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新しいvasopressin受容体(Vp)の構造と機能に関する分子薬理学的研究

新しいvasopressin受容体(Vp)の構造と機能に関する分子薬理学的研究
新型加压素受体（Vp）结构与功能的分子药理学研究
批准号：
04454147
负责人：
遠藤 仁
金额：
$4.16万
依托单位：
Kyorin University (1993)The University of Tokyo (1992)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1992 至 1993
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04454147/
关键词：
アルギニンバソプレシン単一ネフロン近位尿細管細胞内遊離カルシウムトランスジェニックマウスV_2受容体SV40-T抗原発現クローニングアルギニンバゾプレシンアンモニア産生

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项目成果

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初年度に明確にできたVp受容体の腎組織内局在の状況証拠をもとに更にその実態を追求するためにVp受容体のクローニングを以下の方法で試みた。1、クローニングの材料の選択:我々はVp受容体のクローニングの材料として初年度に樹立したSV-40largeT抗原導入トランスジェニックマウスから微小単離法で採取した近位尿細管起始部(S1)由来の細胞が本目的に最適と考え同細胞のスクリーニングを試みた。すなわち非クローン細胞及び単個培養法で得られたクローン化細胞のAVP応答性を細胞内にFura-2をloadし細胞内カルシウム濃度(〔Ca^<2+>〕_i)を測定してVp受容体の発現の最も高い細胞の選択を試みた。その結果AVP反応性は非クローン細胞およびクローン化細胞22クローン中10クローンで認められた。この高いVp受容体発現が認められた細胞をクローニングの材料として用いることとした。2、PCRクローニング:既に構造が決定されているV_1、V_2及びオキシトシン受容体は膜貫通部位においてアミノ酸配列が極めてよく保持されている。そこでVp受容体もこれらと類似性をもつと考え、そのアミノ酸配列を基にdegenerative primerを作製し、上記の細胞から抽出したRNAを鋳型として鋳型量、塩濃度、サイクルそして厳密性について数々の条件でRT-PC法を行なった。しかしながら本報告書作成の時点では予想される長さのDNA増幅は認められていない。3、実験手法を変えて、アフリカツメガエルの卵細胞を用いた発現クローニング法でVp受容体cDNAのクローニングを目下企画中である。
期刊论文(30)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Takeda,M.: "Intranephron distribution of creatine content in rats" Biochemistry and Molecular Biology International. 32. 435-440 (1994)
Takeda，M.：“大鼠肌酸含量的肾单位分布”国际生物化学和分子生物学。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Sekine,T.: "Ammonia production in cell lines established from transgenicmice harboring temperature-sensitive SV-40large Tantigen" Contributions to Nephrology. 110(in press). (1994)
Sekine,T.：“从带有温度敏感的 SV-40large Tantigen 的转基因小鼠建立的细胞系中产生氨”对肾脏病学的贡献。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
遠藤 仁: "毒性試験動物代替法" 栄光堂, 220 (1993)
Hitoshi Endo：“毒性测试的动物替代方法”Eikodo，220（1993）
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Kondou,I.: "Alterations of gluconeogenesis by ischemic renal injury in rats." Renal Failure. 14. 479-483 (1992)
Kondou,I.：“大鼠缺血性肾损伤对糖异生的改变。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 15 条
    ATTRwtアミロイドーシスの病態メカニズムの解明
    • 批准号：
      24K02570
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
    • 资助金额：
      $11.9万
    • 财政年份：
      2024
    • 负责人：
      遠藤 仁
    • 依托单位：
      Keio University
    ミトコンドリア制御蛋白を介した心筋保護機構の解明および新規治療法の開発
    • 批准号：
      21K08134
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
    • 资助金额：
      $2.75万
    • 财政年份：
      2021
    • 负责人：
      遠藤 仁
    • 依托单位：
      Keio University
    心臓のストレス応答における脂肪酸代謝の意義と機能についての網羅的解析
    中性子と光をプローブとした多成分系ソフトマターのメゾスケール時空間解析
    • 批准号：
      06J10348
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for JSPS Fellows
    • 资助金额：
      $0.77万
    • 财政年份：
      2006
    • 负责人：
      遠藤 仁
    • 依托单位：
      The University of Tokyo
    海外基金