"死のメディエーター":HMG-1の高感度測定と多臓器不全の診断法の確立

“死亡中介”：HMG-1高灵敏检测方法的建立及多器官衰竭诊断方法

• 批准号: 14657627
• 负责人: 丸山 征郎
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657627/
• 关键词: HMGB-1; 敗血症性ショック; RAGE; ARDS; TNFα; HMG-1; 多臓器不全; 細胞壊死; アポトーシス; 核内蛋白; 個体死

HMGB-1(High Mobility Group Box protein-1)は核内に存在し、DNAの立体構造維持・転写に必須の分子である。しかし驚いたことに、このHMGB-1は、あらゆる有核細胞の壊死、そしてマクロファージ系細胞の場合には、諸刺激に際して細胞外に分泌されてきて、"死のメディエーター"として働くことが明らかとなりつつある。申請者らが今回明らかにしたことは、以下の諸事実である。1.HMGB-1の高感度測定法の確立純化HMGB-1で兎を免疫して単一、多クローン性抗体を作成し、これを用いたHMGB-1の高感度ELISA測定法を確立した。このHMGB-1ELI6Aキットは、ヒトの血中のHMGB-1を高感度に測定しえた(感度1ng/ml以上)。2.本方法でHMGB-1を測定して以下の結果を得た。1)HMGB-1はショックの重症例で高値を示し、HMGB-1が高値の場合には極めて重篤な病態であることが示された。2)HMGB-1はARDS(Adult Respiratory Distress Syndrome)の肺胞液中、血中にも高値を示し、HMGB-1が肺障害のマーカーとなりうる。3)血清HMGB-1は癌の場合にも高値を示し、これには癌細胞由来と、マクロファージ由来のものがある可能性を示しているが、現時点では分泌型と壊死型は分子論的には識別しえない。3.HMGB-1はRAGE(Receptor for Advanced Glycation Endroducts)を介して、細胞に作用し、遷延した慢性炎症を惹起する。4.純化HMGB-1を細胞に作用させると、このRAGEを介して幅広いスペクトラム細胞に作用し、NF-kB活性化を介して、TNFαの産生、細胞のランダムな運動を誘導する。これはCDC42,Racを介するものである。これにより諸臓器のベリアー破綻と炎症が惹起されてくる。これらのことから、HMGB-1は"臓器不全"死のメディエーターエー"といいうる分子であることが明らかになった。

HMGB-1(High Mobility Group Box protein-1) is a molecule necessary for nuclear existence and for the maintenance of the three-dimensional structure of DNA. HMGB-1 is a nuclear cell that secretes out of cells when stimulated. The applicant shall return to the present day, and the following matters shall be carried out. 1. Establishment of a High Sensitivity Assay for HMGB-1 Purification of HMGB-1 and Preparation of a Polymeric Antibody for HMGB-1 Establishment of a High Sensitivity ELISA Assay for HMGB-1 HMGB-1ELI6A is highly sensitive to HMGB-1 in blood (sensitivity above 1ng/ml). 2. HMGB-1 was determined by this method and the following results were obtained. 1)HMGB-1 has a high value for severe cases, and HMGB-1 has a high value for severe cases. 2)HMGB-1 has high levels of ARDS(Adult Respiratory Distress Syndrome) in lung cytosol and blood, and HMGB-1 has lung damage. 3)The serum HMGB-1 level is higher than that of the cancer cells. 3. HMGB-1 mediates RAGE(Receptor for Advanced Glycation Endproducts), cellular effects, and chronic inflammation. 4. Purified HMGB-1 acts on cells, regulates RAGE, mediates NF-kB activation, TNFα production, and induces cellular motility. CDC42,Rac. This is the first time that we've seen this. The HMGB-1 is a "complete" machine.

项目成果

Krishna P.Sarker, Ikuro Maruyama, et al.: "Ebselen inhibits NO-induced apoptosis of differentiated PC12 cells via inhibition of ASK1-p38 MARK-p53 and JNK signalling and activation of p44/42 MAPK and Bcl-2"J Neurochem. 87. 1345-1353 (2003)

Krishna P.Sarker、Ikuro Maruyama 等人：“Ebselen 通过抑制 ASK1-p38 MARK-p53 和 JNK 信号传导以及激活 p44/42 MAPK 和 Bcl-2 来抑制 NO 诱导的分化 PC12 细胞凋亡”J Neurochem。

Sarker KP, Maruyama I: "Anandamide induces cell death independently of cannabinoid receptors or vanilloid receptor 1 : possible involvement of livid rafts."Cell Mol Life Sci.. 60(6). 1200-1208 (2003)

Sarker KP，Maruyama I：“Anandamide 独立于大麻素受体或香草素受体 1 诱导细胞死亡：可能涉及青色筏。”Cell Mol Life Sci.. 60(6)。

Yamaji, K., Krishna P.Sarker, Hashiguchi, T., et al.: "Endocannabinoids induces apoptotic cell death in cultured endothelial cells"Thromb. Haemost. (In press).

Yamaji, K.、Krishna P.Sarker、Hashiguchi, T. 等人：“内源性大麻素在培养的内皮细胞中诱导细胞凋亡”血栓。

Kanekura, T., Maruyama, I., Kanzaki et al.: "Granulocyte and monocyte adsorption apheresis for pyoderma gangreosum"J. Am Acad. Dermatol.. 47. 320-321 (2002)

Kanekura, T.、Maruyama, I.、Kanzaki 等：“坏疽性脓皮病的粒细胞和单核细胞吸附分离术”J。

Noboru Taniguchi, Ikuro Maruyama, et al.: "High Mobility Group Box Chromosomal Protein 1 Plays a Role in the Pathogenesis of Rheumatoid Arthritis as a Novel Cytokine"Arthritis & Rheumatisum. 48(4). 971-981 (2003)

Noboru Taniguchi、Ikuro Maruyama 等人：“高迁移率族盒染色体蛋白 1 作为一种新型细胞因子在类风湿性关节炎的发病机制中发挥作用”