潰瘍性大腸炎患者のPCR法による免疫遺伝子DNAの解析と大腸抗原抗体の関連性

PCR法分析溃疡性结肠炎患者免疫基因DNA及结肠抗原抗体关系

• 批准号: 03454225
• 负责人: 朝倉 均
• 金额: $ 3.07万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 1992
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03454225/
• 关键词: 潰瘍性大腸炎; 免疫遺伝子; HLA; DP抗原; TNFβ

潰瘍性大腸炎の多くの症例が,再燃緩解型か慢性持続形を呈することより,この炎症の遷延化に免疫遺伝子側にある偏倚があると考えられる。また,HLAーclass II抗原には免疫応答遺伝子の存在も指摘されている。本研究では従来の血清学的タイピングに加え,HLAーDP抗原の遺伝子タイピングおよびTNFβ遺伝子の多型性を検討した。方法:診断基準を満たす日本人潰瘍性大腸炎患者39例,日本人正常人99例を対象とした。高分子DNAは患者および対照末梢血より,猪子らの方法に従い抽出した。(1)HLAーDP遺伝子タイプング DPB1遺伝子タイピングは前田らの方法で行った。(2)TNFβ遺伝子多型性の検出,AKIBA Bcell line由来のコスミドクロ-ンより得たTNFβ遺伝子プロ-ブを用いた。抽出した高分子DNAを制限酵素で切断,0.7%アガロ-ス中で泳動後ナイロンフィルタ-上に転写し, ^<32>P標識プロ-ブとハイブリダイズし,5.5kbと10.5kbのフラグメントを検出した。(3)NIH法による血清学的HLAタイピングも行った。成績:(1)日本人潰瘍性大腸炎ではHAーDPw9(DPB1)が有意に高値であった(relative risk=6.1,x^2=14)、(2)本症ではTNFβは10.5kbを有していた,(3)本症ではHLAーBw52を58%のものが有していたが,これを有しない者ではB13,B44を有していた。Bw52,B13,B14は第3超可変部領域のほぼ全長にわたる63〜77番目のアミノ酸が同一配列を有していることより,本症の疾患感受性にこれらのB抗原が関与していことが示唆された。結語:本症の免疫遺伝ではHLAのBW52>PPw9>DR2が有意に保育され,A24ーBw52ーTNFβ10.5KbーDR2ーDQw1ーDPw9のハプロタイプが強く保持されていた。B抗原のBw52,B13,B44は相同性のアミノ酸配列を有した。本症患者に免疫遺伝の偏倚が示唆された。

There are many cases of ulcerative colitis, such as reburning remission type, chronic persistent type, and delayed inflammation type. HLA class II antigens are found in the presence of immune response genes. In this study, we investigated the polymorphism of HLA DP antigen and TNFβ gene. Methods: 39 cases of ulcerative colitis in Japanese and 99 cases of normal Japanese were examined. Polymeric DNA is extracted from the patient's peripheral blood. (1)HLA-DP genetic code for DPB1 genetic code for DPB1 genetic code for D (2) Detection of TNFβ gene polymorphism,AKIBA Bcell line origin and use of TNFβ gene. DNA restriction enzymes were cut off by 0.7%, and DNA restriction enzymes were cut off <32>by 10.5 kb. (3)NIH method for serological HLA classification. Results:(1) Japanese Ulcerative Colitis: HA-DPw9(DPB1) is intentionally high (relative risk= 6.1, x^2 =14);(2) TNFβ is 10.5kb;(3) HLA Bw52 is 58%; B13,B44 is 58%; Bw52,B13,B14 are the same as Bw 52, B13, B14 in the 3rd supervariable domain, and Bw 52, B13, B14 are related to B-antigen in susceptibility to disease. Conclusion: The immune heritage of this disease is HLA BW52&gt;PPw9&gt;DR2, which is intentionally protected, and A24-BW52-TNFβ10.5Kb DR2-DQw1-DPw9 is maintained. B antigens Bw52,B13,B44 have the same identity and acid alignment. Patients with this disease are immune to genetic bias.

项目成果

Kazuhito Sugimura,et al: "Analysis of genes within the HLA region affecting susceptibility to Ulcerative Colitis" Human Immunology. (1992)

Kazuhito Sugimura 等人：“HLA 区域内影响溃疡性结肠炎易感性的基因分析”人类免疫学。