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脳神経系細胞アストロサイトの分化誘導因子としての転写因子のクローニング

脳神経系細胞アストロサイトの分化誘導因子としての転写因子のクローニング
克隆转录因子作为星形胶质细胞、神经系统脑细胞的分化诱导剂
批准号：
04833019
负责人：
池中 一裕
金额：
$1.09万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1992 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04833019/
关键词：
アストロサイトプロモーター活性レトロウィルスセルソーター分化因子転写因子

项目摘要

项目成果

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平成4年度はアストロサイトの分化とともに誘導される転写因子をクローニングするために、レトロウイルスベクターの改良とβ-ガラクトジダーゼ(β-Gal)発現細胞分取法の確立を行った。われわれは(グリア線維性酸性蛋白質)GFAPプロモーター領域の下流に大腸菌β-ガラクトシダーゼ遺伝子を連結した遺伝子を含むレトロウイルスベクターをすでに構築しており、このものが初代培養脳細胞に障害を与えることなく効率よく感染し、アストロサイト特異的にβ-ガラクトシダーゼを産生することを見いだしている。しかし、このベクターにおいてはGFAPプロモーターが上流にあるLTRプロモーターからの転写により転写干渉を受けていることが分かった。これを避けるために3′側のLTRのTATAboxに置換突然変異を導入し、ウイルス感染後のLTRプロモーター活性を無くすることに成功した。この結果、挿入プロモーターの活性が数倍上昇した。また、β-Gal活性を示す細胞を分取するために蛍光性の基質(FDG)を調製した。NIH3T3細胞にβ-Gal産生ウイルスを感染させ、生きたままFDG処理し、FACS(fluorescent activated cell sorter)を用いて蛍光性の細胞を分取したところ、95%以上の細胞にβ-Gal産生が認められた。これらの技術を合わせ用いることによりGFAPプロモーターの活性化された細胞が容易に調製できるようになった。
期刊论文(6)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Kazunori Nakajima,et al.: "Novel isoforms of mouse myelin basic protein predominantly expressed in embryonic stage." J.Neurochem.
Kazunori Nakajima 等人：“小鼠髓磷脂碱性蛋白的新亚型主要在胚胎阶段表达。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Masanobu Yamada,et al.: "Retrovirus-mediated gene transfer targeted to malignant glioma cells in murine brain." Jpn.J.Cancer Res.83. 1244-1247 (1992)
Masanobu Yamada 等人：“逆转录病毒介导的基因转移靶向小鼠大脑中的恶性胶质瘤细胞。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Kazunori Nakajima,et al.: "An improved retroviral vector for assaying promoter activity analysis of promoter interference in pIP211 vector." FEBS LETTERS. 315. 129-133 (1993)
Kazunori Nakajima 等人：“一种改进的逆转录病毒载体，用于测定 pIP211 载体中启动子干扰的启动子活性分析。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
アストロサイトによるシナプス機能調節機構解明とその脳内局所異常が行動に及ぼす影響
  • 批准号：
    20019032
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $3.58万
  • 财政年份：
    2008
  • 负责人：
    池中 一裕
  • 依托单位：
    National Institute for Physiological Sciences
シアル酸化N-結合型糖鎖の網羅的解析による癌の分類
  • 批准号：
    20014027
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $5.57万
  • 财政年份：
    2008
  • 负责人：
    池中 一裕
  • 依托单位：
    National Institute for Physiological Sciences
Glial Cells Missing遺伝子ノックアウトマウスにおけるグリア細胞産生
神経発生における糖鎖発現の生理的意義の解明
海外基金