C-myc遺伝子による生理活性因子の制御とアポトーシスの機構

C-myc基因对生物活性因子和细胞凋亡机制的控制

• 批准号: 07671117
• 负责人: 七里 眞義
• 金额: --
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07671117/
• 关键词: c-myc遺伝子; c-Myc蛋白; 生理活性因子; エンドセリン; 転写調節

Gene targetingを含む遺伝子操作により樹立したc-Myc発現量が異なる各細胞株(ラット線維芽由来親細胞(TGR-1^<+/+>)、c-mycへテロ欠失細胞(HET15^<+/->,HET16^<+/->)、外来c-myc発現細胞(LacO3^<+/-,+>,LacO16^<+/-,+>))を用いて以下の実験を行った。ヒトエンドセリン(ET)-1遺伝子5′-隣接領域(-875-+51bp)をCAT遺伝子上流に挿入し(pET1【.right filled triangle.】875)、種々のdeletion constructsを作成し、各細胞での転写活性を比較検討した。HET15^<+/->,HET16^<+/->,LacO3^<+/-,+>LacO16^<+/-,+>の各細胞ではTGR-1^<+/+>に比較し、pET1【.right filled triangle.】875による転写活性は著明に低かった。Deletion constructsのpET1【.right filled triangle.】642の活性は減弱、pET1【.right filled triangle.】372は著明に亢進、pET1【.right filled triangle.】179,pET1【.right filled triangle.】20は減弱していたが、HET15^<+/->ではTGR-1^<+/+>に比較し活性は著明に低かった。ヒトc-Myc発現vector(pSPT-Myc)は、HET15^<+/->においてpET1【.right filled triangle.】875をtransactivateしたが、高用量ではCAT活性を抑制した。pSPT-MycはpET1【.right filled triangle.】372の転写活性を著明に亢進させたが、高用量でも減弱させず、pET1【.right filled triangle.】642,pET1【.right filled triangle.】179,pET1【.right filled triangle.】20の活性をtransactivateしなかった。以上の結果から、c-Myc蛋白はその生理的発現量でET-1遺伝子転写を2相性に強力に調節していることが明らかとなった。ET-1遺伝子上流((-857--642bp)および(-372--179bp))にはc-Myc蛋白による転写促進領域が、(-642bp--372bp)には抑制領域が存在することも示された。しかし、E-boxは(-656--660)にしか存在せず、未知の転写制御機構の存在が示される。

Gene targeting was performed using the following methods: (1) the parent cell (TGR-1^<+/+>),(2) the deficient c-myc cell (HET15^<+/->, HET16 ^<+/->), and (3) the foreign c-myc expressing cell (LacO3^<+/-,+>, LacO16 ^<+/-,+>).ヒトエンドセリン(ET)-1遗伝子5′-邻接领域(-875-+51bp)をCAT遗伝子上流に挿入し(pET1【.right filled triangle.】875)The deletion constructs were prepared and the writing activity of each cell was compared. HET15^<+/->, HET16 ^<+/->, LacO3 ^<+/-,+>LacO16^<+/-,+> Each cell is compared to TGR-1^<+/+>, pET1 [.right filled triangle.] 875 Deletion constructsのpET1【.right filled triangle.】642 Activity decreased, pET1 [.right filled triangle.] 372 Opposite bright hyperactivity, pET1 [.right filled triangle.] 179,pET1【.right filled triangle.】20, HET15^<+/-> TGR-1^<+/+> C-Myc appears vector(pSPT-Myc), HET15^<+/-> pET1 [.right filled triangle.] 875 transactivate and inhibit CAT activity at high doses. pSPT-MycはpET1【.right filled triangle.】372's writing activity is obviously increased, high dosage is decreased, pET1 [.right filled triangle.] 642,pET1【.right filled triangle.】179,pET1【.right filled triangle.】20. Activity transactivate. As a result, c-Myc protein is strongly regulated by ET-1 gene expression in a biphasic manner. ET-1 gene upstream (-857--642bp) and (-372--179bp) showed the existence of a promoter domain and an inhibitor domain for c-Myc protein. E-box (-656--660) indicates the existence of unknown control mechanism.

项目成果

七里眞義,他: "c-Myc蛋白による細胞周期関連遺伝子の発現調節-ジーン・ターゲティングによる研究" 日本内分泌学会雑誌. 71. 460 (1995)

Masayoshi Shichiri 等人：“c-Myc 蛋白对细胞周期相关基因的表达的调节 - 通过基因靶向进行的研究”日本内分泌学会杂志 71. 460 (1995)。

七里眞義,他: "c-Mycによる細胞周期関連遺伝子におよぼす影響" 動脈硬化. 22. 662 (1995)

Masayoshi Shichiri 等：“c-Myc 对细胞周期相关基因的影响”动脉硬化。