リンパ球の分化過程におけるIL-7レセプターの発現制御機構

淋巴细胞分化过程中IL-7受体表达的调控

• 批准号: 04F04225
• 负责人: 生田 宏一
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F04225/
• 关键词: サイトカイン; T細胞抗原受容体; シグナル伝達; 転写因子; T細胞

T細胞では、正と負の選択がおこる胸腺のDP段階と抗原特異的なクローン増幅がおこる末梢の活性化T細胞の2つの分化段階で、IL-7Rの発現が一時的に低下する。いずれもTCRの親和性のみで細胞の生死が決まる段階であり、余計な生存・増殖シグナルを入れる可能性のあるIL-7Rを積極的にシャットオフしていると考えられる。したがって、IL-7Rの発現制御はリンパ球の発生・分化過程で重要な役割を果たしている。本研究の目的は、IL-7Rα鎖遺伝子の転写誘導機構とTCRシグナルによるその抑制機構を解析し、リンパ球の生成・分化過程におけるIL-7Rの発現制御の意義を明らかにすることにある。まず、TCR刺激による末梢T細胞のIL-7Rα鎖の発現の変化を解析した。固相化抗CD3抗体でマウス脾臓T細胞をin vitroで刺激すると、刺激前にはIL-7Rα鎖が高レベルで発現していたものが、刺激後16時間で完全に消失した。次に、IL-7Rα鎖のmRNA量を解析した結果、刺激後1時間で半減し、16時間でほぼ消失した。さらに、この低下は、TCRの下流シグナル分子P38の阻害剤SB203580の添加によってブロックされた。これらの結果から、TCRの下流シグナル分子p38によってIL-7Rα鎖遺伝子の転写が抑制されることが明らかとなった。次に、IL-7Rα鎖の転写誘導機構を解析した。まず、プロモーター領域にはIkaros、Runx、Etsなど転写因子の結合モチーフが保存されており、この内Etsの結合モチーフが転写誘導に重要であることを、レポーター法とゲルシフト法で確認した。さらに、プロモーターから3kb上流のヒトとマウスの間で高度に保存されている領域にグルココルチコイド受容体のモチーフが存在し、グルココルチコイド依存的な転写誘導に必要なことを確認した。

T cell positive, negative selection, thymic DP, antigen-specific amplification, peripheral activated T cell differentiation, IL-7R production, and temporary decrease. IL-7R is active in the stage of cell life and death decision. IL-7R is an important part of the development and differentiation of the human body. The purpose of this study was to analyze the mechanism of IL-7R α gene expression induction and TCR inhibition, and to clarify the significance of IL-7R gene expression regulation in the process of IL-7R gene formation and differentiation. Analysis of IL-7R α lock expression in peripheral T cells stimulated by TCR Immobilized anti-CD3 antibody was detected in T cells stimulated in vitro, IL-7R α lock was detected before stimulation, and disappeared completely 16 days after stimulation. Next, IL-7R α mRNA levels were analyzed. Results showed that 1 time after stimulation, IL-7R α mRNA levels decreased by half, and 16 time after stimulation, IL-7R α mRNA levels disappeared. The addition of SB203580, a inhibitor of P38, to the TCR system As a result, the expression of IL-7R α protein was inhibited by p38 in TCR. Next, IL-7Rα lock and write induction mechanism analysis. The combination of Ikaros, Runx and Ets in the field is important for the preservation and induction of Ets. This is to confirm the existence of a 3kb upstream receptor in the domain where it is highly conserved and the necessity of a 3 kb upstream receptor in the domain where it is dependent.