, and the results show that the same individual exists. The results of the functional evaluation of infiltrating T cells in vivo, the progress of infection, the increase of CD3, CD8, IFNγ, TNFα, and the immune response of Th1/Tc1 were confirmed. The results of comparative study on the same Th1/Tc1 subtype of Japanese Yenitis serotypes (WNV) showed that the immune response of JEV and WNV was induced by the same Th1/Tc1 subtype, while the TCR of JEV and WNV was different and the specific TCR was maintained. The results of this study indicate that JEV specific T cell infiltration is important for inflammation after infection.

项目成果

フラビウイルス脳炎における脳内の生体反応の解析

黄病毒脑炎脑部生物反应分析

• 发表时间: 2008
• 作者: 井原一高;豊田淨彦;宮田真梨子;梅津一孝;藤井克樹
• 通讯作者: 藤井克樹

Accumulation of T-cells with selected T-cell receptors in the brains of Japanese encephalitis virus-infected mice.

• DOI: 10.7883/yoken.jjid.2008.40
• 发表时间: 2008-01
• 期刊: Japanese journal of infectious diseases
• 影响因子: 2.2
• 作者: Yoshiki Fujii;Kazutaka Kitaura;K. Nakamichi;T. Takasaki;R. Suzuki;I. Kurane

ウエストナイルウイルス感染マウスにおける脳炎発症に関わる脳内浸潤T細胞の解析

西尼罗河病毒感染小鼠脑部浸润性T细胞与脑炎发病相关的分析

• 发表时间: 2008
• 作者: 北浦一孝;藤井克樹;林昌宏;高崎智彦;鈴木隆二;倉根一郎
• 通讯作者: 倉根一郎

日本脳炎ウイルス感染マウスにおける脳内浸潤細胞のT cell receptorレパトア解析

日本脑炎病毒感染小鼠脑浸润细胞T细胞受体库分析

• 发表时间: 2007
• 作者: 藤井 克樹;北浦 一孝;高崎 智彦;鈴木 隆二;倉根 一郎
• 通讯作者: 倉根 一郎