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獲得免疫の成立過程におけるIL-7レセプターの機能

IL-7受体在获得性免疫建立过程中的作用

基本信息

批准号：
15019046
负责人：
生田宏一
金额：
$ 3.33万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は、末梢T細胞がTCRからの刺激を受けた後にIL-7Rの発現が低下する分子機構を解明することにある。まず、脾臓T細胞を固相化抗CD3抗体で刺激すると、IL-7Rの発現は16時間後にほとんど消失したが、この時のIL-7Rα鎖mRNAのレベルも著減していた。以上の結果から、IL-7Rの発現が転写レベルで制御されることが明らかとなった。次に、マウスIL-7Rα鎖遺伝子のプロモーター領域を解析した。全長cDNAの塩基配列から、IL-7Rα鎖遺伝子の転写が翻訳開始点の上流51bpと126bpの2カ所から開始することを確認した。マウスとヒトのIL-7Rα鎖遺伝子座の配列を比較すると、転写開始点の上流200bpの領域が高度に保存されていた。この領域には、Ikaros、PU.1、Runxの結合モチーフが保存されていた。また、マウスにはグルココルチコイド受容体(GR)の結合モチーフも存在した。次に、これらの領域をIL-7Rを発現しているプロB細胞株38B9に導入しレポーター法により解析すると、特異的な転写活性化能が検出された。さらに、この時、PU.1モチーフを破壊すると活性が10%減少し、GRモチーフを破壊すると44%減少した。逆に、IkarosとRunxのモチーフを破壊すると活性が上昇した。PU.1とGRモチーフをともに変異させると転写活性化能が完全に失われた。さらに、結合モチーフにこれらの転写因子が結合するかどうかをゲルシフト法により解析すると、38B9細胞の核抽出物の中にGRモチーフに結合する活性が検出され、この活性は抗GR抗体により消失した。一方、プロT細胞株KKFやT細胞株W14C17では、グルココルチコイド処理によりIL-7Rの発現が増強した。以上の結果から、IL-7Rα鎖遺伝子の転写を、PU.1とGRが正に、IkarosとRunxが負に調節することが示唆された。

In this study, the molecular mechanism of hypothalamus was demonstrated by peripheral T-cell TCR stimulation and the molecular mechanism of hypothalamus. Immobilization of anti-CD3 antibody in spleen and spleen cells stimulated the mouse, IL-7R showed that the temperature disappeared after 16 hours of incubation, and the IL-7R α-mRNA antibody was activated after 16 hours of incubation. The results of the above results, IL-7R system, now that you need to make sure that you can make sure that you know what you want to do. The second, the second The full-length cDNA base is equipped with a column, and the IL-7R α subscript starts from the upstream 51bp 126bp 2 to confirm the registration. In this case, the IL-7R alpha sub-seat is equipped with a comparison column, a write starting point, an upstream 200bp field height, and a high level of security information. The combination of field information, Ikaros, PU.1, and Runx is used to save the information in the field. Please contact the recipient (GR) in combination with each other in order to detect the presence of cancer. In recent years, in the field of IL-7R, the cell line 38B9 has been analyzed, and the activity of writing has been shown to be sensitive. During the first half of the year, the activity of PU.1 was 10% less than that of GR, and 44% less than that of normal. The reverse, Ikarosomatic Runx spoilage is broken and the activity is overloaded. PU.1, GR, write, write, write and activate. The combination of GR and anti-GR antibodies in the nuclear extractive of 38B9 cells showed that the activity of anti-GR antibodies was not detectable. On the one hand, KKF