生体膜グリケーション指標としてのアマドリ型アミノリン脂質の免疫定量

作为生物膜糖化指示剂的阿马多里型氨基磷脂的免疫定量

基本信息

批准号：
14656031
负责人：
宮澤陽夫
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

先に我々は、種々の疾患において、ヒトの血液、臓器、細胞を構成している膜リン脂質は過酸化反応を受け、生じた過酸化リン脂質(PCOOH)が細胞障害の原因になることを明らかにしてきた。例えば、糖尿病者の血漿PCOOH濃度は健常者の1.5倍に高く、PCOOH増加は糖化ヘモグロビン値(Hb_<A1C>)と正相関した。そこで、この膜脂質過酸化の原因物質を検索した結果、アミノリン脂質がグリケーションを受けて生成するアマドリ型の糖化脂質(Amadori-PE)を発見し同定することに成功した。とのAmadori-PE高純度品の合成に成功し、これが鉄イオンと共存すると活性酸素を産生し、脂質過酸化を誘発することを証明した。すなわち、糖尿病などの生体メイラード反応で細胞器官の膜リン脂質が糖化(グリケーション)されAmadori-PEに変換されると、これが原因になって膜脂質過酸化(PCOOH増加)が起こり、疾病の増悪化に関わるという従来全く知られていない可能性を明示した。糖化脂質と糖尿病の関わりをさらに明確にするためには、ヒト体内のAmadori-PE量を知る必要がある。しかしながら、ヒトの血液や組織などの臨床検体における糖化脂質の存在については世界的にも未だ確証されていない。そこで本研究では、Amadori-PEの免疫定量法の開発に取り組んだが、感度の問題からヒト試料の分析は困難であった。一方、本年度から、新型の高性能リニアイオントラップ型ハイブリッド質量分析装置(4000Q TRAP)が利用できるようになった。4000Q TRAPによる測定を試みた結果、ヒト血漿にAmadori-PEが存在することを世界ではじめて明らかにした。Amadori-PEは、成人健常者の血漿には少なく、糖尿病者とくに腎臓病を併発した透析患者の血漿から最も多く検出された。血漿のAmdori-PE濃度が高いと、過酸化リン脂質(PCOOH)濃度も高値となった。したがって、"高血糖状態に生じる脂質のグリケーション産物であるAmadori-PEは膜脂質過酸化反応を惹起することで糖尿病の増悪化につながる"という我々独自の仮説が裏付けられた。糖尿病の発症における生体内グリケーションの指標として、Amadori-PE分析の有効性が確証された。

以前，我们已经表明，在各种疾病中，构成人体血液，器官和细胞的膜磷脂经历过氧化反应，并且所得的磷脂过氧化（PCOOH）会导致细胞损伤。例如，糖尿病患者的血浆PCOOH水平比健康个体高1.5倍，而PCOOH的增加与糖化的血红蛋白水平正相关（HB_ <A1C>）。因此，我们搜索了负责膜脂质过氧化的物质，并成功鉴定出Amadri-type糖化脂质（Amadori-PE），该脂质是由氨基磷脂所产生的。我们已经成功合成了Amadori-PE高纯度产品，并证明当它们与铁离子共存时，它会产生活性氧并诱导脂质过氧化。换句话说，当细胞器官中的膜磷脂被糖化（糖化）并转化为诸如糖尿病的生物毛虫反应中的Amadori-PE时，这会导致膜脂质过氧化（PCOOH的增加），这是一个因素，这是一个因素，它与疾病的疾病有关，这是完全不知所措的。为了进一步阐明糖化脂质和糖尿病之间的关系，有必要了解人体中的Amadori-PE量。然而，尚未在全球范围内确认在临床标本（例如人类血液和组织）中存在糖化脂质。因此，在这项研究中，我们致力于为Amadori-PE开发一种免疫权量方法，但是由于敏感性问题，对人类样品的分析很困难。同时，从今年开始，已获得了新的高性能线性离子陷阱杂种质谱仪（4000Q陷阱）。在尝试使用4000Q陷阱测量之后，这是世界上第一个揭示Amadori-PE存在于人血浆中的人。发现Amadori-PE在健康成年人的血浆中很少见，并且在糖尿病患者的血浆和同时发生肾脏病的透析患者的血浆中最常见。高血浆AMDORI-PE浓度也增加了过氧化磷脂（PCOOH）的浓度。因此，我们的独特假设得到了支持：“在高血糖中产生的脂质糖基化产物Amadori-Pe通过诱导膜脂质过氧化而导致糖尿病加剧。” Amadori-PE分析的有效性被证实是糖尿病发育中体内糖基化的指标。