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新規循環調節性ペプチドの発現ならびに機能解析

新型循环调节肽的表达及功能分析

基本信息

批准号：
19659200
负责人：
七里眞義
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659200/
关键词：
生理活性因子新規循環調節性ペプチド全長濃縮cDNA

项目摘要

研究代表者はこれまでバイオインフォマティクス解析によって内因性生理活性因子をコードする可能性が高いcDNA配列をヒト全長濃縮cDNAライブラリーから選択して機能解析する新たな手法を考案し、降圧活性を有する多機能性生理活性ペプチドであるサリューシンなどを発見してきた。本手法を改良する過程でヒトの臓器に広範囲に発現している新規ペプチドが存在する可能性を見出し、サリューシンとは異なるメカニズムの降圧活性を示す新たなアミノ酸配列を見出した。本ペプチド配列を化学合成してその生理活性を検討したところ、ラット灌流心ワーキングモデルにて大動脈流量を著明に低下させるものの、invivoラットではサリューシンのような徐脈は惹起しないことなどが明らかになった。また、この新規循環調節性ペプチドをコードする遺伝子がヒトの各臓器に広範に発現していることをmRNAレベルで確認した上で、特異的なポリクローナル抗体を作成してラット主要臓器を用いて検討したところ、蛋白レベルでも広範に発現していることが明らかになった。本ペプチドは溶解性が低いため、精製に必要な逆相高速液体クロマトグラフィーの条件設定に苦慮してきたが、作成したポリクローナル抗体を用いたカラムを作成し、溶出液の免疫活性の検出に必要なradioimmunoassay系の確立に成功した。そのため、ヒト体液における分子存在様式の確定のために必要な条件が揃うこととなった。

The research representative has high possibility of gene sequencing, full-length concentrated gene sequencing and functional analysis. The method improves the process of detecting the presence of a new inhibitor, and shows the possibility of detecting the presence of a new inhibitor. The physiological activity of the compound is discussed in detail in the chemical synthesis and perfusion of the compound. The arterial flow is reduced in vivo. This new regulation of the cycle of regulatory protein expression in the expression of the protein in each organ of the protein expression in the mRNA expression in the confirmation of the above, specific protein expression in the antibody production in the use of the main organ of the protein expression in the protein expression in the expression in the mRNA expression in the protein expression in the protein expression in the protein This paper describes the successful establishment of the necessary radioimmunoassay system for the purification of the high speed reverse phase liquid with low solubility and necessary purification. There are necessary conditions for determining the molecular existence pattern in body fluids.