エンドトキシンショックにおける脂質伝達物質の役割に関する研究

脂质介质在内毒素休克中的作用研究

• 批准号: 07670519
• 负责人: 本田 善一郎
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670519/
• 关键词: エンドトキシンショック; リポ多糖体; LPS; PAF; PAF受容体; ノックアウトマウス; src型キナーゼ; C末端srcキナーゼ

エンドトキシンショックはグラム陰性桿菌菌体成分のリポ多糖体(LPS)が炎症細胞のLPS受容体に結合し、血小板活性化因子(PAF)をはじめとする二次性伝達物質を放出することによつて引金が引かれる。本研究では、1)LPS受容体に連関する情報伝達機構、ことにsrc型キナーゼを介する伝達機構を解明し、治療標的となる細胞内機能分子を同定する、2)PAF受容体高発現、ノックアウトマウスを用いて、エンドトキシンショック動物モデルにおけるPAF受容体の役割を考察することを目的とした。本年度の成果を1)2)のそれぞれについて以下に報告する。1)LPS受容体の情報伝達機構近年LPS刺激細胞においてsrc型キナーゼが活性化されることが報告され注目をあびたが、炎症機能にsrc経路が必須のものであるか否かは未確認の問題であった。そこでマクロファージ細胞株にsrcを抑制するあらたな機能分子、C末端srcキナーゼ、その変異体を導入し、LPSによるsrcの活性化が完全に遮断された変異細胞を確立した。意外なことに、この細胞ではsrcの直下にあるshcのリン酸化、非刺激時の細胞内チロシンリン酸化などはほぼ完全に抑制されているにも関わらずMAPキナーゼ、アラキドン酸遊離、一酸化窒素遊離、活性酸素放出は元株と変わりがない。すなわち、LPSによるsrcの活性化は、炎症機能の面から見ると単なるby-stander的な現象にすぎないことを証明することができた。2)モデルマウスを用いたPAF受容体の役割の解析PAF受容体ノックアウトマウスはPAF静注によるショックに対して抵抗性であり、我々の単離した受容体が炎症を担う唯一のPAF受容体であること、おそらく他のアイソフォームは存在しないことが確認された。しかし同マウスはLPSによるショックには感受性であり、のエンドトキシンショックはPAF受容体遮断のみでは解除されないことが解った。この現象は5-lipoxygenaseノックアウトマウス(leukotrieneができない)と同様であり、単一の伝達物質遮断の限界を示している。今後、他のノックアウトマウスとの掛け合わせによるダブルノックアウトマウスの作成とその表現型の追求などあらたな方法を試みる必要がある。

In addition, LPS, a bacterial component of the negative bacteria, binds to LPS receptors on inflammatory cells and PAF, a secondary inhibitor, is released. The purpose of this study is: 1) to elucidate the information transmission mechanism, src type receptor transmission mechanism, and identification of intracellular functional molecules as therapeutic targets in LPS receptors; 2) to investigate the high expression of PAF receptors, their use in animals, and the role of PAF receptors in PAF receptors. Results for the year 1)2) The following reports are available: 1) Information transmission mechanism of LPS receptor in recent years LPS stimulated cells, src type, activation, report, attention, inflammation function, src pathway, essential, unconfirmed problems. The cell line src was completely blocked by the introduction of the C-terminal src and the activation of the C-terminal src. Unanticipated, unstimulated, intracellular acidification, complete inhibition, release of MAP, release of acid, release of an acid, release of an active acid, release of an acid. The activation of LPS and src and the phenomenon of inflammation are proved. 2) PAF receptor analysis PAF inhibitor PAF inhibitor It is the same as LPS. It is sensitive. It is sensitive to PAF. This phenomenon is 5-lipoxygenase (leukotriene) and the same phenomenon. In the future, it is necessary to try the method of making the phenotype.

项目成果

和泉,本田他: "Regulatio and signel transduction of PAF receptor" Adv.Prostaglavdiu thromboovl Res. 461-466 (1995)

Izumi, Honda 等人：“PAF 受体的调节和信号转导”Adv. Prostaglavdiuthrombovl Res. 461-466 (1995)

和泉,本田他: "Peatelet-Activating Factor Receptor" J.Lipid Mediators Cell signalling. 12. 429-442 (1995)

Izumi, Honda 等人：“Peatelet 激活因子受体”J.Lipid Mediators Cellsignaling 12. 429-442 (1995)。

本田他: "Gg pothway desensitiges cheniotait,ioreceptor-induced calcium signaling una inositol tris phosphotereceptor down regucation." J.Biol. Chem. 240. 8984-8990 (1995)

Honda 等人：“Gg pothway 脱敏，肌醇三磷酸受体下调的钙信号传导”，J.Biol。240。8984-8990 (1995)

南,武藤,大石,本田他: "Amino Acid sequence of quineapy LTA4 Hydrolase" Gene. 161. 249-251 (1995)

Minami，Muto，Oishi，Honda 等人：“quineapy LTA4 水解酶的氨基酸序列”基因 161. 249-251 (1995)。