骨髄移植によるインスリン抵抗性および肥満治療の試みと脂肪幹細胞の単離

尝试通过骨髓移植和脂肪干细胞分离治疗胰岛素抵抗和肥胖

• 批准号: 14657267
• 负责人: 山田 信博
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657267/
• 关键词: 骨髄移植; 肥満; 脂肪細胞; 遺伝子治療

骨髄細胞の脂肪細胞分化、正常分化脂肪細胞の導入のもたらす肥満やインスリン抵抗性への治療応用の可能性を検討する目的で、肥満とインスリン抵抗性のモデル動物であるレプチン欠損(ob/ob)マウスに骨髄移植を施行した。1:まず基礎検討として、CAG-GFPトランスジェニックマウスを用い、蛍光染色された骨髄細胞を、正常マウスに移植し、移植骨髄由来の細胞が脂肪組織に取り込まれるか検討した。GFPの蛍光染色を指標に検索すると、脂肪組織で弱く染色されるものの、非特異的な発色、血球細胞の混入の要素を考慮すると、正常状態での脂肪細胞への分化は極めて少ないと考えられた。2:正常(CAG-GFP)骨髄をob/obマウスに移植した。対照実験として、ob/obマウスの骨髄をob/obマウスに移植した。骨髄の生着は、蛍光血球、放射線後の生存により確認した。興味深いことに移植後、非処理コントロールob/obマウスに比して著明な体重増加の抑制が認められ高血糖、高インスリン血症も改善傾向を示しているが経過観察中である。しかしこの体重抑制効果は、正常骨髄,ob/ob骨髄移植、両群ともに認められた。正常群は、ob/ob骨髄移植群同様、血中レプチンは測定感度以下であり、骨髄由来に細胞が血中レプチン濃度への寄与は否定的であった。今後、より肥満の発症が著しくない若いob/obマウスを用いて同様の検討を実施中である。3:レプチンの補充療法としてex vivo治療を試みた。あらかじめレンチウイルスを用いてレプチンを遺伝子導入した正常(CAG-GFP)骨髄を作製し骨髄移植を行なった。現在その効果を検討中である。培養上清、血中とも遺伝子導入した細胞からのレプチンの分泌は確認している。4:骨髄移植によるob/obマウスの体重増加抑制は、放射線照射による影響の可能性が大きく、この機序を検討する実験も進行中である。

Objective: To investigate the possibility of therapeutic use of adipocyte differentiation and normal differentiation adipocytes in bone marrow cells. 1: Basic examination, CAG-GFP staining, light staining, bone marrow cells, normal bone marrow cells, cells derived from bone marrow grafts, subcutaneous fat samples. GFP light staining index detection, subcutaneous fat weak staining, non-specific staining, blood cell mixing factors to consider, normal state of adipocyte differentiation is extremely low. 2: Normal (CAG-GFP) bone graft ob/ob graft. For example, if you want to buy a car, you can buy a car. Bone marrow cells, blood cells, radiation and survival are confirmed. After transplantation, the ratio of non-treatment group to treatment group was significantly lower than that of control group. The increase of body weight was significantly inhibited, and the tendency of hyperglycemia and hyperglycemia to improve was also observed. The results of weight suppression, normal bone marrow,ob/ob bone marrow transplantation, and group recognition were compared. Normal group, ob/ob bone graft group, blood concentration, bone origin cells, blood concentration, and negative In the future, if you want to use the same method, you can use it. 3: Complementary therapy and ex vivo therapy. The use of CAG-GFP for bone graft control Now we're going to have a discussion. Cultured supernatant, blood and protein are introduced into the cells, and the secretion is confirmed. 4. The possibility of inhibiting weight gain during bone transplantation and radiation exposure is very high, and the mechanism of this process is under discussion.

项目成果

Sone H, Yamada N, et al.: "Obesity and type 2 diabetes in Japanese patients"Lancet. 361. 85 (2003)

Sone H、Yamada N 等人：“日本患者的肥胖和 2 型糖尿病”《柳叶刀》。

Okazaki H, Yamada N, et al.: "Lipolysis in the Absence of Hormone-Sensitive Lipase : Evidence for a Common Mechanism Regulating Distinct Lipases"Diabetes. 51. 3368-3375 (2002)

Okazaki H、Yamada N 等人：“激素敏感性脂肪酶不存在的情况下的脂肪分解：调节不同脂肪酶的共同机制的证据”糖尿病。

Yahagi N, Yamada N, et al.: "Absence of sterol regulatory element-binding protein-1 (SREBP-1) ameliorates fatty livers, but not obesity or insulin resistance in Lepob/Lepob mice"J Biol Chem. 277. 19353-19357 (2002)

Yahagi N、Yamada N 等人：“甾醇调节元件结合蛋白 1 (SREBP-1) 的缺失可改善 Lepob/Lepob 小鼠的脂肪肝，但不会改善肥胖或胰岛素抵抗”J Biol Chem。

Yoshikawa T, Yamada N, et al.: "Polyunsaturated fatty acids suppress sterol regulatory element-binding protein-1c promoter activity by inhibition of liver X receptor (LXR) binding to LXR response elements"J Biol Chem. 277. 1705-1711 (2002)

Yoshikawa T、Yamada N 等人：“多不饱和脂肪酸通过抑制肝脏 X 受体 (LXR) 与 LXR 反应元件的结合来抑制甾醇调节元件结合蛋白-1c 启动子活性”J Biol Chem。

Iida KT, Yamada N, et al.: "Insulin inhibits apoptosis of macrophage cell line, THP-1 cells, via phosphatidylinositol-3-kinase-dependent pathway"Arterioscler Thromb Vasc Biol. 22. 380-386 (2002)

Iida KT、Yamada N 等人：“胰岛素通过磷脂酰肌醇-3-激酶依赖性途径抑制巨噬细胞系 THP-1 细胞的凋亡”Arterioscler Thromb Vasc Biol。