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細胞表面に発現する分子シャペロン複合体の生理機能の解明

阐明细胞表面表达的分子伴侣复合物的生理功能

基本信息

批准号：
14657078
负责人：
斉藤隆
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657078/
关键词：
分子シャペロン NFAM カルネキシンキメラ分子 NFAT シャペロン

项目摘要

本研究では、ERシャペロンであるカルネキシン(CNX)が細胞表面に発現しているという発見に基づいて、これがどのような分子と会合し、その機能は何か、を解析することを目的とした。これまで、カルネキシンは、TCRβ、pTαと会合することが解っていたが、今回、転写因子NFATを活性化する分子としてクローニングした新規遺伝子NFAM-Cが細胞表面でカルネキシンと会合することが判明し、NFAM-CとCNXの会合について解析した。(1)NFAM-Cの細胞外ドメイン、細胞内ドメインをMHCクラスIと置き換えたキメラ分子を作製し、CNXとの会合を調べたところ、NFAM-Cの細胞外ドメインを介してCNXと会合していることが示された。そこで、細胞外ドメインのGST融合蛋白が会合するかどうかについても調べたが、ポジティブな結果は得られず、相互作用に立体構造が重要である可能性が示唆された。(2)CNXが欠損している細胞株CEM-NKRにNFAM-Cをトランスフェクションし、NFAM-Cの発現がCNX依存性かどうかを解析した結果、CEM細胞でもNFAN-Cが細胞表面に発現することが判明した。この結果から、CNXとの会合は、NFAM-Cの細胞表面発現には不可欠でなく、より機能的な会合と考えられる。或いは、CEM細胞では、CNXの替わりに、異なるシャペロンが代用されている可能性も考えられる。一方、CNX自体が細胞表面に発現するためには、糖鎖を持つ分子との会合が必要なことは、CNXの糖鎖結合ドメインを欠損させた変異CNXの細胞表面発現が顕著に低下することから明らかになった。CNX-NFAM-C会合の生理的機能を検索するために、マクロファージの貧食能や、アポトーシスとの関係、細胞接着の可能性、など検討したが、現在までには明らかにすることができず、今後の検討課題となった。

In this study, the expression of ER and CNX on the cell surface was analyzed. The new gene NFAM-C is a new molecule that activates the gene NFAT. The new gene NFAM-C is a new protein that binds to the cell surface. The new gene NFAM-C is a new protein that binds to CNX. (1)NFAM-C extracellular matrix, intracellular matrix, MHC matrix, molecular modulation, CNX matrix, NFAM-C extracellular matrix, CNX matrix, molecular modulation, CNX matrix. The possibility of the fusion protein of GST and extracellular proteins converging on each other and interacting with each other in a three-dimensional manner is demonstrated. (2)CNX deficiency in CEM-NKR cell line NFAM-C expression and CNX dependence in CEM-NKR cell line NFAM-C expression were analyzed. The results of CNX and NFAM-C are as follows: CEM cells may be replaced by CNX, and the possibility of replacement may be examined. CNX itself is found on the surface of cells, and it is necessary to combine the sugar lock molecules. CNX is found on the surface of cells in different ways. The physiological function of CNX-NFAM-C rendezvous is discussed in detail.