リンパ球の分化過程におけるIL-7レセプターの発現制御機構

淋巴细胞分化过程中IL-7受体表达的调控

• 批准号: 04F04225
• 负责人: 生田 宏一
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F04225/
• 关键词: サイトカイン; T細胞抗原受容体; シグナル伝達; 転写因子; T細胞

T細胞では、正と負の選択がおこる胸腺のDP段階と抗原特異的なクローン増幅がおこる末梢の活性化T細胞の2つの分化段階で、IL-7Rの発現が一時的に低下する。いずれもTCRの親和性のみで細胞の生死が決まる段階であり、余計な生存・増殖シグナルを入れる可能性のあるIL-7Rを積極的にシャットオフしていると考えられる。したがって、IL-7Rの発現制御はリンパ球の発生・分化過程で重要な役割を果たしている。本研究の目的は、IL-7Rα鎖遺伝子の転写誘導機構とTCRシグナルによるその抑制機構を解析し、リンパ球の生成・分化過程におけるIL-7Rの発現制御の意義を明らかにすることにある。まず、TCR刺激による末梢T細胞のIL-7Rα鎖の発現の変化を解析した。固相化抗CD3抗体でマウス脾臓T細胞をin vitroで刺激すると、刺激前にはIL-7Rα鎖が高レベルで発現していたものが、刺激後16時間で完全に消失した。次に、IL-7Rα鎖のmRNA量を解析した結果、刺激後1時間で半減し、16時間でほぼ消失した。さらに、この低下は、TCRの下流シグナル分子P38の阻害剤SB203580の添加によってブロックされた。これらの結果から、TCRの下流シグナル分子p38によってIL-7Rα鎖遺伝子の転写が抑制されることが明らかとなった。次に、IL-7Rα鎖の転写誘導機構を解析した。まず、プロモーター領域にはIkaros、Runx、Etsなど転写因子の結合モチーフが保存されており、この内Etsの結合モチーフが転写誘導に重要であることを、レポーター法とゲルシフト法で確認した。さらに、プロモーターから3kb上流のヒトとマウスの間で高度に保存されている領域にグルココルチコイド受容体のモチーフが存在し、グルココルチコイド依存的な転写誘導に必要なことを確認した。

T cell selection, positive and negative selection, thymus DP stage, and antigen-specific expansion. The differentiation stage of terminal activated T cells is 2, and the IL-7R is present and temporarily decreased.いずれもTCR の Affinity のみ で Cell の生死がdetermination まるstage であり, survival and reproduction シグにシャットオフしていると卡えられる. The production and differentiation process of したがって and IL-7R are now controlled by the はリンパball の発 is very important. The purpose of this study is to solve the inducing mechanism of IL-7Rα locking enzyme and the inhibiting mechanism of TCR Analysis of the formation and differentiation process of リンパパball. The IL-7Rα lock of peripheral T cells stimulated by TCR is analyzed. Immobilized anti-CD3 antibody in spleen T cells The stimulation in vitro is good, the IL-7Rα lock is high before stimulation, and the appearance is high, and it disappears completely 16 hours after stimulation. As a result, the amount of IL-7Rα-locked mRNA was analyzed, halved at 1 hour after stimulation, and disappeared at 16 hours.さらに, このlower, TCR シグナルmolecule, P38, SB203580, SB203580, によってブロックされた.これらのRESULTS から、TCRのdegradable シグナルmolecules p38によってIL-7Rα lock 伝子の転WRITE が inhibit されることが明らかとなった. Second, IL-7Rα locks the induction mechanism and analyzes it.まず、プロモーター区にはIkaros、Runx、Etsなど転WRITE FACTORのcombinationモチーフがSaveされており、この内Etsのcombinationモチーフが転WRITE inducing であることを、レポーター法とゲルシフト法でconfirmationした.さらに、プロモーターから3kb上流のヒトとマウスの间で高に Save されている区にグルココルThe existence of the receptor and the dependence of the receptor are necessary to confirm the induction.