新しいヒト熱ショック転写因子HSF4,ストレス応答における役割

新型人类热休克转录因子HSF4，在应激反应中的作用

• 批准号: 07680739
• 负责人: 中井 彰
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07680739/
• 关键词: ストレス蛋白質; ストレス応答; 分子シャペロン; 転写因子; 転写; HSP; HSF

申請者は、ヒトの第4番目のHSF、HSF4のcDNAの単離に成功した。本年度は、全長をもつHSF4cDNAの単離を行ったうえでHSF4の性質について解析し、その機能にアプローチすることを目標とした。新しく単離したcDNAクローンphHSF4-7は1555の塩基配列からなり、463アミノ酸をコードすると予測される。予測される産物hHSF4は、既知のHSFと比較してDNA結合ドメイン、オリゴマー形成ドメインに高い相同性がある。DNA結合ドメインを比較するとhHSF4はhHSF1と76%の相同性をもち、cHSF1、cHSF2、そしてcHSF3とは73%、66%、そして56%の相同性をもつ。HSF1、HSF2,そしてHSF3の全てにカルボキシル基末端側にはロイシンジッパー様構造が存在し、DNA結合能を負に調節している。興味深いのは、hHSF4にはこの構造が存在しない。実際、in vitroでhHSF4を合成すると、構成的にDNAへの結合能をもち、熱ショックを与えるとDNA非結合型になる。hHSF4の発現をmRNAのレベルで調べると、心臓、骨格筋で2.5kbのmRNAが、また、すい臓で4.5kbのmRNAが強く発現していた。HSF4は転写活性化能をもたない。HeLa細胞にHSF4を強発現したstable lineを5つ単離して、ターゲットであるストレス蛋白質の発現量を調べた。その結果、hsp90とhs2p7は例外なく発現量が低下していた。hsp70についてはほとんど変化なかった。以上の結果は、hHSF4が構成的なストレス蛋白質の発現を組織特異的に負に調節している可能性を示唆していた。

The applicant 単, ヒト, the 4th batch of <s:1> HSF, HSF4 cDNA clones 単 successfully isolated に た. は this year, the total length of を も つ HSF4cDNA の 単 line from を っ た う え で HSF4 の nature に つ い て analytical し, そ の function に ア プ ロ ー チ す る こ と を target と し た. New し く 単 from し た cDNA ク ロ ー ン phHSF4 1555-7 は の salt base with column か ら な り, 463 ア ミ ノ acid を コ ー ド す る と be さ れ る. Product can be さ れ る hHSF4 は, both known の HSF と compare し て dna-binding ド メ イ ン, オ リ ゴ マ ー form ド メ イ ン に high い identity が あ る. DNA binding ド メ イ ン を compare す る と hHSF4 は hHSF1 と 76% の identity を も ち, cHSF1, cHSF2, そ し て cHSF3 と は 73%, 66%, そ し て 56% の identity を も つ. HSF1, HSF2 そ し て HSF3 の full て に カ ル ボ キ シ ル base end side に は ロ イ シ ン ジ ッ パ ー others in existence が construct し, DNA binding energy を negative に adjust し て い る. It is of great interest that there is a が な <e:1> structure in the に and に of hHSF4. Be international, the in vitro で hHSF4 を synthetic す る と, consisting of DNA へ に の binding energy を も ち, hot シ ョ ッ ク を and え る と DNA non combination に な る. HHSF4 の 発 now を mRNA の レ ベ ル で adjustable べ る と is crucial, the heart, skeletal muscle で 2.5 KB の mRNA が, ま た, す い viscera で 4.5 KB の mRNA が strong く 発 now し て い た. Write the active chemical energy in HSF4 転 転. Strong HeLa に HSF4 を 発 now し た stable line 5 つ を 単 from し て, タ ー ゲ ッ ト で あ る ス ト レ ス protein の を 発 now quantity adjustable べ た. Youdaoplaceholder0 そ result, hsp90とhs2p7 <s:1> exception なく occurrence amount が low た て た た た. hsp70に に て て ほとん ほとん ほとん transformation な な った った. Up above の results は, hHSF4 が な ス ト レ ス protein の 発 now を tissue specific に negative に regulating し て い を る possibility in stopping し て い た.

项目成果

K. Yasuda et. al.: "Cloning and expression of murine high molecular mass heat shock proteions, HSP105." J. Biol. Chem.270. 29718-29723 (1995)

K.安田等。

A. Nakai et al.: "Expression and phosphirylation of B.P/GRP78, a moleular chaperone in the endoplasmic ret, culum, during the differentiation of a mouse myolobasticell me." Cell Strict Funct.20. 33-39 (1995)

A. Nakai 等人：“在小鼠肌胚细胞分化过程中，B.P/GRP78（一种内质 ret、culum 中的分子伴侣）的表达和磷酸化。”

N. Nagai et al.: "Quercetin supresses heat shock response by down regulation of HSF1." Biochem. Biophys. Res. Commun.208. 1099-1105 (1995)

N. Nagai 等人：“槲皮素通过下调 HSF1 来抑制热休克反应。”

A. Nakai et. al.: "The DNA binding properties of two heat shock factors, HSF1 and HSF3, are indnced in the avian erythroblast cell line HD6." Md. Cell. Biol.15. 5268-5278 (1995)

A. Nakai 等。

T. Higashi et. al.: "Activation of heat shock factor 1 in the at brain during cerebral isdhemia and after heat shock." Mol. Brain. Res. 34. 262-270 (1995)

T.东等人。