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ホルモン依存性プログラム細胞死の分子機構解析とその応用

激素依赖性程序性细胞死亡的分子机制分析及其应用

基本信息

批准号：
07670168
负责人：
垣塚彰
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670168/
关键词：
fas アポトーシスプログラム細胞死デスシグナルエストロゲン

项目摘要

1 研究目的本研究は、プログラム細胞死を脂溶性ホルモンにより自由にコントロールしうるシステムを作りだし、さらに本システムをもちいてプログラム細胞死の分子機構を明らかにすることを目的としている。2 研究成果fas抗原受容体のプログラム細胞死に必須な蛋白領域とエストロジェンホルモン受容体もしくはレチノイン酸受容体のリガンド結合領域を結合した融合蛋白質をコードする融合遺伝子を作出し、fas抗原に感受性があることが知られているL929細胞及びHeLa細胞に恒常的に発現するように導入した。得られた細胞株に、導入した融合遺伝子の受容体部分に対応するリガンド(エストラヂオール、レチノイン酸)を加えたところ、どちらの細胞においても0.1nMのエストラヂオール、10nMのレチノイン酸で処理後約12時間ですべての細胞が死滅することが観察され、脂溶性ホルモンによりプログラム細胞死を自由にコントロールしうるシステムの確立に成功した。一方、プログラム細胞死にかかわる細胞内シグナルトランスダクションに関わる生化学的な解析は、現在までほとんど進展していない。我々は、プログラム細胞死のシグナル伝達の分子機構を明らかにする目的でfas抗原受容体のデスドメインと相互作用をする分子をイ-ストのtwo hhybrid法を用いて検索した。その結果、マウスfas抗原受容体のデスドメインと相互作用を示す分子をコードするcDNAを複数分離した。いずれの分子も、これまでに報告のない未知の分子で、細胞死のシグナルを伝えない変異体(C末端の欠失・lprCG変異体)とは反応を示さなかった。今後、これらの分子が細胞死に与える影響について解析を行う。

1 the purpose of this study is to determine whether the cell death is fat-soluble or fat-soluble, and that the molecular mechanism is clear that the purpose of this study is to prevent cell death from cell death. 2 Research results fas antigen receptor cell death assay must be performed in the protein field, in the protein field, in the protein domain, in the recipient cell, in the acid receptor, in the field, in combination with the fusion protein, in the fusion protein, and in the fusion protein. The constant expression of fas antigen in L929 cell and HeLa cell was detected by immunoreactivity assay. The cell strain and the recipient part of the fusion cell were collected, and the cell cycle was monitored after about 12 hours after the treatment of 0.1nM, 10nM, and so on. The fat-soluble baby made sure that the cell was dead and that it was successful. On the one hand, the cell is dead, the cell is dead, and the cell is dead. In the cell, the cell is dead. The biochemical analysis is now in progress. The molecular mechanism of cell death was confirmed by the molecular mechanism. The purpose of the fas antigen receptor was to detect the interaction between the antigen receptor and the molecule. The two hhybrid method was used to determine the molecular weight. The results of this study showed that the interaction between the antigen receptor of fas antigen and the receptor of fas antigen showed that the complex number of molecules was isolated from cDNA. The missing molecules, the unknown molecules, the dead cells, the missing lprCG molecules at the C-terminal, the unknown molecules, the dead molecules, the missing molecules at the C end, the missing molecules at the C end, the unknown molecules, the dead molecules, the missing molecules at the C end. In the future, the molecules will be divided into cell death and cell death.