ヒストン・メチル化によるTCRβ遺伝子座の対立遺伝子排除の制御

通过组蛋白甲基化控制 TCRβ 基因座的等位基因排除

• 批准号: 14657079
• 负责人: 生田 宏一
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657079/
• 关键词: サイトカインレセプター; Stat; γδT細胞; T細胞抗原受容体; シグナル伝達; DNA組換え; ヒストンアセチル化; 転写共役因子

リンパ球抗原受容体遺伝子は分化段階特異的にV(D)J組換えをおこすが、これはクロマチンの開閉状態により制御されている。我々は、インターロイキン7レセプターにより活性化されたStat5が、TCRγ遺伝子座に転写共役因子をリクルートし、ヒストンのアセチル化により転写とDNA組換えを誘導することを示した。最近、ヒストンH3Lys9のメチル化が種々の遺伝子座のサイレンシングを誘導することが報告されているので、TCRγ遺伝子座が閉じた状態とヒストンのメチル化との関連について解析した。BaF3/pim-1細胞ではIL-3刺激によりTCRγ遺伝子座においてヒストンのアセチル化が誘導される。この実験系を用いて、サイトカイン刺激後のTCRγ遺伝子座全域のヒストン修飾の経時的な変化を、抗アセチル化ヒストンH3Lys9抗体と抗メチル化ヒストンH3Lys9抗体を用いて、クロマチン免疫沈降法にて解析した。その結果、サイトカイン非刺激の状態でJγ遺伝子やエンハンサー領域が高レベルでメチル化されていたが、刺激後数日間でそのメチル化レベルが徐々に低下し、代わりにアセチル化レベルが上昇した。この時、Jγ領域のgermline転写の誘導をノザン法で、クロマチンの開閉状態を制限酵素accessibility法にて解析すると、サイトカイン刺激後数日間をかけて転写とaccessibilityが除々に上昇した。一方、Cγ遺伝子においては、ヒストン修飾のこのような変化は見られなかった。以上の結果から、TCRγ遺伝子座におけるヒストンH3Lys9の修飾は調節領域に特異的に誘導され、クロマチンの閉じた状態とヒストンのメチル化が良く相関することが示された。

The antigen receptor gene of the mouse is divided into two groups: V(D) and J. We have the ability to activate Stat5 and TCRγ gene loci, and we have the ability to activate DNA sequences. Recently, TCRγ receptor has been reported to be in a closed state and analyzed in a closed state by H3Lys9. BaF3/pim-1 cells were induced by IL-3 stimulation in the TCRγ locus. The results were analyzed by immunoprecipitation method using anti-TCR γ gene H3Lys9 antibody and anti-TCR γ gene H3Lys9 antibody. The results of the test, the non-stimulation state, and the number of days after stimulation, the number of days after stimulation, and the number of days after stimulation. The germline of the time, Jγ field, the open and closed state, the restriction enzyme accessibility, the resolution, the number of days after the stimulus, the increase in accessibility. A party, CγThe above results show that the modification of H3Lys9 in the TCRγ gene locus is a good correlation with the induction of specific regulatory domains.

项目成果

Watanabe, N.: "Activation and differentiation of autoreactive B-1 cells by interleukin-10 induce autoimmune hemolytic anemia in Fas-deficient anti-erythrocyte immunoglobulin transgenic mice."J.Exp.Med.. 196. 141-146 (2002)

Watanabe, N.：“白细胞介素 10 对自身反应性 B-1 细胞的激活和分化在 Fas 缺陷型抗红细胞免疫球蛋白转基因小鼠中诱导自身免疫性溶血性贫血。”J.Exp.Med.. 196. 141-146 (2002)

Han, H.: "Inducible gene knockout of transcription factor recombination signal binding protein-J reveals its essential role in T versus B lineage decision."Int.Immunol.. 14. 637-645 (2002)

Han, H.：“转录因子重组信号结合蛋白-J 的诱导基因敲除揭示了其在 T 与 B 谱系决定中的重要作用。”Int.Immunol.. 14. 637-645 (2002)

Lahn, M.: "MHC class I-dependent Vγ4+ pulmonary T cells regulate αβ T cell-independent airway responsiveness."Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 99. 8850-8855 (2002)

Lahn, M.：“MHC I 类依赖性 Vγ4+ 肺 T 细胞调节 αβ T 细胞独立的气道反应性。”Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 99. 8850-8855 (2002)

Lee, H.-C.: "Seeding of dendritic epidermal T cells in the neonatal skin is reduced in 129 strain of mice."Immunol.Lett.. 81. 211-216 (2002)

Lee, H.-C.：“129 品系小鼠中，新生皮肤中树突状表皮 T 细胞的接种量减少。”Immunol.Lett.. 81. 211-216 (2002)