IL-7レセプターを指標としたB細胞記憶形成機構の解明

以IL-7受体为指标阐明B细胞记忆形成机制

基本信息

批准号：
17659141
负责人：
生田宏一
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

インターロイキン7レセプター(IL-7R)は、リンパ球前駆細胞の増殖・分化や成熟T細胞の維持(ホメオスターシス)を介して免疫システムの形成と維持に重要な働きをしている。このユニークなサブユニットであるIL-7Ra鎖は、末梢T細胞で発現しているが、特に記憶T細胞の初期段階において高レベルで発現し、その維持に重要な働きをしている。一方、末梢B細胞ではIL-7Ra鎖が発現していないために、今までその機能については注目されていなかった。一方、末梢T細胞では、グルココルチコイド刺激により、IL-7Ra鎖遺伝子の転写が増強し、細胞表面でのIL-7Rの発現が増加する。そこで、末梢B細胞における、グルココルチコイド刺激によるIL-7Ra鎖の誘導を解析した。まず、脾臓B細胞を磁気ビーズで単離し、グルココルチコイド存在下で培養すると、6時間後には細胞表面でのIL-7Ra鎖の発現が検出され、12時間後にはピークになった。さらに、IL-7Ra鎖のmRNAレベルを定量的RT-PCRにより解析すると、2時間後には誘導が検出され、6時間後にはピークになった。さらに、誘導されたIL-7Rから生存シグナルが入るかどうか確認するために、B細胞をグルココルチコイドとIL-7で刺激すると、グルココルチコイド単独と比べて生存率が上昇することがわかった。また、この時シグナル分子Stat5がリン酸化され、標的遺伝子であるCis-1の転写が誘導された。以上の結果から、末梢B細胞においても、グルココルチコイド刺激によりIL-7Ra鎖遺伝子の転写が活性化され、機能的なIL-7Rの発現が誘導されることが明らかとなった。生体内においても末梢B細胞がIL-7Rを再発現し、生存シグナルを受け取る可能性が示唆された。

白介素7受体（IL-7R）通过增殖和分化淋巴细胞祖细胞和成熟T细胞的维持（稳态）在免疫系统的形成和维持中起重要作用。这个独特的亚基IL-7RA链在外围T细胞中表达，但在记忆T细胞的早期阶段尤其是高水平表达，并且在维持它中起着重要作用。另一方面，IL-7RA链没有在外围B细胞中表达，因此直到现在才吸引其功能。另一方面，在周围T细胞中，糖皮质激素刺激增强了IL-7R链基因的转录，并增加了IL-7R在细胞表面上的表达。因此，分析了外周B细胞中糖皮质激素刺激诱导IL-7RA链。首先，用磁珠分离脾脏B细胞，并在糖皮质激素的存在下培养，并在6小时以6小时检测到IL-7RA链在细胞表面上的表达，并在12小时时达到峰值。此外，当通过定量RT-PCR分析IL-7RA链的mRNA水平时，在2小时时检测到诱导并在6小时时达到峰值。此外，为了确认是否从诱导的IL-7R输入生存信号，我们发现与单独的糖皮质激素相比，用糖皮质激素刺激B细胞和IL-7增加了存活率。目前，信号分子STAT5被磷酸化，诱导靶基因CIS-1的转录。从上述结果中可以揭示出糖皮质激素刺激还激活了IL-7R链基因的转录，并且在外周B细胞中诱导了功能性IL-7R表达。有人提出，外围B细胞还会在体内重新表达IL-7R，并可能接收生存信号。